亞貢葉化學成分的分離與鑒定△

王曉彤，冉小庫，徐煜彬， ，薛凡親，竇德強*，董鋒

(1.遼寧中醫藥大學，遼寧 大連 116600；2.珍奧集團股份有限公司，遼寧 大連 116600)

·基礎研究·

亞貢葉化學成分的分離與鑒定△

王曉彤1，冉小庫1，徐煜彬1，KhinKhinWinAung1，薛凡親1，竇德強1*，董鋒2

(1.遼寧中醫藥大學，遼寧 大連116600；2.珍奧集團股份有限公司，遼寧 大連116600)

目的：對亞貢葉的化學成分進行研究。方法：采用硅膠、ODS和LH-20等柱色譜以及半制備HPLC對亞貢葉的乙醇提取物進行分離純化。結果：分離得到4個化合物，經譜學數據鑒定為亞麻酸甲酯[(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate，1)，鄰苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate，2)，沼菊素(Enhydrin，3)和PolymatinB(4)。結論：化合物1和2為首次從亞貢葉中分離得到。

亞貢葉；亞麻酸甲酯；鄰苯二甲酸二丁酯；沼菊素

亞貢Smallanthussonchifolius為菊科(Compositae)菊薯屬(Smallanthus)多年生草本植物[1]。研究表明亞貢葉具有降血糖、降血壓、抗氧化、抑菌等作用，對高血壓、動脈粥樣硬化、消化道和循環系統疾病以及結腸癌都有一定的治療作用[2-6]。亞貢已經引種到我國海南、臺灣、云南、江蘇、遼寧等地，并在多地已經形成了大規模的種植基地，在商場目前已有亞貢根莖作為食品銷售，而亞貢葉往往作為廢棄物被丟棄在田間，因此為了亞貢葉的廣泛利用，我們對亞貢葉進行了化學成分的研究，從亞貢葉的乙醇提取物中，利用硅膠、ODS和LH-20等柱色譜以及半制備HPLC等方法，分離得到4個化合物。通過1H-和13C-NMR，GC-MS等譜學數據和文獻對照分析，確定這些化合物分別是亞麻酸甲酯[(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate，1]，鄰苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate，2)，沼菊素(enhydrin，3)和polymatin B(4)，其中化合物1和2為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

BRUKER-ARX-500核磁共振波譜儀(德國)；ODS(富吉，日本)；Agilent1260高效液相色譜系統(配有DAD檢測器、在線脫氣機、自動進樣器，美國安捷倫Agilent科技公司)；890/5975C氣相色譜/質譜聯用儀(美國Agilent公司)，HITACHI7100制備型高效液相色譜儀(日本)；YMC-PackODS-A色譜柱(250mm×10mm，5μm，日本)；柱色譜及TLC所用硅膠(青島海洋化工廠)；FA-1004電子天平(上海精科天平廠)；液相用甲醇為色譜純(天津市大茂化學試劑廠)。其他試劑均為分析純。

亞貢葉于2012年采自遼寧省大連市開發區得勝鎮，經遼寧中醫藥大學藥學院康廷國教授鑒定為菊科植物亞貢Smallanthussonchifolius的葉。

2 提取與分離

取干燥的亞貢葉(5.0kg)，粉碎成粗粉，以10倍量95%乙醇浸泡2h，60℃水浴回流提取，過濾，藥渣繼續加乙醇10倍量提取，過濾，合并兩次濾液，回收乙醇，旋轉蒸發儀懸至近干，置真空干燥箱干燥。

取上述所得干燥浸膏，加甲醇溶解，以100～200目硅膠拌樣，以200～300目硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，得到6個餾分，將第1個和第2個餾分分別通過ODS和LH-20柱色譜以及半制備HPLC，最終從第1個餾分中分離并鑒定得到化合物1，從第2個餾分分離并鑒定得到化合物2～4。

3 結構鑒定

化合物1：無色油狀液體。13C-NMR(CDCl3，125MHz)：δ174.3(C-1)，δ132.0(C-16)，δ130.3(C-9)，δ128.3(C-11)，δ128.3(C-12)，δ127.8(C-14)，δ127.1(C-10)，δ51.4(OCH3)，δ34.1(C-2)，δ29.6(C-7)，δ29.1(C-6)，δ29.1(C-5)，δ29.1(C-4)，δ27.2(C-8)，δ25.6(C-11)，δ25.5(C-14)，δ24.9(C-3)，δ20.6(C-17)，δ14.3(C-18)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)：δ5.31(6H，m，H-9，10，12，13，15，16)，δ3.67(3H，s，OCH3)，δ2.04(4H，t，5.4Hz，H-8，H-17)，δ1.6(2H，m，H-3)，δ1.28～1.31(8H，brs，H-4，5，6，7)，δ0.97(3H，t，J=7.5 Hz，H-18；GC-MS，m/z292.3[M]+，277.1[C18H29O2]+，261.1，236.2，223.2，204.1，191.2，177.2，163.1，149.1，135.1，121.1，108.1，95.1，79.1，55.1，41.1，27.1。通過GC-MS數據庫匹配結果以及譜學數據與文獻對照基本一致，確定化合物1為(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate(亞麻酸甲酯)[7]。化學結構見圖1。

化合物2：白色粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ167.8(C-1)，δ132.3(C-2)，δ130.9(C-3)，δ128.9(C-4)，δ65.6(C-1′)，δ30.6(C-2′)，δ19.2(C-3′)，δ13.7(C-4′)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)：δ7.74(2H，d，5.5Hz，H-3)，δ7.55(2H，d，5.5Hz，H-4)，δ4.32(4H，t，6.72Hz，H-1′)，δ1.74(4H，m，6.84 Hz，H-2′)，δ1.47(4H，m，7.44 Hz，H-3′)，δ0.99(6H，t，7.44 Hz，H-4’)。經文獻檢索發現，該化合物碳譜與氫譜數據與文獻基本一致[8]，該化合物高度對稱，因此碳數目為碳譜給出數據的2倍，確定化合物鄰苯二甲酸二丁酯。化學結構見圖1。

化合物3：白色無定形粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ149.5(C-1)，δ24.7(C-2)，δ35.4(C-3)，δ59.3(C-4)，δ62.8(C-5)，δ76.0(C-6)，δ60.0(C-7)，δ71.3(C-8)，δ70.4(C-9)，δ130.1(C-10)，δ133.4(C-11)，δ168.0(C-12)，δ123.0(C-13)，δ165.5(C-14)，δ17.5(C-15)，δ168.4(C-1′)，δ59.4(C-2′)，δ45.5(C-3′)，δ13.6(C-4′)，δ19.1(C-5′)，δ170.4(Ac)，δ20.9(-COCH3)，δ52.6(-OCH3)。將該化合物譜學數據與文獻對照[9]，鑒定該化合物為已知化合物沼菊素(enhydrin)。化學結構見圖1。

化合物4：白色粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ148.2(C-1)，δ26.1(C-2)，δ37.0(C-3)，δ138.6(C-4)，δ126.3(C-5)，δ75.5(C-6)，δ51.1(C-7)，δ69.2(C-8)，δ71.3(C-9)，δ130.7(C-10)，δ134.6(C-11)，δ169.4(C-12)，δ121.7(C-13)，δ166.0(C-14)，δ17.0(C-15)，δ170.1(C-OAc)，δ20.8(-COCH3)，δ166.3(C-1′)，δ126.9(C-2′)，δ139.4(C-3′)，δ15.7(C-4′)，δ20.4(C-5′)，δ52.3(-OCH3)。經文獻檢索，發現該化合物碳譜數據與文獻基本一致[10]，因此確定該化合物為polymatin B。化學結構見圖1。

注：1.亞麻酸甲酯;2.鄰苯二甲酸二丁酯;3.沼菊素;4.polymatin B圖1 化合物1～4的化學結構

[1] Valentová K，Frcek J，Ulrichová J.Yacon (Smallanthussonchifolius) and maca (Lepidiummeyenii)，traditional andean crops as new functional foods on the european market[J].Feedback，1997，91：594.

[2] 金文聞，余龍江，孟思進，等.亞貢的植物學及其藥理作用研究概況[J].中草藥，2006，37(4)：633-636.

[3] Habib N C，Honoré S M，Genta S B，et al.Hypolipidemic effect ofSmallanthussonchifolius(yacon) roots on diabetic rats：Biochemical approach[J].Chem-Biol Interactions，2011，194(1)：31-39.

[4] Oliveira G O，Braga C P，Fernandes AAH.Improvement of biochemical parameters in type 1 diabetic rats after the roots aqueous extract of yacon[Smallanthussonchifolius(Poepp.& Endl.)] treatment[J].Food Chem Toxicol，2013，59：256-260.

[5] Dwivedi S，Sahrawat K，Puppala N，et al.Plant prebiotics and human health：Biotechnology to breed prebiotic-rich nutritious food crops[J].Electronic J Biotechnol，2014，17(5)：238-245.

[6] Satoh H，Kudoh A，Hasegawa K，et al.Yacon supplementation reduces serum free fatty acids and tumor necrosis factor alpha concentrations in patients with type 2 diabetes[J].Diabetol Int，2014，5(3)：165-174.

[7] 曾浩洋，阿布拉江·克依木，劉艷，等.寬裂龍蒿地上部分化學成分研究[J].中草藥，2013，44(9)：1096-1100.

[8] 藍鳴生，羅超，譚昌恒，等.山風乙酸乙酯部位的化學成分研究[J].中藥材，2012，35(2)：229-231.

[9] Tak H，Fronczek F R，Vargas D，et al.Assignments of the13C-NMR spectra of enhydrin and 2′，3′-dehydromelnerin A and the molecular structure of enhydrin[J].Spectrosc Lett，1994，27(10)：1481-1488.

[10] Inoue A，Tamogami S，Kato H，et al.Antifungal melampolides from leaf extracts of Smallanthus sonchifolius[J].Phytochemistry，1995，39(4)：845-848.

PhytochemicalStudyonSmallanthussonchifoliusLeaves

WANGXiaotong1，RANXiaoku1，XUYubin1，KhinKhinWinAung1，XUEFanqin1，DOUDeqiang1*，DONGFeng2

(1.LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，China；2.Zhen’aoGroupLimitedbyShareLtd，Dalian116600，China)

Objective：To study the chemical constituents ofSmallanthussonchifoliusleaves.Methods：Silica gel，ODS and Sephadex LH-20 column chromatographies and semipreparative HPLC were used to separate and purify the ethanol extract of the leaves.Results：Four compounds were obtained and identified as (9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate (1)，dibutylphthalate (2)，enhydrin (3) and polymatin B (4).Conclusion：Compounds1and2were isolated fromS.sonchifoliusleaves for the first time.

Smallanthussonchifolius；(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate；dibutylphthalate；enhydrin

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.006

2015-12-10)

遼寧省高等學校創新團隊課題(LT2013020)；遼寧省教育廳一般項目(L2013364)；遼寧中醫藥大學2015年度大學生創新創業訓練計劃(201510162000057)

*

竇德強，教授，博士，研究方向：天然藥物的研究與開發；Tel：(0411)85890143，E-mail：deqiangdou@126.com