電化學(xué)發(fā)光免疫法和放射免疫法檢測血清甲狀腺激素的對比分析

盛曉光，常紅葉，齊　力，譚　巖，方艷秋，王起來*

(1.吉林省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)診治實驗中心，吉林 長春130021；2.吉林省臨床檢驗中心，吉林 長春130021)

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電化學(xué)發(fā)光免疫法和放射免疫法檢測血清甲狀腺激素的對比分析

盛曉光1，常紅葉2，齊力2，譚巖1，方艷秋1，王起來1*

(1.吉林省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)診治實驗中心，吉林 長春130021；2.吉林省臨床檢驗中心，吉林 長春130021)

甲狀腺功能紊亂是內(nèi)分泌科常見疾病，甲狀腺激素水平檢測是臨床常用的檢測項目，RIA作為傳統(tǒng)的檢測手段[1]，將抗體用放射性碘元素標記來檢測血清中甲狀腺素。但因其需手工加樣、操作過程繁瑣，且檢測過程中可能出現(xiàn)放射性污染、放射性元素的衰減影響檢測結(jié)果，精準度相對降低[2]，在臨床檢驗中的應(yīng)用受到一定限制。新一代標記免疫檢測技術(shù)ECLIA，由電化學(xué)發(fā)光(ECL)和免疫測定法結(jié)合而成[3]，具有檢測迅速，靈敏度高等特點，近年來被廣為使用。促甲狀腺激素(TSH)由垂體前葉分泌，是一種糖蛋白類激素，促進甲狀腺代謝，診斷甲狀腺疾病最靈敏的標志物就是檢測血清TSH水平，同時也是甲狀腺功能檢測的首選指標[4]。TSH分泌受血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)負反饋調(diào)節(jié)[5]。本文分別用放射免疫法及電化學(xué)發(fā)光免疫法對TSH、FT3、FT4進行檢測，比較其結(jié)果。

1　材料與方法

1.1標本來源選取我院2012年10月至2013年11月門診及住院患者共130例，其中正常對照組及甲狀腺功能亢進組(甲亢組)各50例，甲狀腺功能減退組(甲減組)各30例。

1.2儀器與試劑電化學(xué)發(fā)光法采用瑞士羅氏Cobase411全自動分析儀及原廠家配備的檢測試劑；放射免疫法采用上海日環(huán)儀器廠的SH-682 放射免疫計數(shù)器,試劑盒來源于北京北方生物技術(shù)研究所。

1.3測定方法采空腹靜脈血2管，每管3ml，所有操作嚴格按照試劑及儀器操作使用說明書，檢測血清中TSH、FT3以及FT4水平，由經(jīng)驗豐富的檢驗員在2小時內(nèi)完成。

2　結(jié)果

無論是正常組、甲亢組還是甲減組，利用RIA及ECLIA檢測患者血清中甲狀腺激素水平，所得到的結(jié)果均相似，兩種方法所得到的結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果見表1-3。

表1　正常組檢測比較情況

表2　甲亢組檢測比較情況

表3　甲減組檢測比較情況

3　討論

RIA始于20世紀60年代，其原理是將抗原/抗體用放射性物質(zhì)標記，與待檢樣本結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物來進行測定。它分為競爭性放射免疫法和免疫放射分析法(IRMA)兩種，前者也被稱為傳統(tǒng)的放射免疫測定方法，是對樣品中的抗原含量的測定，其基本原理是利用放射性物質(zhì)標記的抗原，與待檢樣本中未標記抗原競爭結(jié)合特異性抗體。后者在前者的基礎(chǔ)上發(fā)展起來，是將足量抗體以放射性物質(zhì)標記，直接結(jié)合待檢抗原，采用固相免疫吸附載體分離結(jié)合與游離標記抗體的非競爭放射免疫分析法。因為RIA測定的靈敏性、特異性及測定的精確性較好，對抗原和半抗原均可檢測，儀器設(shè)備要求不高，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)測定，由于大部分檢測項目都有上述兩種放射免疫方法的試劑盒，故其仍是基層部門對超微量物質(zhì)檢測的主要技術(shù)。但其只能測定特定物質(zhì)、因放射性物質(zhì)有半衰期保存的時間較短、會造成環(huán)境污染和機體損傷等[6]，且不能形成自動化，不能快速地檢測、出報告[7]。

ECLIA是目前標記免疫檢測最前沿的技術(shù)手段，由電化學(xué)發(fā)光和免疫檢測兩個部分組成。標記物的發(fā)光原理主要是由電化學(xué)產(chǎn)生的,在電極表面特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，抗原和抗體的結(jié)合有很高的特異性，所以精確度準、檢測結(jié)果重復(fù)性高，臨床檢驗結(jié)果穩(wěn)定，ECLIA能有效的消除樣本底產(chǎn)生的干擾以及對位量的散射，從而能真正的提高這一方法靈敏度。另一個優(yōu)點ECLIA可以完全自動化，不僅操作簡便而且能有效的減少工作中存在系統(tǒng)誤差和隨機誤差。并且ECLIA試劑保存期長，測定結(jié)果快而準，且安全無毒，不會出現(xiàn)同位素輻射污染的問題[8]。隨著技術(shù)的發(fā)展，ECLIA被廣泛應(yīng)用于多種激素的檢測，病毒檢測，腫瘤標記物檢測，藥物濃度的鑒定等，但也存在著需要引進特殊設(shè)備，試劑價格成本高等缺點。

本試驗中兩種方法的檢測結(jié)果基本相同，都具有較高的準確性和精密度，不同單位可以根據(jù)自身情況結(jié)合兩種檢測方法的優(yōu)缺點，酌情選擇不同的方法進行檢測，作為體外標記免疫分析的這兩種方法在今后的檢驗領(lǐng)域發(fā)展中仍然會互補而存在。

[1]范旭.血標本采集方法對放射免疫分析甲狀腺激素的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2010,7(30):68.

[2]趙云霞,李培鋼,王秀珠,等.放射免疫法和發(fā)光法測定甲狀腺微粒體蛋白抗體、甲狀腺球蛋白抗體及其相關(guān)性研究[J].中國實用內(nèi)科雜志,2010,26(6):150.

[3]方光輝.放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法檢測血清HCG效果分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2010,48(27):74.

[4]王自正.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)標記免疫學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2000.145-146.

[5]李少林,王榮福.核醫(yī)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008.63-69.

[6]JohnPickup.ODLinsulinpumptherapyandcontinuousglucosemonitoring[J].OxfordMedicine,2011,13(78):1783.

[7]馮琴,楊駿,朱菩軍.電化學(xué)發(fā)光分析與酶聯(lián)免疫分析用于測定血清甲狀腺激素的評價[J].地方病通報,2007,22(6):32.

[8]馬紅霞,周運恒,楊藺,等.ELISA法和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測血清HBsAg結(jié)果比較分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗,2010,25(6):473.

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吉林省科技發(fā)展計劃項目(20160622008JC)

2016-03-12)