腫瘤異常蛋白(TAP)在肝癌診斷及預后評估中的應用價值

西安交通大學醫學院第一附屬醫院感染科(西安 710061)

尹　毅▲　姚向波　趙英仁△

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腫瘤異常蛋白(TAP)在肝癌診斷及預后評估中的應用價值

西安交通大學醫學院第一附屬醫院感染科(西安 710061)

尹毅▲姚向波趙英仁△

目的:探討腫瘤異常蛋白 (TAP)在肝癌患者中的表達水平及對肝癌的診斷價值和復發評估作用。方法：選取原發性肝癌患者、良性肝病患者及健康體檢者各50例，分別檢測各組TAP、AFP水平，比較分析各組TAP水平差異以及術后TAP變化情況與肝癌患者無復發生存率(RFS)的相關性。結果：原發性肝癌組患者TAP水平顯著高于良性肝病組與對照組(P<0.05)，TAP與AFP聯合檢測對原發性肝癌的診斷敏感性顯著高于單獨檢測組(P<0.05)。50例肝癌患者的TAP術后1個月水平較術前顯著下降，且以術后1個月TAP水平評估為PR組的患者無復發生存率(RFS)顯著高于SD+PD組(P<0.05)。結論：腫瘤異常蛋白 (TAP)作為新的腫瘤標志物，在肝癌的診斷和復發評估中有著潛在的應用價值。

主題詞腫瘤/診斷腫瘤蛋白質類/代謝@腫瘤異常蛋白

原發性肝癌是常見的惡性腫瘤，其發病率在全球惡性腫瘤中占第五位，病死率居世界第三[1]，在我國惡性腫瘤病死率中排名第二[2]，我國也是每年肝癌新增病例數最多的國家[3]。由于肝癌早期無特異癥狀，患者發現時一般已處于中晚期，此時期肝癌的治療方式非常有限，療效極差。研究表明早發現、早治療，可以提高原發性肝癌患者的5年生存率[4]，篩查與早期診斷是肝癌預防的重點。目前診斷肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)臨床上常用的血清學篩查手段主要是檢測甲胎蛋白(AFP)，而高分化或分化很差的肝癌細胞往往不產生AFP，且AFP是一種胚胎內胚層衍生相關組織細胞的同源蛋白產物[5]，在活動性肝病、妊娠、胚胎癌等均有升高，作為肝癌篩查手段AFP陽性率僅為70%左右，臨床檢測的敏感度較低[6]。最近發現:正常細胞惡變時，細胞膜表面的聚糖結構發生變化，最常見的是N-鏈聚糖分支的增加，產生多種異常糖鏈糖蛋白即腫瘤異常蛋白(Tumor abnormal protein，TAP)，可釋放到體液中。當腫瘤細胞產生的TAP量達到一定程度時，即可以在末梢血液中檢出[7]。TAP不受肝細胞分化程度及各種炎癥等疾病影響，對HCC的早期診斷及療效監測具有重要意義。

資料與方法

1一般資料選取2012年1月至2014年1月于本院住院治療的50例原發性肝癌患者，男32例，女18例，平均年齡63歲。根據臨床表現、B超、CT等檢查，提示肝臟占位病灶或肝外轉移灶，均經病理組織學檢查，確診為原發性肝癌。所有患者均采用手術切除治療，術前未經化療。收集所有患者術前、術后1周、術后1個月指端末梢血，進行TAP含量測定。選擇本院同期住院的其他良性肝臟疾病(乙型肝炎、丙型肝炎、脂肪肝等)患者50例，男24例，女26例，平均年齡58歲。選擇50例在本院進行健康體檢的人員作為對照組，其中男25例，女25例，平均年齡55歲，排除器質性疾病，患者肝、腎功能正常。三組在年齡、性別方面比較差異未見統計學意義(P>0.05)。

2檢測方法

2.1TAP的檢測： 取各組研究對象指端末梢血，推制成厚薄均勻的血片3張，自然干燥。將TAP檢測試劑充分搖勻，用滴管垂直滴加在血片上，每張3滴；等血片上凝聚助劑自然干燥形成圓形“斑點”，將標本置于TAP集成閱片儀下，尋找特異形態的凝聚物。TAP正常/無明顯凝聚物：面積0～121μm2；TAP異常/凝聚物較小：面積121～225 μm2；TAP異常/凝聚物較大：面積≥225μm2。試劑和儀器均購自浙江瑞生醫療科技有限公司。

2.2 AFP的檢測： 采用Elecsys2010型全自動電化學發光免疫分析儀及試劑盒由羅氏診斷產品(上海)有限公司提供，所有操作參照說明書進行。

結　果

1三組TAP、AFP表達水平比較原發性肝癌組兩項指標的表達水平均高于良性肝病組和健康對照組，(P<0.05)，而良性肝病組和健康對照組二項指標表達水平比較差異未見統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　三組患者TAP、AFP表達水平

注：*與良性肝病組比較，P<0.05；*與健康對照組比較，P<0.05

2TAP、AFP單獨與聯合檢測在肝癌中的比較對于原發性肝癌患者，TAP檢測的敏感度與陽性率明顯高于AFP檢測所得，而特異度稍有偏低。但是兩者聯合檢測的敏感度與陽性率明顯高于各項單獨檢測，見表2。

表2　TAP、AFP單獨與聯合檢測在肝癌中的比較

注：*TAP檢測敏感度、特異度、陽性率與AFP檢測的比較P值;*TAP檢測敏感度、特異度、陽性率與兩者聯合檢測的比較P值;*AFP檢測敏感度、特異度、陽性率與兩者聯合檢測的比較P值

3肝癌患者手術前、后TAP表達水平比較肝癌患者手術后1周復查TAP水平較術前差別不大(189.2±156.8μm2)。而手術后1個月TAP值較術前顯著降低(90.6±121.5μm2)，差異具有統計學意義(P<0.01),見圖1。

4末梢血中TAP表達水平變化與患者預后的關系根據肝癌患者術后一個月TAP的水平，將患者分為PR(部分緩解-TAP正常/無明顯凝聚物)、SD(疾病穩定-TAP異常/凝聚物較小)、PD(疾病進展- TAP異常/凝聚物較大)。Kaplan-Meier生存分析顯示:末梢血TAP水平的動態變化與患者的無復發生存率顯著相關，且術后TAP水平評估為PR組的患者中位無復發生存率(RFS)為20個月，而SD+PD組僅為5個月，差異具有統計學意義(P<0.05)，見圖2。

* 表示與術前TAP水平相比差異具有統計學意義，P<0.01

圖1肝癌患者手術前后末梢血TAP表達水平的比較

圖2　肝癌患者TAP水平與無復發生存率(RFS)的關系

原發性肝癌多經歷慢性肝炎、肝硬化至肝細胞癌的過程，往往確診已是在中晚期，嚴重影響了疾病的治愈率和患者的生存率。目前臨床常用的檢測肝癌的血清學指標還不能滿足早診斷、早治療的目的。因此探尋新的一種無創性腫瘤標記物檢查，提高肝癌的陽性檢出率，對肝細胞癌的早期診斷及疾病發展的監測至關重要。

異常糖鏈糖蛋白(Tumor abnormal protein,TAP)又稱腫瘤異常蛋白，是腫瘤細胞在新陳代謝過程中排放的糖蛋白和鈣-組蛋白復合物的總稱，TAP的出現間接表示細胞癌變的數量和程度。當TAP達到一定程度后,這類物質向血液排放,并較多地存在于外周血液[8]。TAP在肝臟腫瘤具有較高表達,陽性率為70%～95%[9]，消化系統腫瘤高危人群的篩選中TAP檢測系統特異度為97.7%，誤診率為2.3%[10]。將其作為肝癌血清學檢測的指標，對發現癌前病變有較高的靈敏度和特異性。

本實驗選取原發性肝癌患者、良性肝病患者及健康體檢者各50例，分別檢測各組TAP、AFP水平，結果顯示TAP在原發性肝癌患者中的表達水平明顯高于肝臟良性病變組與健康對照組。TAP單獨檢測的陽性率及敏感度均高于AFP的檢測，與AFP聯合檢測可以提高肝癌的診斷率，敏感性可達94.5%，陽性率達到80.2%，且與TAP單獨檢測比較差異均具有統計學意義。因此，TAP可作為肝癌診斷的補充及聯合檢測指標，為早期肝癌的篩查和監測提供良好參考依據。

本實驗研究還檢測50例肝癌患者術前、術后1周和術后1個月的TAP水平，結果顯示肝癌患者術后1周復查TAP水平較術前有所上升，而術后1個月TAP濃度顯著下降，這可能由于術后1周手術創傷炎癥反應或并發感染未完全恢復所致，提示選擇術后1個月TAP值作為復查指標更為合理。而根據肝癌患

者術后一個月TAP的水平，將患者分為PR(部分緩解-TAP正常/無明顯凝聚物)、SD(疾病穩定-TAP異常/凝聚物較小)、PD(疾病進展- TAP異常/凝聚物較大)三組,生存分析顯示，術后TAP水平與患者的無復發生存率(RFS)顯著相關，且評估為PR組的患者無復發生存率明顯高于SD+PD組，證實了TAP可作為肝癌術后復發評估的的指標。

總之，我們通過TAP與血清腫瘤標志物聯合檢測診斷不但能發現早期肝癌，最重要的是當人體內的癌細胞數大于100萬個時就能及時發現，此時人體內尚未形成腫塊，為肝癌的防治爭取到了寶貴的時間。術后根據患者一個月后TAP的水平，還可以對患者的生存及預后進行評估，為臨床制定科學合理的診療措施提供有力依據。因此TAP作為一項新的生物學檢測指標，在肝癌的早期診斷、療效評價以及復發評估中有著潛在的應用價值。

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[2]黃光琳,鄭軍.肝癌血清標志物研究進展[J].陜西醫學雜志, 2010,39(12):1681-1682.

[3]Jemal A, Bray F, Center MM,etal. Global cancer Statistics [J].CA Cancer J Clin,2011,61(2):69-90.

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(收稿：2016-02-26)

Research of tumor abnormal protein(TAP)in diagnosis and recurrence assessment of hepatocellular carcinoma

Department of Infectious Diseases, The First Affiliated Hospital of Medical College,

Xi'an Jiaotong University(Xi'an 710061)Yin YiYao XiangboZhao Yingren

Objective：To investigate the serum tumor abnormal protein(TAP)levels and its relevance in diagnosis and recurrence assessment of patients with Hepatocellular Carcinoma. Methods：50 cases of liver cancer group、benign liverdisease group and healthy people as control group were selected, serum TAP、AFP of patients and healthy people mentioned above were detected.observed the changes and its relationship to relapse-free survival(RFS). Results:Serum levels of TAP of patients in primary liver cancer group were significant higher than those in benign liver disease group and control group(P<0.05). Sensitivity of TAP detection combined with AFP in primary liver cancer diagnosis was obvious higher than those in detection groups without TAP(P<0.05)．Conclusion : Average TAP concentration of 50 cases of liver cancer patients after 1 months were significantly lower than those before surgery(P<0.05).Furthermore,one month after surgery,the relapse- free survival(RFS) of patients whose TAP level achieved PR was significantly longer than that of SD+PD group(P<0.05). Conclusion: Serum TAP as a new tumor marker has potential applications in the diagnosis and assessment of recurrence of hepatocellular carcinoma.

Liver neoplasms/diagnosisNeoplasm proteins/metabolisin@Tumor abnormal protein

R735.7

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.09.074

▲西安市第八醫院肝病科