探討微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系

梁曉東

鹽城市第三人民醫院病理科，江蘇鹽城 224001

*病理研究*

探討微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系

梁曉東

鹽城市第三人民醫院病理科，江蘇鹽城 224001

目的 探討微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系。方法 選取該院于2014年6月—2016年8月期間收治的32例胃癌患者當作研究對象。收集這32例患者的胃癌組織標本與癌旁正常組織標本。應用原位雜交技術，對微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織、癌旁正常組織之中的表達情況。探討分析胃癌組織中微小RNA-451(miR-451)的表達水平，并分析胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系。 結果 微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織中的高表達率為36.11%，明顯低于癌旁正常組織的77.78%；III～IV期胃癌患者的微小RNA-451(miR-451)高表達率為47.62%，明顯低于I～II期胃癌患者的86.67%；有淋巴結轉移者的微小RNA-451(miR-451)高表達率為47.06%，明顯低于無淋巴結轉移者的78.95%；微小RNA-451(miR-451)高表達者的生存率為69.23%，明顯高于微小RNA-451(miR-451)低表達者的39.13%；上述差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論 微小RNA-451(miR-451)與胃黏膜組織的惡性病變、胃癌組織浸潤轉移、預后具有明顯的相關性，可能是胃癌的新治療靶點。

微小RNA-451；表達；胃癌；臨床病理特征；預后

隨著市場經濟的發展，人們的生活水平與生活質量不斷提高，但隨著生活方式與飲食習慣的改變，導致胃腸道疾病的發生率不斷上升。胃癌是一種較為常見的消化系統惡性腫瘤性疾病，在我國的發病率較高，嚴重威脅著患者的生命財產安全與生活質量。胃癌的發生涉及諸多因素，既包括癌基因，也包括抑癌基因，胃癌的病理發展是一個多步驟、多階段的過程，而微小RNA是近年來分子生物學的一大研究熱點[1]。雖然近年來關于微小RNA在胃癌中的表達及臨床意義的研究報道層出不窮，但就現階段來說，關于微小RNA-451(miR-451)在胃癌中的表達以及微小RNA-451(miR-451)與胃癌的臨床病理特征、預后的關系方面的研究報道仍舊比較少。基于此，該研究通過對2014年6月—2016年8月期間鹽城市第三人民醫院收治的32例胃癌患者的臨床資料進行回顧性分析，旨在探討微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 應用雜交爐，原位雜交檢測試劑盒，恒溫水浴箱以及微小RNA-451(miR-451)探針。

1.2.2 微小RNA-451(miR-451)表達的檢測方法 應用原位雜交技術進行檢測。烤片后常規切片，然后進行脫蠟處理，應用梯度乙醇復水的方法[2]；應用3%過氧化氫，對內源性酶進行滅活；在室溫條件下，3%胃蛋白酶常規消化15～20 min，然后水洗、固定；滴加提前準備好的預雜交液之后，在55℃的環境中預雜交2 h；miR-451探針使用地高辛標記，并將其置于55℃的環境中雜交過夜；第2天，使用不同濃度的SSC（saline sodium citrate）緩沖溶液對其進行洗滌[3]；之后滴加封閉液，在室溫狀態下封閉 30 min；取出后滴加生物素化鼠抗地高辛，并在室溫狀態下孵育2 h然后滴加SABC液，并在室溫狀態下孵育30 min；最后應用DAB顯色，并使用蘇木素進行復染，對其進行充分水洗之后，再應用中性樹膠進行封片、保存。

1.3 檢測結果判定

胃癌細胞胞質、胃癌細胞胞核或胃黏膜上皮出現棕黃色顆粒，為微小RNA-451(miR-451)陽性。評估微小RNA-451(miR-451)陽性信號強度，并賦予分值[4]。無：0～1分（含）；弱信號：1（不含）～2分（含）；中等信號：2分（不含）～3分（含）；強信號：3（不含）～4分（含）。計數陽性細胞，在400倍顯微鏡下，每個標本分別選取3個典型視野，并對微小RNA-451(miR-451)陽性細胞占比進行計算。陽性細胞占比×信號強度即為表達得分，得分為0～4分,2分以下為低表達，2分及以上為高表達。由兩位病理醫師對組織芯片結果進行獨立鏡檢以及評分。

1.4 統計方法

應用SPSS 13.0統計學軟件進行數據分析與處理。用[n（%）]表示計數資料，組間比較的時候采取確切概率法或χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

對于油脂產品的需求我國甚至是全世界都呈現一種較高的趨勢，對于食用油的消費數量也逐年增多，在我國油脂行業存在的優勢可見，其發展前景是十分廣闊的，隨著經濟的發展，人口數量的不斷增加，生活水平的不斷提高，對于未來油脂產品的消費空間還會有較大的上升空間。在我國，城鎮化進程不斷加快，我國養殖業也必將面臨較大的規模增長，人們對于肉食需求的增長也從一定程度上促進了油脂加工行業發展的逐步擴張，對于食用油消費的需求總量上始終保持著剛性增長的趨勢。

2 結果

2.1 微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織中的表達

微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織中的高表達率為36.11%，明顯低于癌旁正常組織的77.78%；差異有統計學意義（P＜0.05）。具體見表1。

表1 微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織與癌旁正常組織中的表達比較[n（%）]

2.2 微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征的關系

相比較于I～II期的胃癌患者，III～IV期胃癌患者的微小RNA-451(miR-451)高表達率明顯較低，且差異有統計學意義（P＜0.05）；相比較于無淋巴結轉移者，有淋巴結轉移者的微小RNA-451(miR-451)高表達率明顯較低，且差異有統計學意義（P＜0.05）；具體見表2。

表2 胃癌患者微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌各項臨床病理特征的關系[n（%）]

2.3 微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌預后的關系

對患者及其家屬行4～30個月的電話隨訪，23例微小RNA-451(miR-451)低表達者中14例死亡，其病死率為60.87%，9例生存，生存率為39.13%；13例微小RNA-451(miR-451)高表達者中4例死亡，其病死率為30.77%，9例生存，生存率為69.23%。微小RNA-451(miR-451)高表達者的生存率明顯高于微小RNA-451(miR-451)低表達者，差異有統計學意義 （P＜0.05）。說明微小RNA-451(miR-451)表達水平越高，患者的生存時間也就越好，代表預后越好。

3 討論

在不同類型的腫瘤中，微小RNA的表達存在很大的差異，表達異常的微小RNA，一般情況下位于相關癌癥基因的突變位點[5]。且相關研究發現，胃癌中，微小RNA表達異常的機制主要包括：①RNA甲基化狀態；②參與微小RNA形成的蛋白因子存在異常；③微小RNA所在的基因發生了轉位、擴增或者缺失等[6]。

在胃癌組織中，有多種微小RNA的表達，微小RNA的表達水平不同，胃癌患者的預后也存在一定的差異。張軍等人[7]的研究指出，在胃癌組織中微小RNA-215與胃癌的分化程度、臨床病期分類分期及淋巴結轉移等密切相關；微小RNA-215的表達在胃癌細胞中高于正常胃黏膜細胞株，其表達量與胃癌細胞的分化程度之間無明顯相關性。汪偉等人[8]通過進行試驗發現，miR-451及MIFmRNA與胃癌的分化程度、TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移相關，從而得出如下結論，miR-451可能通過抑制MIF負向調控了胃癌的發生、發展作用。王利平等人[9]發現，癌旁非腫瘤組織、胃癌組織中miRNA-100的相對表達量分別為（0.74±0.36）、（1.31±0.69）；胃癌組織中miRNA-100的表達與患者的性別、年齡、腫塊位置、腫塊大小、分化程度、TNM分期、淋巴結轉移等因素均無明顯的相關性，從而得出結論miRNA-100在胃癌中的異常表達可能與胃癌的發生有關。

該研究通過回顧性分析該院于2014年6月—2016年8月期間收治的32例胃癌患者的臨床資料，探討微小RNA-451(miR-451)的表達與胃癌的臨床病理特征及預后之間的關系。結果發現：微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織中的高表達率為36.11%，明顯低于癌旁正常組織的77.78%；TNM分期III～IV期胃癌患者的微小 RNA-451(miR-451)高表達率為47.62%，明顯低于TNM分期I期～II期胃癌患者的86.67%；有淋巴結轉移者的微小RNA-451(miR-451)高表達率為47.06%，明顯低于無淋巴結轉移者的78.95%；微小RNA-451(miR-451)高表達者的生存率為69.23%，明顯高于微小RNA-451(miR-451)低表達者的39.13%。這一研究結果與相關文獻，如陳濤等人[10]的研究結果：92例胃癌組織中 miR-451高表達率為38.04%（35/ 92），正常胃黏膜組織中 miR-451高表達率為76.60%（36/ 47）；III～IV期胃癌患者的微小 RNA-451高表達率為27.3%（15/55），I～II期胃癌患者的高表達率為54.1%（20/ 37）；有淋巴結轉移的胃癌組織中 miR-451的高表達率為27.1%（16/59），無淋巴結轉移的胃癌組織中 miR-451的高表達率為33.19%（19/33），存在一致性。這一研究結果說明，微小RNA-451(miR-451)在胃癌組織中的高表達率明顯低于癌旁正常組織，微小RNA-451(miR-451)在胃癌中的表達水平，與胃癌患者的淋巴結轉移以及TNM分期之間密切相關。

綜上所述，微小RNA-451(miR-451)與胃黏膜組織的惡性病變、胃癌組織浸潤轉移、預后具有明顯的相關性，可能是胃癌患者的新治療靶點以及預后及診斷的新的潛在分子標志物。

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[2]王凡,任曉峰,徐余超,等.微小RNA-451在胃癌組織的表達及對胃癌細胞周期的影響[J].環境與職業醫學,2016,33（5）:455-460.

[3]巢海潮,董志峰,張古月,等.miRNA-451在膀胱癌細胞中的表達及對其生物學功能的影響[J].臨床與病理雜志, 2016,33（9）:1350-1355.

[4]劉博,田延鋒,趙增仁,等.microRNA-451在結直腸癌組織中的表達及其臨床意義[J].中國普通外科雜志,2013,22（4）:447-451.

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[7]張軍,陳兆峰,劉曉光,等.微小RNA-215在胃癌中的表達及其臨床意義[J].蘭州大學學報：醫學版,2013，39（4）:13-16，20.

[8]汪偉,孫曉娜,張玉峰,等.miR-451與MIF在胃癌組織中表達的相關性研究[J].安徽醫科大學學報,2013（11）:1384-1387.

[9]王利平,王啟之,鄧敏,等.微小RNA-100在胃癌中的表達及臨床意義[J].蚌埠醫學院學報,2015，40（1）:37-39，42.

[10]陳濤,謝黎明,唐海林.miR-451在胃癌組織中的表達及其臨床意義[J].天津醫藥,2015,43（3）:267-269，337.

Objective to Investigate the Relationship between the Expression of Minimal RNA-451(miR-451)and Clinicopatho Logical Features and Prognosis of Gastric Cancer

LIANG Xiao-dong
Department of Pathology Yancheng City Third People's Hospital,Yancheng,Jiangsu Province,224001 China

Objective To investigate the relationship between the expression of minimal RNA-451 (miR-451)and clinicopathological features and prognosis of gastric cancer.Methods 32 patients with gastric cancer who were treated in our hospital from June 2014 to August 2016 were selected as subjects.Specimens of gastric cancer tissues and normal tissues were collected from 32 patients.The expression of small RNA-451(miR-451)in gastric cancer tissues and adjacent normal tissues was studied by in situ hybridization.To investigate the expression of minimal RNA-451(miR-451)in gastric carcinoma and to analyze the relationship between clinicopathological features and prognosis.Results Small RNA-451 (miR-451)in the tissue of gastric cancer high expression rate is 36.11%, significantly less than 77.78%of the normal tissue adjacent to carcinoma;Phase III～IV gastric cancer patients with tiny RNA-451 (miR-451)of high expression rate is 47.62%,significantly less than 86.67%of the patients with stage I～II gastric cancer;With lymph node metastasis is tiny RNA-451(miR-451)of high expression rate is 47.06%,significantly lower than without lymph node metastasis is 78.95%;Small RNA-451 (miR-451)the high expression of survival rate was 69.23%,significantly higher than thesmall RNA-451 (miR-451)lower expression of 39.13%;The difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion Micro RNA-451 (miR-451)has a significant correlation with malignant lesions of gastric mucosa,invasion and metastasis of gastric cancer, and may be a new therapeutic target for gastric cancer.

Minimal RNA-451;Expression;Gastric cancer;Clinicopathological features;Prognosis

R735.2

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.04.07

2016-10-01；

2016-11-12

梁曉東（1980.2-），男，江蘇鹽城人，本科，主治醫師，研究方向：病理學。