云南省騰沖縣八種樹材用于培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培菌棒的研究

王秋穎，李立屯

(1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193；2.云南省騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山 679100)

云南省騰沖縣八種樹材用于培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培菌棒的研究

王秋穎1*，李立屯2

(1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京100193；2.云南省騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山679100)

目的：合理利用當(dāng)?shù)亓帜举Y源，尋找更多適合天麻蜜環(huán)菌栽培生長(zhǎng)的樹材；方法：通過前期的三級(jí)種培養(yǎng)篩選試驗(yàn)之后，有目的性地選取云南騰沖縣八種當(dāng)?shù)爻Ｒ姌浞N制成菌棒，每種菌棒種1m2，三個(gè)重復(fù)，培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培種，觀察不同樹材的接菌速度、接菌率、蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)速度以及樹材特性；結(jié)果：歐洲山毛櫸和酸角樹接菌速度快，接菌率高，菌索生長(zhǎng)速度也較快；金葉子、厚皮香、榿木、西南樺的綜合情況也較好；結(jié)論：實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，八種樹材中除了白杜娟和南燭綜合情況不理想之外，其他六種樹材都適合作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的菌材，其中豆科、山茶科和杜鵑花科屬于以前沒有用于生產(chǎn)過蜜環(huán)菌栽培種的的樹種。

菌材；蜜環(huán)菌；栽培；騰沖

蜜環(huán)菌Armillariamellea是天麻GastrodiaelataBlume生長(zhǎng)過程中的共生菌，二者之間具有極為密切的營(yíng)養(yǎng)關(guān)系[1-3]。蜜環(huán)菌以菌索的形態(tài)侵染天麻，天麻同化蜜環(huán)菌獲得營(yíng)養(yǎng)，在天麻的栽培生產(chǎn)中，蜜環(huán)菌三級(jí)種首先要侵入菌棒，通過分解纖維素和木質(zhì)素供給營(yíng)養(yǎng)，才能保證自身正常生長(zhǎng)發(fā)育[4]。蜜環(huán)菌生長(zhǎng)對(duì)菌材具有一定的選擇性，培養(yǎng)蜜環(huán)菌通常要選擇木質(zhì)堅(jiān)實(shí)、容易接菌的樹材，常用的有殼斗科的歐洲山毛櫸、櫟木，在某些地方也有使用速生樹種樺樹、核桃樹做菌材[5]。天麻種植耗材量大[6]，殼斗科樹木生長(zhǎng)緩慢[7]，大面積砍伐不利于生態(tài)保護(hù)。云南省騰沖縣森林資源豐富[8]，為了從本地森林資源中找到適合天麻蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的更為經(jīng)濟(jì)的樹種，作者選擇了當(dāng)?shù)?種樹材作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培菌棒的菌材，比較蜜環(huán)菌在生長(zhǎng)過程中的接菌時(shí)間、菌索生長(zhǎng)速度、顏色變化、密集程度等，以期篩選出適適宜蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的菌材，為當(dāng)?shù)靥炻榇竺娣e栽培提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1材料

實(shí)驗(yàn)的8種樹材來源于云南省保山市騰沖縣，這些樹種均為當(dāng)?shù)刭Y源較豐富的樹材，并且質(zhì)地都比較堅(jiān)硬，通過前期的蜜環(huán)菌三級(jí)種篩選實(shí)驗(yàn)所得，詳細(xì)信息如表1。

1.2蜜環(huán)菌菌種

實(shí)驗(yàn)所用的蜜環(huán)菌菌種為中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所真菌室保存的A9菌株制備的三級(jí)種。

表1 實(shí)驗(yàn)用菌材的樹種名稱、科目及其材質(zhì)特性

1.3方法

1.3.1蜜環(huán)菌三級(jí)種的制備 取直徑在1.5cm左右的新鮮青岡木枝條，截成約2～3cm長(zhǎng)的木段，定量分裝于300mL培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加水至瓶口，121℃高壓滅菌2h后接入蜜環(huán)菌半固體二級(jí)菌種，25℃恒溫避光培養(yǎng)2個(gè)月[9]。

1.3.2菌棒的制備8種樹材分別選取直徑7cm左右的樹枝，截成約15cm長(zhǎng)的木棒，放入水中浸泡10h左右，再放入挖好的穴中，每穴種1m2左右，每種樹材種3穴。把培養(yǎng)好的蜜環(huán)菌三級(jí)種倒散，取適量置于兩根木棒相接的斷面處，用土填實(shí)空隙，再覆蓋上8～10cm厚的土層，蓋上薄膜。從培育開始，每隔15d觀察1次蜜環(huán)菌的接菌情況，直到菌材上接上蜜環(huán)菌；2014年4月初埋入穴中，培育3個(gè)月后挖出，統(tǒng)計(jì)菌材的接菌速度、接菌率、菌索生長(zhǎng)速度、返青率和掉皮率。

2 結(jié)果與分析

2.1蜜環(huán)菌在不同菌材中的接菌速度、接菌率和菌索生長(zhǎng)速度

研究發(fā)現(xiàn)，榿木易被蜜環(huán)菌浸染，接種后蜜環(huán)菌萌發(fā)生長(zhǎng)快，5d后菌索即能接到菌棒上；歐洲山毛櫸菌棒接上蜜環(huán)菌菌索的時(shí)間為7.5d，酸角、西南樺、金葉子和厚皮香接菌速度都在10d以內(nèi)；白杜鵑和南燭接菌速度最慢，為15～20d(見表2)。

厚皮香中蜜環(huán)菌侵入率最高，蜜環(huán)菌成功侵入并生長(zhǎng)的菌棒數(shù)達(dá)到總數(shù)的89.79%；蜜環(huán)菌成功侵入歐洲山毛櫸菌棒數(shù)達(dá)到88.77%，榿木、西南樺、酸角的接菌率都在80%以上；南燭中蜜環(huán)菌侵入情況較差，長(zhǎng)有蜜環(huán)菌的木材比例為63.88%(見表2)。

表2 蜜環(huán)菌在8種樹種菌棒中的生長(zhǎng)情況

菌棒培育3個(gè)月后挖出，觀察蜜環(huán)菌菌索的密集程度，測(cè)量蜜環(huán)菌菌索的長(zhǎng)度，計(jì)算出蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)速度。蜜環(huán)菌菌索在酸角樹中生長(zhǎng)最快，平均每月生長(zhǎng)25 mm，其次是在金葉子和歐洲山毛櫸中，菌索平均每月生長(zhǎng)20 mm，在南燭中菌索生長(zhǎng)速度最慢，菌索平均每月生長(zhǎng)5 mm。菌棒上菌索生長(zhǎng)的最為密集的是歐洲山毛櫸(圖1-A)和酸角樹(圖1-B)，南燭(圖1-C)和白杜娟(圖1-D)菌棒上的菌索相對(duì)稀疏。

注：A.歐洲山毛櫸菌棒；B.酸角樹菌棒；C.南燭菌棒；D.白杜娟菌棒；E.榿木樹菌；棒F.厚皮香菌棒；G.金葉子菌棒；H.西南樺菌棒圖1 3個(gè)月后四種樹材菌棒的生長(zhǎng)情況

2.2不同菌材的返青率及掉皮率

菌材返青是指菌材埋到地下以后重新發(fā)芽回青，掉皮是指菌棒的樹皮嚴(yán)重脫落，菌材返青和掉皮都會(huì)影響蜜環(huán)菌的侵入和生長(zhǎng)，也是反映木材是否適合做菌材的重要指標(biāo)。研究結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)用8樹種中南燭的菌材返青率最高，達(dá)20.05%，其次為金葉子，返青率為9.23%，而西南樺菌材中沒有發(fā)現(xiàn)返青樹段。8種菌材的掉皮情況都不嚴(yán)重，厚皮香和西南樺沒有發(fā)現(xiàn)掉皮現(xiàn)象(見表3)。

表3 不同樹材返青率和掉皮率情況表 (%)

3 結(jié)論與討論

歐洲山毛櫸和酸角樹樹材接菌速度快，接菌率高，菌索生長(zhǎng)速度也較快，其次，金葉子、厚皮香、榿木、西南樺的綜合情況也較好；接菌速度上，杜鵑花科的南燭和白杜娟較慢，接近20d，其他6種樹材均在10d以內(nèi)，生長(zhǎng)速度上，二者也明顯慢于其他樹種，然而在接菌率上，白杜娟可以達(dá)到70%以上，說明蜜環(huán)菌通過一段時(shí)間的適應(yīng)，仍然可以在白杜娟菌材上生長(zhǎng)。8種樹材的掉皮率均較低，即韌皮部和木質(zhì)部連接緊密，有利于蜜環(huán)菌的培養(yǎng)；返青率方面，南燭的返青率較高，可能是因?yàn)槟蠣T中具有某種特殊物質(zhì)，使該樹種再生能力強(qiáng)，導(dǎo)致返青。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，蜜環(huán)菌在其傳統(tǒng)培養(yǎng)樹材榿木、西南樺和歐洲山毛櫸[10]中生長(zhǎng)正常，金葉子、厚皮香和酸角樹樹材質(zhì)地較堅(jiān)硬，耐腐性高，都適合作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的菌材；蜜環(huán)菌在白杜娟和南燭樹材中的綜合情況不理想，不適宜用來培養(yǎng)蜜環(huán)菌，一方面可能與其木質(zhì)堅(jiān)硬有關(guān)，另一方面也可能與該屬植物所含的特殊物質(zhì)有關(guān)，還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

八種樹材中豆科的酸角、山茶科的厚皮香和杜鵑花科的金葉子屬于以前沒有用于生產(chǎn)過蜜環(huán)菌栽培種的的新樹種，也是騰沖縣資源豐富、具有特色的樹種，后期可加以合理利用。

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StudyontheArmillariamelleaCulturedWoodofEightKindsofTreesinTengchongcountryofYunnanProvince

WANGQiuying1*，LILitun2

(1.InstituteofMedicinalPlants，ChineseAcademyofMedicalSciences，Beijing100193，China；2.State-ownedForestManagmentStation，F(xiàn)orestryBureauofTengchongCounty，BaoshanCity，YunnanProvince，baoshan679100，China)

The aim is searching for more tree species to cultureArmillariamellea.The inoculated time，inoculation rate，growth rate ofArmillariamelleaand the properties of tree were observed through the culture ofArmillariamelleain the eight tree species.The result showed that the inoculated time was shortest，inoculation rate was high and the growth rate ofArmillariamelleawas faster inFagussylvaticaandTamarindusindicaLinn；the comprehensive case was good inCraibiodendronyunnanensisW.W.Smith，Ternstroemiagymnanthera(Wight et Arn.)，AlnuscremastogyneBurk andBetulaalnoidesBuch.-Ham.ex D.Don.The conclusion was that the six tree species are suitable meterials for culture ofArmillariamelleaexceptExochordaracemosaandVacciniumbracteatumThunb.

Cultured wood；Armillariamellea；cultivation；Tengchong

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.7.019

2015-09-02)

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王秋穎，研究員，研究方向：藥用真菌引種、馴化及栽培；E-mail：qywang@implad.ac.cn