宮頸高危型HPV分型檢測在宮頸癌篩查中的臨床意義

果海娜,何江耀,李　良,黃錦葉

(中山大學附屬東莞東華醫院 病理科，廣東 東莞523000)

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宮頸高危型HPV分型檢測在宮頸癌篩查中的臨床意義

果海娜,何江耀,李良,黃錦葉

(中山大學附屬東莞東華醫院 病理科，廣東 東莞523000)

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，發病率在女性惡性腫瘤中居第二位，僅次于乳腺癌，據流行病學資料研究顯示，在發展中國家，女性宮頸癌的發病率較高，占據宮頸癌發病率的80%，宮頸癌的早發現、早診斷、早治療對降低宮頸癌發病率起到非常關鍵的作用。目前幾乎所有的流行病學和實驗室研究數據均顯示，HPV感染是子宮頸癌的主要致病因素，尤其是HR-HPV持續感染與子宮頸癌高度相關，本研究通過宮頸脫落細胞HR-HPV分型檢測，探討其在宮頸癌預防與篩查中的臨床意義。

1　資料和方法

1.1臨床資料

采集2013年8月至2014年12月中山大學附屬東莞東華醫院婦科門診患有宮頸糜爛或健康體檢中心的體檢者宮頸脫落細胞共4169例進行了HR-HPV分型檢測，其中318例患者作了宮頸醋酸試驗及陰道鏡下宮頸活檢或由于其他疾病做了宮頸切除手術。患者年齡在18歲-76歲，平均年齡35.1±4.6歲。

1.2方法

1.2.1HPV分型檢測采用上海透景生命科技有限公司提供HPV分型流式點陣檢測試劑盒(液態芯片技術)，其中高危型19種(HPV16、18、26、31、33、35、39、 45、51、52、53、55、 56、58、59、66、68、82、83)，具體操作步驟按說明書進行。

1.2.2組織學觀察318例宮頸標本經10%中性福爾馬林固定，常規石蠟切片，HE染色、光鏡觀察。參照Richard[3-1]宮頸上皮內瘤(cervicalintraepithelialneoplasia,CIN)分級標準，病理診斷為診斷子宮頸病變的“金標準”。

病理診斷標準：將病理診斷≥CINⅡ或≥子宮頸腺上皮內瘤變(CGIN)Ⅱ者視為病理檢查陽性，病理診斷≤CINⅠ或≤CGINⅠ者視為病理檢查陰性。經有經驗的2位病理醫生閱片后診斷。

1.3統計學處理

以宮頸組織病理做為金標準，運用2×2行列資料檢驗方法，評價應用流式熒光雜交技術檢測HR-HPV宮頸癌早期診斷的敏感性與特異性。所有數據均使用SAS9.0軟件進行統計學分析，根據資料采用χ2檢驗和Fisher精確概率法進行分析，并設定顯著性水平為P<0.05。

2　結果

2.1HR-HPV感染年齡分布

本組病例受檢者平均年齡35.1±4.6歲，HR-HPV感染者平均年齡37.9歲，中位年齡37歲，各年齡組HR-HPV感染情況見表1,各年齡組婦女HR-HPV感染率差異有統計學意義(χ2=22.3998，P=0.0002)。因≤20歲組例數偏少,比較感染率意義不大。各年齡段不同型別HR-HPV感染導致宮頸病變的情況見表2。

表1　HR-HPV感染的年齡分布情況

注：與21-30歲組比較，①P=0.0003；②P=0.0106；③P=0.851；與31-40歲組比較，④P=0.357；⑤P=0.014；與41-50歲組比較，⑥P=0.838

2.2HR-HPV感染情況

在接受HPV分型檢測的4169例標本中有857 例HR-HPV陽性(包括雙重和多重感染病例)，總陽性率20.56%(857/4169)，共檢測出19種HR-HPV,各亞型分布及陽性率見表3，HR-HPV感染陽性率前5位的型別是52(5.09%)、16(3.09%)、53(2.21%)、58(2.16%)、39(1.87%)，這5種基因型共占本研究組HR-HPV感染人群的56.4%；HPV18型感染居第9位，陽性率占1.27%。在檢測基因型別感染的結果中，存在單純感染、雙重感染和多重感染，各種感染模式見表4，以單純感染和雙重感染所占比例最高，占HR-HPV陽性人群的93.9%。

表2　各年齡組不同型別HR-HPV感染所致宮頸病變情況

*有導致CINⅡ級以上病變的HR-HPV亞型

表3　HR-HPV陽性標本標本型別分布及各型別陽性率

*包括單純感染、雙重感染和多重感染

表4　HR-HPV陽性標本感染模式及其感染率

2.3HR-HPV感染所致宮頸病變情況

318例宮頸組織病理學檢查患者HR-HPV陽性265例，陰性53例；與宮頸組織病理學檢查結果對照見表5，由表5可見HR-HPV檢測對診斷CINII級以上宮頸病變的靈敏度為98.3%(58/59),特異度為20.1%(52/259),陽性預告值為21.9%(58/265),陰性預告值為98.1%(52/53)。由表6可見265例HR-HPV陽性的病例中58例CINII級以上宮頸病變,包括1例宮頸浸潤性腺癌,HPV感染前三位亞型是16、52和58型，分別為31、10、4例，占77.6%(45/58)。HPV16亞型與52型導致CINII級以上宮頸病變相比較，差異有統計學意義(χ2=12.209，P=0.0005；HPV16型和58型導致CINII級以上宮頸病變相比較，差異無統計學意義(χ2=3.061，P=0.080)；其中16型導致53.4%(31/58)CINII級以上的病變。還應該引起注意的是，所有宮頸癌的病例均為單一型別感染，HPV45型和26型感染率不高，但其單獨感染可以導致宮頸鱗狀細胞癌，而且雖然HPV18型感染率亦不高，但1例腺癌的病人此型陽性。

表5　HR-HPV感染與宮頸病理結果對照

表6　宮頸病理結果與HR-HPV各型別感染對照

3　討論

人類乳頭瘤病毒(HPV)近20年已鑒定出120余種基因型，HPV是乳多空病毒科多瘤病毒亞科的一個雙鏈環狀DNA病毒，其中約40種HPV可感染生殖系統上皮細胞，被命名為“生殖型”HPV。根據致病力的大小將HPV分為高危型和低危型兩大類，近年的研究發現，幾乎所有宮頸癌與HR-HPV持續感染有關[2]。

HR-HPV感染主要發生在育齡婦女，本研究發現HR-HPV感染率與年齡相關，各年齡段感染率有顯著性差異，其中感染率最高的年齡段在21-30歲，與31-50歲組相比較，差異有統計學意義；但51.7%CINⅡ級以上病變發生在31-40歲，5%-10%的HPV感染在35歲后可轉變為持續感染狀態[3]應對該年齡階段的婦女重點采取宮頸癌防控措施。

近年來，大量多中心的研究[4-6]，均發現全球HPVl6為最主要的基因型，其次是18型，其他型別具有地域性差別，如HPV45在非洲相對較多，HPV33在歐洲較多，而HPV58和52在亞洲較多。國內不同地區HR-HPV感染率和型別也不盡相同[7-13]。本研究在4169例標本中檢出857 例HR-HPV陽性(包括雙重和多重感染病例)，總陽性率20.56%(857/4169)，共檢測出19種HR-HPV,HR-HPV感染陽性率前5位的型別是52(5.09%)、16(3.09%)、53(2.21%)、58(2.16%)、39(1.87%)，這5種基因型共占本研究組HR-HPV感染人群的56.4%；HPV18型感染居第9位，陽性率占1.27%，本研究為針對本地區HR-HPV感染研制疫苗提供依據。本組病例通過檢測HR-HPV基因型別感染，發現存在單純感染、雙重感染和多重感染，以單純感染和雙重感染所占比例最高，占HR-HPV陽性人群的93.9%，而發生浸潤性癌的病人均為單一型別感染，可能雙重或多重感染并不能增強致病力。

2012年，美國婦產科醫師協會(ACOG)和美國陰道鏡和子宮頸病變協會(ASCCP)指南明確指出，HPV16和18型感染者，即使細胞學檢查陰性，也應該行陰道鏡檢查[14]。本組通過研究不同型別感染導致宮頸癌前病變及宮頸癌的致病力，去除年齡因素的影響，發現 16型的感染導致宮頸癌前病變及宮頸癌與其他常見亞型感染相比有顯著差異，因此，雖然HPV16型在本組研究中感染率居第二位，但其致病力還是最強的。本組研究HPV18型感染率不高，但1例腺癌的病人此型陽性，提示當HPV18型陽性時要注意是否有腺癌發生。還應該引起注意的是，雖然HPV45型和26型感染率不高，但其單獨感染可以導致宮頸鱗狀細胞癌，這二種型別是否有強致病力，還需要增加樣本量進一步研究。

隨著對HPV亞型感染與子宮頸癌及其癌前病變關系的研究不斷深入，發現不同亞型HPV的致病能力不同，高危型HPV感染直接威脅女性的生命安全。2007年，國際癌癥中心即提出，可以將HPV分型檢測作為子宮頸癌初篩的手段之一[15]。本研究顯示，HR-HPV分型檢測對于宮頸癌前病變及宮頸癌的靈敏度(98.3%)和陰性預告值(98.1%)均很高，其特異度(20.1%)和陽性預告值(21.9%)均較低。分析其原因，從高危型HPV感染到發展為宮頸癌CINII級以上病變尚需要一段時間，本組HPV主要感染人群是21-30歲人群，而發生CINII級以上病變的人群主要在31-40歲的人群，能夠說明從感染到致病大約需要10年左右的時間，這與文獻報道相一致[16,17]；而且宮頸癌前病變和宮頸癌與同一型別持續感染有關，因此應用敏感性很高，并且可以分型檢測的方法檢測HR-HPV是否同型別持續感染，是宮頸癌早期篩查的重要手段，對宮頸癌及其癌前病變篩查具有非常重要的臨床意義。

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廣東省東莞市科技計劃項目(201110515046227)

1007-4287(2016)08-1340-04

果海娜(1970-),副主任醫師,主要研究方向:女性生殖系統腫瘤和乳腺腫瘤。

2015-06-16)