一種用于觀察小鼠后足趾類實(shí)驗(yàn)固定裝置的研制

石　佳，陳　靜，冉小庫，王曉彤，竇德強(qiáng)

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連　116600)

?

一種用于觀察小鼠后足趾類實(shí)驗(yàn)固定裝置的研制

石佳，陳靜，冉小庫，王曉彤，竇德強(qiáng)*

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連116600)

設(shè)計(jì)研制應(yīng)用于觀察小鼠后足趾類實(shí)驗(yàn)固定器，如發(fā)汗、止汗等實(shí)驗(yàn)研究，為其提供安全、方便、便于操作的實(shí)驗(yàn)工具。

小鼠；后足趾；固定器；制作；應(yīng)用

小鼠是一種醫(yī)學(xué)研究常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，亦是醫(yī)學(xué)生理學(xué)、病理學(xué)、病理生理學(xué)等學(xué)科實(shí)驗(yàn)的常用動(dòng)物。小鼠體型較小，但生性活潑，因此在抓取小鼠時(shí)要謹(jǐn)慎，既不能粗暴，以免其受傷，又要穩(wěn)和準(zhǔn)，否則容易被其咬傷。在實(shí)驗(yàn)研究中，我們常常運(yùn)用一些輔助工具來固定小鼠，以保證實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行同時(shí)能保護(hù)實(shí)驗(yàn)者自身安全。固定器的制作及應(yīng)用有一些研究報(bào)道，但一般多用于斷尾取血、尾靜脈注射、尾靜脈取血、肌肉注射、輻射實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)研究[1-6]，而適用于觀察后足趾類實(shí)驗(yàn)的固定器尚未見報(bào)道。本文根據(jù)以往制作大、小鼠固定裝置的優(yōu)缺點(diǎn)以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)要求，選用銅片、鋁塊、革布等材料，制成適用于后足趾類實(shí)驗(yàn)的特制小鼠固定器。

1　材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性昆明小鼠購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司 [SCXK(遼)2010-0001],體重(18～22)g。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[SYXK(遼)2013-0009]。并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道的關(guān)懷。

1.2制作材料和工具

銅片(長10.0 cm、寬9.5 cm和厚0.1 cm)；鋁塊(長3.0 cm、寬2.5 cm和高1.0 cm)；鋁片(長10.0 cm、寬1.0 cm和厚0.1 cm)；鉚釘；細(xì)鐵絲；革布；剪刀；夾子(均購于大連開發(fā)區(qū)新瑪特超市)。

2　方法

2.1制作要求

發(fā)汗、止汗實(shí)驗(yàn)是觀察小鼠汗液分泌的后足趾類實(shí)驗(yàn)，常用方法是著色法。因小鼠的小汗腺僅分布于足底，也就是在小鼠足跖部肉墊上有汗腺分布，其汗液分泌的多少，可利用碘與淀粉遇汗液產(chǎn)生紫色反應(yīng)的原理，觀察汗液分泌的變化。這需要觀察后足趾且需維持一段時(shí)間，因此對(duì)于固定器有一定要求。具體要求如下：其規(guī)格、構(gòu)形，應(yīng)依動(dòng)物大小和形態(tài)而定，尺寸可調(diào)；防止動(dòng)物轉(zhuǎn)身、逃逸，固定要嚴(yán)密；后足趾需暴露在外；固定器需四周透氣，避免固定時(shí)間過長導(dǎo)致小鼠大量出汗對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響；堅(jiān)固耐用，性能可靠。

2.2制作方法

步驟一：在長方形銅片上面，依據(jù)銅片大小打數(shù)排大小以0.3 cm為直徑的小圓孔。步驟二：取長8.5 cm、寬5.5 cm的革，用剪刀剪成如圖1所示，并剪兩孔。步驟三：用鉚釘將剪好的革布固定在銅片邊沿1.5 cm左右。步驟四：按設(shè)計(jì)圖2，在打好孔的長方形銅片中心處用鉚釘將其固定在鋁塊上面，再將其彎曲成圓柱狀。在圓柱中間，用鋁片將銅圓柱固定大小，再按上調(diào)節(jié)裝置(如圖3)，以調(diào)節(jié)固定裝置的大小。

圖1　革布制作比例圖Fig.1　The scale map of cloth production

圖2　固定器制作模型比例圖Fig.2　The scale map of model of fixture device

圖3　固定器成品圖Fig.3　The map of finished product of fixture device

圖4　固定器使用示意圖Fig.4　Schematic diagram of using fixture device

2.3使用方法

制作好的固定器平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。抓住小鼠尾部，讓其頭處于固定器末端，利用小鼠喜鉆洞的特性，鉆入固定器內(nèi)(有個(gè)別不愿鉆入者可用鑷子將其引導(dǎo)入內(nèi))；待小鼠進(jìn)去之后，調(diào)節(jié)固定閥將小鼠固定圓筒內(nèi)，再用革布封住，然后輕輕將小鼠兩后肢，從兩小孔拽出革外，再依據(jù)小鼠的身長在前端放置一帶孔的瓶蓋，用細(xì)鐵絲固定，以防止小鼠從前端逃竄；最后用夾子將革布夾住從而固定小鼠，并可調(diào)節(jié)松緊度(如圖4所示)。對(duì)于尾靜脈注射、肌肉注射等使用方法同發(fā)汗、止汗實(shí)驗(yàn)使用方法。

3　討論

目前市面也一些固定裝置銷售，與田順亮、劉保新、劉輝、金永柱等[1,2,4,5]人設(shè)計(jì)制作了適用于大鼠或小鼠斷尾取血、尾靜脈注射、尾靜脈取血、肌肉注射等實(shí)驗(yàn)的固定裝置相比，用途和構(gòu)造基本相同；自制固定裝置多以塑料瓶設(shè)計(jì)制作，雖簡易、價(jià)廉，但易損壞，使用壽命短；市售固定裝置采用有機(jī)玻璃或不銹鋼材質(zhì)制作，雖不易損壞，但固定裝置四周不能透氣，對(duì)動(dòng)物傷害較大，不能較長時(shí)間固定動(dòng)物。同時(shí)筆者發(fā)現(xiàn)以往研究報(bào)道的固定裝置均不適用于發(fā)汗、止汗實(shí)驗(yàn)研究中小鼠的固定，雖然，王艷宏等[7]人通過自制小鼠固定裝置固定小鼠研究了麻黃的發(fā)汗作用，但尚未對(duì)小鼠固定裝置作相關(guān)報(bào)道。

筆者研發(fā)的用于觀察后足趾類實(shí)驗(yàn)的小鼠固定器克服了現(xiàn)有固定裝置的不足，同時(shí)也適用于尾靜脈注射、斷尾取血等實(shí)驗(yàn)操作，具有以下突出的優(yōu)點(diǎn)：(1)材質(zhì)為銅片，不易損壞；(2)固定器四周透氣，不會(huì)因?yàn)楣潭〞r(shí)間太長易導(dǎo)致其出汗過多影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；(3)固定時(shí)不易對(duì)實(shí)驗(yàn)者或動(dòng)物造成傷害；(4)使用方便；(5)固定裝置結(jié)構(gòu)簡單，利于生產(chǎn)、易于推廣，且所有材料均可清洗消毒處理，方便重復(fù)使用。本實(shí)驗(yàn)室首次設(shè)計(jì)制作適用于觀察后足趾類發(fā)汗、止汗實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)操作的固定器，為實(shí)驗(yàn)者提供簡單、安全、攜帶實(shí)驗(yàn)工具。

[1]田順亮, 錢學(xué)華. 大鼠斷尾取血固定裝置的設(shè)計(jì)及取血的方法[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2006, 16(7): 419-421.

[2]劉保新, 陳廖斌, 汪暉. 介紹一種簡易的大鼠固定裝置[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2008, 18(3): 75-77.

[3]孟榮. 小白鼠固定器的制作及其應(yīng)用[J]. 衡陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 1985, 1(1): 51-54.

[4]劉輝, 康白. 小鼠固定器的制作與應(yīng)用[J]. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2010, 9(3): 227-228.

[5]金永柱, 蔣作君. 簡易小鼠固定器的制作[J]. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2000, 1(1):87-87.

[6]施文, 孫永強(qiáng). 小鼠尾靜脈注射和采血簡易固定裝置的制作和使用方法[J]. 免疫學(xué)雜志, 2011, 27(9): 807-808

[7]王艷宏, 王秋紅, 夏永剛, 等. 麻黃化學(xué)拆分組分的性味藥理學(xué)評(píng)價(jià)[J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2011, 18(6): 489-491.

Development of fixture device in rear paws experiments for holding mice

SHI Jia, CHEN Jing, RAN Xiao-ku, WANG Xiao-tong, DOU De-qiang*

(College of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China)

To design and make a simple fixture device for holding mice in rear paws experiments as a safe and convenient experimental tool for sweating and hidroschesis experiments.

Mice; Rear paws; Fixture device; Production; Application.

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(2013CB531803);2013遼寧省高等學(xué)校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)課題(LT2013020);遼寧省教育廳一般項(xiàng)目(L2013364);遼寧中醫(yī)藥大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃資助(201510162000057)。

石佳(1994-)，女，本科，專業(yè)：中藥學(xué)。E-mail：1358227419@qq.com。

竇德強(qiáng)(1967-)，教授，研究方向：中藥活性成分及新藥研發(fā)。E-mail：deqiangdou@126.com。

技術(shù)方法

R-332

A

1671-7856(2016)07-0064-03

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.07.011

2015-12-14