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茶多酚耐缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究

2016-09-11 03:09:55王天勇俞荃金策
浙江臨床醫(yī)學(xué) 2016年5期
關(guān)鍵詞:小鼠劑量

王天勇 俞荃 金策

茶多酚耐缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究

王天勇 俞荃 金策

目的 觀察茶多酚(TP)對(duì)缺氧耐受力作用的影響。方法 經(jīng)灌胃給予小鼠25mg/(kg·d)、50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)的茶多酚,進(jìn)行常壓耐缺氧、亞硝酸鈉中毒存活和急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)。結(jié)果 茶多酚在50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)劑量時(shí),具有延長(zhǎng)小鼠常壓缺氧存活時(shí)間。在100mg/(kg·d)劑量時(shí),具有延長(zhǎng)亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間;在50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)劑量時(shí),具有延長(zhǎng)小鼠急性腦缺血性缺氧喘氣時(shí)間。結(jié)論 茶多酚具有良好的耐缺氧作用。

茶多酚 缺氧耐受力 防治 心腦血管病

茶多酚(TP)是由綠茶提取的多酚類(lèi)化合物,現(xiàn)代藥理研究表明,具有調(diào)脂、抗脂質(zhì)過(guò)氧化等多種生物活性[1]。本實(shí)驗(yàn)觀察茶多酚對(duì)缺氧耐受力作用的影響。

1 材料與方法

1.1樣品 茶多酚(脫咖啡因純度85%)以蒸餾水配制成試驗(yàn)所需的低濃度25mg/(kg·d)、中濃度50mg/ (kg·d)、高濃度100mg/(kg·d)。

1.2動(dòng)物及分組:雌性昆明種小鼠120只,體重18~22g,清潔級(jí),由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。動(dòng)物合格證號(hào):2008001619934。按體重隨機(jī)分為對(duì)照組(蒸餾水)、茶多酚低、中、高三個(gè)劑量組,每組各30只。所有試驗(yàn)動(dòng)物均食用全價(jià)營(yíng)養(yǎng)配合飼料,自由攝食、攝水。

1.3方法 按衛(wèi)生部發(fā)布的《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》中《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法規(guī)范》,緩解體力疲勞作用檢驗(yàn)方法中的常壓耐缺氧試驗(yàn)、亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)、急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)的規(guī)定方法執(zhí)行。灌胃容量0.4ml/20g(體重),1次/d,連續(xù)30d。(1)常壓耐缺氧試驗(yàn):各組動(dòng)物連續(xù)灌胃30d,于末次灌胃后1h,將各組小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250ml磨口廣口瓶?jī)?nèi)(每瓶1只),用凡士林封瓶口,蓋嚴(yán),使之不漏氣,立即計(jì)時(shí),以呼吸停止為指標(biāo),觀察小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間。(2) 亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn):各組動(dòng)物連續(xù)灌胃30d,于末次灌胃后1h,各組小鼠均腹腔注射亞硝酸鈉溶液200mg/kg (0.1ml/10g),立即計(jì)時(shí),記錄動(dòng)物存活時(shí)間。(3) 急性腦缺血性缺氧試驗(yàn):各組動(dòng)物連續(xù)灌胃30d,于末次灌胃后1h,各組小鼠自頸部逐只斷頭,立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時(shí)間。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,各劑量組與對(duì)照組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以Dunnett T檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1小鼠常壓耐缺氧試驗(yàn) 經(jīng)單因素方差分析,結(jié)果顯示各組小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.59,P<0.05)。經(jīng)Dunnett T檢驗(yàn),茶多酚中、高劑量組小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間均值與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明茶多酚在50mg/(kg·d) 、100mg/(kg·d) 劑量時(shí),具有延長(zhǎng)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的作用。見(jiàn)表1。

表1 各組小鼠常壓耐缺氧試驗(yàn)比較(±s)

表1 各組小鼠常壓耐缺氧試驗(yàn)比較(±s)

注:與對(duì)照組比較,*P<0.05

組別 動(dòng)物數(shù)(只) 存活時(shí)間(min)低劑量組 10 22.13±2.41中劑量組 10 23.25±2.96*高劑量組 10 23.79±2.58*對(duì)照組 10 20.06±3.03

2.2亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn) 經(jīng)單因素方差分析,結(jié)果顯示各組小鼠亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.68,P<0.05)。經(jīng)Dunnett T檢驗(yàn),茶多酚高劑量組小鼠亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間均值與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明茶多酚在100mg/(kg·d)劑量時(shí),具有延長(zhǎng)小鼠亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間的作用。見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)比較(±s)

表2 各組小鼠亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)比較(±s)

注:與對(duì)照組比較,*P<0.05

組別(mg/kg) 動(dòng)物數(shù)(只) 存活時(shí)間(min)低劑量組 10 10.05±2.19中劑量組 10 10.21±1.58高劑量組 10 11.40±2.02*對(duì)照組 10 8.53±1.95

2.3急性腦缺血性缺氧試驗(yàn) 經(jīng)單因素方差分析,結(jié)果顯示各組小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.61,P<0.05)。經(jīng)Dunnett T檢驗(yàn),茶多酚中、高劑量組小鼠急性腦缺血性缺氧存活時(shí)間均值與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明茶多酚在50mg/(kg·d) 、100mg/(kg·d) 劑量時(shí),具有延長(zhǎng)小鼠急性腦缺血性缺氧喘氣時(shí)間的作用。見(jiàn)表3。

表3 各組小鼠急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)比較(±s)

表3 各組小鼠急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)比較(±s)

注:與對(duì)照組比較,*P<0.05

組別(mg/kg) 動(dòng)物數(shù)(只) 存活時(shí)間(s)低劑量組 10 16.66±3.02中劑量組 10 19.09±3.19*高劑量組 10 19.51±2.48*對(duì)照組 10 14.94±2.74

3 討論

茶葉的飲用和藥用價(jià)值的有效成分主要是茶多酚類(lèi)物質(zhì)。茶多酚是一類(lèi)存在于茶樹(shù)中的多羥基酚類(lèi)化合物的總稱(chēng)。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)茶多酚進(jìn)行了較深入的研究。研究表明,茶多酚具有重要的生理活性,有抗病毒、抗癌、抑制腫瘤的作用,對(duì)癌癥有明顯的抗突變和阻斷作用。研究還表明,茶多酚有明顯的抑菌、防齲齒、改善腎功能、減肥、降脂、降壓作用,對(duì)心血管系統(tǒng)有良好保護(hù)作用;并有增強(qiáng)免疫力及延緩衰老的作用[2~6]。

本研究資料顯示,茶多酚具有延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常壓耐缺氧存活時(shí)間;延長(zhǎng)亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間;延長(zhǎng)腦缺血性缺氧喘氣時(shí)間??傊?,茶多酚具有良好的耐缺氧作用。

由此可見(jiàn),茶葉的主要有效成分—茶多酚,在防治缺氧引起的心腦血管疾病,預(yù)防缺氧性心力衰竭、心肌梗死、心臟性猝死,以及缺氧引起的呼吸性疾病、高原疾病等方面,具有一定的藥用價(jià)值,值得認(rèn)真研究和開(kāi)發(fā)應(yīng)用。

1 袁靜,余新欣,章復(fù)清,等.茶多酚調(diào)脂及抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的實(shí)驗(yàn)研究.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2000;23(3):37.

2 Chen A, Zhou M. Free Radicals Medical Science(自由基醫(yī)學(xué)). Beijing:People`s Military Surgeon Publishing House, 1999.

3 陳裕明.茶多酚對(duì)大鼠血脂及機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響.中國(guó)老年學(xué)雜志,1998,(4):18.

4 劉波靜.茶多酚對(duì)動(dòng)物血清血脂和載體蛋白水平的影響和抗氧化作用. 茶葉科學(xué),2000,20(1):67~70.

5. 夏宗新,楊宏,邢影.腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子在缺血腦保護(hù)中的應(yīng)用現(xiàn)狀.中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修雜志,2013,36(29):72,74.

6 沈強(qiáng).茶葉加工與品質(zhì)檢驗(yàn).北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,2015,206~208.

Objective To explore the effect on tolerance of hypoxia of tea plyphenols. Methods Various doses of tea plyphenols, ie. 25mg/(kg·d),50 mg/(kg·d), 100 mg/(kg·d), were delivered via gastric tube for 30 days, followed by the testing for the tolerance of hypoxia under difference conditions. The conditions included being under normal pressure, under natrium nitrosum poisoning, acute cerebral ischemia. Results At the doses of 25mg/ (kg·d), 50 mg/(kg·d), 100 mg/(kg·d), tea plyphenols prolonged the surviving duration of hypoxia under normal pressure. At the dose of 100 mg/(kg·d), it prolonged the surviving duration of hypoxia under natrium nitrosum poisoning, at the dose of 50 mg/(kg·d), 100 mg/(kg·d), tea plyphenols prolonged the time of breathing of hypoxia under acute cerebral ischemia . Conclusions Tea plyphenols improves the tolerance of hypoxia.

Tea plyphenols Tolerance of hypoxia Prevention and treatment Cardiac-cerebral vascular disease

·診治分析·

310008 杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院(王天勇)

310003 杭州市紅十字會(huì)醫(yī)院(俞荃)

310053 浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院(金策)

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