華卟啉鈉的光漂白性質研究

劉漢清，姜智煥，吳文濤，魏金峰，，靳洪濤，，，王愛平，，

華卟啉鈉的光漂白性質研究

劉漢清1，姜智煥2，吳文濤3，魏金峰1，2，靳洪濤1，2，*，王愛平1，2，*

（1. 中 國醫學科學院北京協和醫學院藥物研究所，北京100050；2. 北 京協和建昊醫藥技術開發有限責任公司，北京100176；3. 奧 溪利亞醫藥科技有限公司，天津300384）

目的： 觀察華卟啉鈉(DVDMS)在不同溶液中及動物皮膚中的光漂白性質。方法：采用微量分光光度計，測量不同濃度DVDMS(10、20、40 μg/mL)在生理鹽水(NS)、RPMI-1640培養基(RPMI-1640)、含10%胎牛血清的RPMI-1640培養基(RPMI-FBS)和HaCaT細胞懸液中的吸收峰；設置DVDMS濃度1、2.5、5、10、20、40 μg/mL，采用酶標儀分別檢測在激光照射3、6、10、20、40、50、60、120、180 min后DVDMS在上述4種溶液中的光漂白；正常和銀屑病裸鼠均尾靜脈注射DVDMS 2 mg/kg，采用小動物活體成像儀觀察DVDMS在皮膚組織中的分布及激光照射后在銀屑病模型動物皮膚組織中的漂白現象。結果：DVDMS 10、20、40 μg/mL在本實驗設置的4種溶液中特征吸收峰明顯；在前期藥效學研究的條件下(激光照射3 min)，DVDMS在4種溶液中發生了光漂白；在180 min內，DVDMS的光漂白呈現先快后慢的二相過程；DVDMS在正常和銀屑病模型動物組織中分布均勻，在9.6 J/cm2激光照射后，DVDMS在銀屑病模型動物皮膚組織中發生了明顯光漂白。結論：DVDMS體外光漂白受光劑量、初始濃度、溶劑種類的影響，符合二級動力學模型，在銀屑病模型動物皮膚組織中被激光照射后可發生光漂白。

華卟啉鈉；激光；光漂白；銀屑病

【ABSTRACT】OBJECTIVE: To observe the photobleaching characters of sinoporphyrin sodium (DVDMS) in different solutions and skins of animal. METHODS：Absorption peaks of DVDMS (10，20，40 μg/mL) in normal saline (NS)，RPMI-1640 medium (RPMI-1640)，RPMI-1640 medium containing 10% fetal calf serum (RPMI-FBS) and suspension of HaCaT cells were measured using micro-spectrophotometer. Using DVDMS solutions with concentrations of 1，2.5，5，10，20 and 40 μg/mL in the 4 solvents above，photobleaching of DVDMS after laser radiation for 3，6，10，20，40，50，60，120，180 min was observed using microplate reader. In vivo image acquisition system was used to study the distribution of DVDMS in animal skins，and the bleaching after irradiation in psoriasis-like animal skins were also observed. RESULTS：DVDMS with concentrations 10，20 and 40 μg/mL showed obvious characteristic absorption peaks in the 4 solutions. Photobleaching occurred in the 4 solutions under the irradiation conditions used in previous pharmacodynamics studies (laser radiation was 3 minutes). Two-phase processes photobleaching (fast first phase and second slow phase) of DVDMS were observed in 180 min. The distributions of DVDMS in skins of normal and psoriasis-like animal were uniform，obvious photobleaching occurred in skins of psoriasis-like animal after laser irradiation with dose of 9.6 J/cm2. CONCLUSION：In vitro photobleaching of DVDMS was influenced by light dose，initial concentrations and solvents. Secondary-dynamic model was suitable to describe the photobleaching progress. Photobleaching occurred in skins of psoriasis-like animal after laser irradiation.

【KEY WORDS】sinoporphyrin sodium；laser；photobleaching；psoriasis

光動力療法(photodynamic therapy，PDT)是20世紀初興起的一種新型治療方法，對于腫瘤和非腫瘤性皮膚病具有良好的治療效果[1-2]。光敏劑、激光和氧是PDT必備的3個要素。PDT的基本過程是：處于基態的光敏劑分子被特定波長的光照射后，吸收光能并躍遷為激發態，然后通過體系間跨越轉變為三線態。三線態光敏劑分子可與生物分子直接發生氧化還原反應產生活性氧、超氧陰離子等，破壞細胞結構、抑制細胞核內DNA和RNA等從而發揮作用(Ⅰ型反應)；也可與氧分子發生氧化還原反應形成單線態氧1O2，進而與生物分子發生反應(Ⅱ型反應)。Ⅰ型反應和Ⅱ型反應競爭發生，其中Ⅱ型反應被普遍認為是PDT的主要機制[3-4]。

光漂白是在光物理或光化學過程中光造成的發色團吸收強度或發射強度減少的現象。在PDT中，光漂白是指光敏劑被損耗的現象[3]。光漂白在PDT過程中伴隨產生而產生，因而是不可避免的。大量研究表明，PDT治療效果與光漂白的量和漂白速度有關[5-6]。在PDT治療中，即便給予相同劑量的光敏劑、相同代謝時間及激光照射劑量，不同病人間的治療效果仍可能有較大差異[7]。這是因為除以上因素外，PDT療效還取決于病變組織、氧分壓、光敏劑的光漂白和產率等因素。因此，精確量化給藥量和激光照射條件，并根據患者的個體差異進行劑量的實時調整和優化，已成為亟待解決的難題。基于此，近年來提出了PDT劑量這一概念，定義為PDT治療過程中的總產量。由于光漂白伴隨的產生而發生，因此可以用光漂白量來估算PDT過程中光敏劑產生的量及PDT劑量[8]。

因此研究光敏劑的光漂白性質，對其治療前景預測，PDT劑量設計等具有重要意義。華卟啉鈉(sinoporphyrin sodium，DVDMS)是中國醫學科學院藥物研究所方起程教授創制的一種新型卟啉類光敏劑，具有結構明確、作用性強、毒性低等優點，可被630 nm激光特異性激發。本實驗室系統評價了DVDMS的抗腫瘤藥效學和毒理學作用，并確認了其抗銀屑病療效[9]。DVDMS的抗腫瘤藥效學研究現已進入臨床階段，但其光漂白性質尚未測定，亦未見相關文獻報道。本課題旨在觀察DVDMS在不同溶液及動物皮膚組織中的光漂白性質，為后續抗銀屑病藥效學研究提供指導并為臨床抗腫瘤藥效學PDT劑量設計提供參考。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器PDT-630激光腫瘤治療儀，購自桂林市興達光電醫療器械有限公司；Spectra Max Gemini XS熒光酶標儀，購自美國MD公司；Q5000微量分光光度計，購自美國Quawell公司；Caliper小動物活體成像儀，購自美國Caliper Life Sciences公司。

1.1.2試劑DVDMS由青龍高科技股份有限公司提供，由中國醫學科學院新藥安全評價研究中心供試品管理部門保管，供試品編號1108，用前領取。咪喹莫特乳膏(imiquimod cream，IMQ)購自湖北科益藥業股份有限公司。RPMI-1640培養基，購自HyClone公司；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)，購自浙江天杭生物科技有限公司；氯化鈉注射液(0.9 % NaCl)，購自石家莊四藥有限公司。DVDMS溶液配制：取DVDMS凍干粉1瓶(10 mg)，加入生理鹽水 5 mL，配制為濃度為2 mg/mL的儲備液，測量時稀釋至所需濃度。

1.1.3動物Crl:NU-Foxn1nu免疫缺陷裸鼠，SPF級，雌雄各半，體質量18～22 g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，生產許可證號SCXK(京)2006-0009，動物合格證號11400700079106。飼養于恒溫恒濕的屏障環境，自由飲食、飲水。SPF級鼠料，制造單位為中國人民解放軍軍事醫學科學院實驗動物中心。飲水為自來水過濾、滅菌。

1.1.4細胞HaCaT細胞購自中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心。以含10% FBS的RPMI-1640培養基常規培養。取對數生長期細胞，制備細胞懸液，濃度為1×106/mL。

1.2方法

1.2.1吸收光譜測定前期體外抗腫瘤藥效學研究中DVDMS體外給藥濃度為0.001～10 μg/mL，體內藥效學研究所用濃度為25、50、100 μg/mL。溶劑類型是影響光敏劑光漂白性質的重要因素[10]。在體內藥效學研究中，配制光敏劑注射液所用溶液為生理鹽水(normal saline，NS)而體外藥效學所用溶劑為RPMI-1640培養基溶液。因此，設置NS，RPMI-1640培養基溶液(下稱RPMI-1640)，含10% FBS的RPMI-1640培養基溶液(下稱RPMI-FBS)及HaCaT細胞懸液(下稱細胞懸液)4種溶劑。以這4種溶劑配制DVDMS溶液，設置其終濃度分別為10、20、40 μg/mL，采用微量分光光度計測定其吸收光譜及最大吸收峰，上樣量2.5 μL。

1.2.2標準曲線繪制配制DVDMS在上述4種溶劑中終濃度分別為0、0.1、0.25、0.5、1、2.5、5、10、20、40、80 μg/mL的溶液，加入到96孔板中，采用酶標儀以最大吸收峰為測定波長，測定在不同溶液中的吸光度并繪制吸光度-濃度曲線。

1.2.3DVDMS在不同溶液中光漂白性質測定前期體外抗腫瘤藥效學研究中激光照射條件為：輸出功率1.50 W，光斑直徑8 cm，照射時間3 min，功率密度0.03 W/cm2，能量密度5.4 J/cm2，均在氧不飽和條件下進行測定。根據以上測定結果，DVDMS在濃度0.001～0.5 μg/mL范圍內，激光照射前后吸光度變化較小，檢測靈敏度較低，而在濃度過高時，DVDMS分子可能發生聚集。因此設置光敏劑濃度為1～40 μg/mL。

激光照射劑量(能量密度)主要受輸出功率、光斑直徑和激光照射時間的影響，由于在藥效學研究中通常輸出功率和光斑直徑都是固定的，因此主要觀察激光照射時間對光漂白的影響。為觀察到發生光漂白的時間，固定輸出功率為1.50 W，光斑直徑為8 cm，設置激光照射時間分別為3、6、10、20、40、50、60、120、180 min，DVDMS濃度分別1、2.5、5、10、20、40 μg/mL。同時設置非激光照射對照組。將溶液加入96孔板中，測量吸光度并繪制吸光度-濃度曲線。此后，將96孔板置于激光腫瘤治療儀下進行激光照射，照射結束后再次測量吸光度。對照組除不進行激光照射外，其余操作與激光照射組相同。根據吸光度-濃度曲線計算激光照射前后光敏劑濃度，按以下公式計算光漂白量、光漂白率及單位時間光漂白率。

光漂白量=激光照射前濃度-激光照射后濃度

光漂白率=[D(λ)0-D(λ)t] /D(λ)0×100%

單位時間光漂白率=累積漂白率/累積漂白時間

其中為D(λ)0激光照射前所測量吸光度，D(λ)t為 激光照射后所測量吸光度，λ為測量波長，t為照射時間。為消除測量因素和自然漂白的影響，用激光照射組測量值-對照組測量值作為光漂白量或光漂白率的真實值。

1.2.4DVDMS在動物組織中的吸收和光漂白為比較DVDMS在正常動物和銀屑病模型動物組織中的分布，4只裸鼠隨機分為正常組和DVDMS銀屑病模型組，每組2只，雌雄各半。銀屑病模型組動物背部皮膚涂抹5% IMQ，按每只約100 mg，每日1次，連續6 d制成銀屑病模型，正常組動物不涂藥。造模結束后，各組動物均尾靜脈注射DVDMS 2 mg/kg，之后腹腔注射戊巴比妥鈉60 mg/kg麻醉，分別采集給藥后8、12、24 h背部及腹部的圖像并進行比較。給藥24 h后處死動物，解剖取心、肝、脾、肺、腎、皮膚等，采集圖像并觀察。

為觀察DVDMS在銀屑病模型動物皮膚組織內的光漂白，4只裸鼠隨機分為激光照射組和非照射組，每組2只，雌雄各半。按上述方法制成銀屑病模型。造模結束后，各動物尾靜脈注射DVDMS 2 mg/kg，給藥6 h后激光照射組進行激光照射(輸出功率0.20 W，光斑直徑4 cm，照射時間10 min，能量密度9.6 J/cm2)，對照組不進行激光照射。麻醉后采集給藥后8、12 h(激光照射后2、6 h)腹部和背部的圖像。

光場校正后進行拍攝，拍攝同一視野下的X光和熒光圖像。將采集的熒光圖像添加RGB偽彩，按同一標尺調節至最佳顯示效果后與X光圖像疊加后輸出。

1.2.5統計學方-法采用SPSS 17.0軟件進行數據處理，計量數據以x±s表示，激光照射組和非照射組間光漂白量及光漂白率的差異分析采用單因素方差分析，以α=0.05為檢驗水準。

2　結　果

2.1DVDMS吸收光譜

根據質量標準，DVDMS水溶液(濃度2～4 μg/mL)，應在(371.0±2)、437.0、518.0、580.0、632.0 nm處有吸收峰。吸收光譜測定顯示，DVDMS在NS、RPMI-1640、RPMI-FBS和細胞懸液4種溶液中的吸收峰類似，特征明顯，符合質量標準，見圖1。在相同濃度下，DVDMS在4種溶液中的吸光度值為RPMIFBS﹥RPMI-1640﹥NS﹥細胞懸液，最大吸收峰波長為細胞懸液﹥RPMI-FBS﹥RPMI-1640﹥NS，見 表1。

表1　DVDMS在不同溶液中的最大吸收峰

2.2DVDMS在不同溶液中的吸光度-濃度曲線

采用表 1中平均值作為測量波長，測定并繪制DVDMS在上述4種溶液中的吸光度-濃度曲線。如圖2所示，DVDMS在濃度為0～40 μg/mL范圍內在4種溶液中濃度與吸光度符合郎伯比爾定律，主要以單體形式存在。當濃度提高到80 μg/mL時，DVDMS在4種溶液中的吸光度-濃度曲線R2值隨之減小，特別是RPMIFBS的R2值明顯減小，見圖2。證明隨濃度升高DVDMS在溶液中的聚集作用增加，在RPMI-FBS中，當濃度高于80 μg/mL時聚集明顯。因此，在后續光漂白研究中采用40 μg/mL以下濃度。

2.3DVDMS在藥效學研究條件下的光漂白

DVDMS在前期抗腫瘤藥效學研究中所用光劑量(激光波長630 nm，輸出功率1.50 W，光斑直徑8 cm，照射時間3 min，功率密度0.03 W/cm2，能量密度5.4 J/cm2)下，在濃度為1～40 μg/mL范圍內，在上述4種溶液中均發生了一定程度的光漂白。在RPMI-FBS中DVDMS光漂白率隨濃度升高而降低，而在NS、RPMI-1640和細胞懸液中光漂白率隨濃度升高呈現先升高后降低的現象，見圖 3和圖4。

圖1　DVDMS在不同溶液中的吸收峰

圖2　DVDMS在不同溶液中的吸光度-濃度曲線

2.4DVDMS在不同溶液中的光漂白動力學

DVMDS在濃度1～40 μg/mL范圍內，照射時間10～180 min內(激光波長630 nm，輸出功率1.50 W，光斑直徑8 cm，功率密度0.03 W/cm2)在NS、RPMI-1640、RPMI-FBS內均發生了光漂白，見圖 5和圖6；在細胞懸液中，雖然DVDMS激光照射組吸光度隨照射時間延長發生明顯降低，但對照組吸光度亦隨照射時間延長發生明顯降低，因此未觀察到明顯的光漂白作用，見圖7。說明DVDMS明顯被HaCaT細胞吸收，且吸收速度較快。DVDMS在4種溶液中的光漂白速度為RPMI-FBS＞NS＞RPMI-1640＞細胞懸液，見表2。

圖3　DVDMS在不同溶液中光漂白量

圖4　DVDMS在不同溶液中光漂白率比較

隨著累積照射時間的延長，DVDMS每分鐘漂白率逐漸降低，說明其漂白呈現先快后慢的二相過程，見圖8。以時間為自變量對DVDMS在NS、RPMI-1640和RPMI-FBS中的光漂白率(%)進行線性回歸分析(細胞懸液由于未檢測到明顯漂白，不進行擬合)，經Pearson擬合度檢驗發現，DVDMS在3種溶液中的光漂白率與時間的對數呈線性相關，見表2。以激光照射時間和初始濃度為自變量對DVDMS的光漂白率(%)進行線性回歸分析，在NS、RPMI-1640，RPMI-FBS中的擬合公式分別為Y=0.902+0.068X1+0.075X2(R=0.866，F=85.581，P=0.000)，Y=2.620+0.071X1+0.006X2(R=0.914，F= 145.435，P=0.000)，Y=2.929+0.165X1+0.247X2(R=0.737，F=33.962，P=0.000)。其中Y為漂白率(%)，X1為激光照射時間，X2為初始濃度。進一步以溶劑類型、激光照射時間和初始濃度為自變量對DVDMS的光漂白率(%)進行線性回歸分析，得到擬合公式分別Y=1.073+ 1.348Xi+ 0.079X2-0.008X3(R=0.520，F=29.195，P=0.000)，其中Y為漂白率(%)；Xi為 溶液類型，1代表NS，2代表RPMI-1640，3代表RPMI-FBS；X2為激光照射時間；X3為初始濃度。

2.5DVDMS在動物組織中的吸收和漂白

圖5　DVDMS在不同溶液中的光漂白量比較(10～180 min)

圖6　DVDMS在不同溶液中的光漂白率比較(10～180 min)

圖7　DVDMS在細胞懸液中濃度和吸光度減少量

圖8　DVDMS在不同溶液中單位時間漂白率的比較

進行熒光測定時，激發波長應大于發射波長。小動物活體成像儀的激發波長有430、590、610、630、670 nm，發射波長有535、600、790 nm。為確定最佳測量波長，裸鼠按2 mg/kg尾靜脈注射DVDMS，1 h后腹腔注射戊巴比妥鈉60 mg/kg麻醉，測量并比較不同波長組合下的熒光強度。DVDMS在激發波長430 nm，發射波長600 nm時熒光信號最強，但各位置信號無差異，不適合觀察，在激發波長630 nm，發射波長790 nm處熒光強度高于激發波長590 nm，發射波長790 nm。因此選擇熒光測量條件為激發波長630 nm，發射波長790 nm。

裸鼠按2 mg/kg尾靜脈注射DVDMS，給藥后8、12、24 h在銀屑病模型組和正常組皮膚中含量無顯著差異；在銀屑病模型組皮損部位(背部皮膚)和非皮損部位(腹部皮膚)內含量無明顯區別，模型組各動物在皮膚組織中的分布基本一致，差異較小，見圖9。說明DVDMS在IMQ銀屑病模型動物皮膚組織中分布較為均勻，熒光均一性較好。

DVDMS給藥6 h后進行激光照射，照射后2、6 h(給藥后8、12 h)，激光照射動物背部皮膚組織中含量均明顯低于非照射對照組動物，見圖10。說明在能量密度為9.6 J/cm2的激光照射后，DVDMS在IMQ銀屑病模型動物皮膚組織中發生了明顯光漂白。

表2　DVDMS在不同溶液中的漂白動力學

3　討論

光漂白的研究最早發生在染料性質和生物領域。相對于PDT治療效果的研究，光敏劑光漂白性質的研究較少且缺乏相關的標準和指導原則。目前對于光敏劑光漂白性質的研究方法主要有熒光法和吸光度法兩種。對于細胞及體內研究常采用熒光法，而對于體外溶液體系內的光漂白研究常采用吸光度法。如Zeng等[11]采用熒光光譜法測定了維替泊芬類似物QLT0074在BALB/c小鼠皮膚的光漂白性質，并提出3個新參數用于預測PDT引起的后果。王穎等[10]采用島津UV-1601分光光度計測定吸收光譜，研究了HMME 在不同溶液中的光漂白反應動力學。

本研究采用全波長酶標儀為吸光度檢測手段，構建光漂白檢測系統。相對于分光光度計，酶標儀可同時檢測多個樣本，大大提高了通量并減少了供試品用量，極大地降低了研究的成本。研究發現，在一定濃度范圍內，光敏劑在NS、RPMI-1640、RPMI-FBS和細胞懸液中的吸光度-濃度曲線線性良好且激光照射前后吸光度的變化比較敏感。為光敏劑體外溶液中的光漂白性質研究提供了參考。

許多研究表明光敏劑的光漂白與治療效果有關。如Ascencio等[6]觀察了荷瘤大鼠體內誘導原卟啉IX (protoporphyrin IX，PpIX)的光漂白和腫瘤組織壞死的關系，發現PpIX光漂白與腫瘤組織壞死之間呈直接線性相關，漂白率高的治療效果好，而漂白率低的無效。Johansson等[7]對惡性膠質瘤病人進行5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid，ALA)間質性光動力治療并測量治療前后的PpIX熒光。結果3個病人治療前在腫瘤組織中可檢測到強熒光且激光照射后完全漂白，治療效果好且穩定，而另外2個病人組織中檢測不到PpIX熒光或熒光強度很低，治療失敗。但這種相關性并不是絕對的，也不能簡單地認為光漂白越快越好或者漂白的量越多越好。如Baran等[12]對荷瘤小鼠給予酞菁類光敏劑Pc4后進行相同光劑量但不同光密度(光劑量100 J/cm2，光密度50或150 mW/cm2)的激光照射，發現不同光密度的兩組之間腫瘤生長延遲無顯著差別。Boere等[13]采用原位熒光計量學研究發現，在正常大鼠食管中，給予相同劑量ALA、相同激光照射條件下，PpIX熒光漂白差異顯著。PpIX高漂白率導致高上皮損害，而漂白率低時食管組織對ALA-PDT無應答，在有反應組，PpIX光漂白呈先快后慢的兩相衰減，而無反應的組缺乏快速漂白階段，且第二階段的漂白率更低，說明初始的快速漂白階段對PDT治療非常重要。

圖9　DVDMS在正常和銀屑病模型動物組織內分布比較

圖10　DVDMS在IMQ模型動物皮膚中的光漂白

本研究發現，在前期的藥效學研究條件下，DVDMS在濃度1～40 μg/mL范圍內，在4種溶液中均發生了明顯漂白，且其在180 min內的光漂白過程呈現一個先快后慢的兩相過程，該特征提示DVDMS可能具有較好的作用效果。需要指出的是，Iinuma等[14]研究發現，在相同光劑量下，功率密度的高低對治療效果無顯著影響，光漂白率和功率密度之間亦無顯著聯系，當初始反應引起局部氧耗竭后，會抑制后續的光化學反應，而持續地反應對于殺傷腫瘤細胞是必須的。這種光漂白和光密度之間的獨立性提示不依賴于氧濃度的光漂白機制的存在，推測光漂白率預測單線態氧和PDT治療效果的作用受限。因此，在利用光漂白對1O2產量、光劑量和治療效果的預測時，應充分考慮體內外藥理毒理學的相關實驗結果。

本研究發現DVDMS在NS、RPMI1640和RPMI-FBS中光漂白率與激光照射時間的對數呈現良好的線性關系；初始濃度可影響光漂白的速度，總體來說DVDMS在這3種溶液中的光漂白速度呈現隨濃度增大而增大的趨勢。但濃度對DVDMS初始光漂白速度的影響并不是簡單的正比關系，在較高的濃度下，一方面隨著光漂白增加，溶液中光敏劑單體濃度下降，會促進一部分聚集的光敏劑解聚成單體形式，造成吸光度測量的誤差；另一方面，較大濃度在漂白過程中產生的單線態氧及漂白產物亦可能對測量造成影響。在細胞懸液中，DVDMS激光照射組的吸光度下降較大，但非照射對照組吸光度也有明顯下降，提示HaCaT細胞對DVDMS 吸收較快。另外，同一濃度的DVDMS在相同照射條件下，在4種溶液中的光漂白量和漂白速度也存在明顯差異，說明溶液體系對光漂白也有明顯影響。

卟啉類光敏劑光漂白過程可用一級動力學模型表示。一級動力學模型便于計算，但只能滿足部分實驗數據。Braichotte等[15]在一級動力學基礎上提出了二級動力學規律，即光敏劑的漂白速度取決于光敏劑的濃度、有效激發光敏劑的光劑量和底物濃度。本研究以激光照射時間、初始濃度和溶劑種類為自變量，以單位時間內的光漂白率作為因變量進行線性回歸分析，得到擬合公式Y=1.073+1.348Xi+ 0.079X2-0.008X3(R= 0.520)，證明DVDMS在單純溶液體系中的光漂白受光劑量、初始濃度和底物的影響，其過程符合二級動力學模型。

研究表明，在采用PDT治療銀屑病時，光敏劑在體內，特別是皮膚組織中的分布對治療結果有較大影響，銀屑病皮損組織的熒光異質性是導致治療效果較差的重要原因之一[16]。本研究采用小動物活體成像儀觀察了DVDMS在正常動物和銀屑病模型動物體內的分布，發現靜脈注射給藥后DVDMS在正常動物和銀屑病模型動物皮膚組織中均有較高的分布，熒光均一性較好；模型動物被激光照射后，DVDMS在皮膚組織中發生了明顯的光漂白，提示其可在皮膚組織發揮治療作用。由于光敏劑自身發光的特性，采用小動物活體成像儀可以動態監測藥物在同一動物組織中的分布隨時間的變化，可大量減少動物的用量并消除不同動物個體差異造成的誤差，對于光敏藥物在體內分布的初步研究以及給藥后PDT時間和條件的選擇具有一定參考價值。

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Research on photobleaching characters of sinoporphyrin sodium

LIU Hanqing1，JIANG Zhihuan2，WU Wentao3，WEI Jinfeng1，2，JIN Hongtao1，2，*，WANG Aiping1，2，*
(1. Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100050; 2. Beijing Union-Genius Pharmaceutical Technology Development Co., Ltd., Beijing 100176; 3. Ocelean Pharmaceutical Technology Company, Tianjin 300384, China)

Q631；R758.63

A

1004-616X(2016)02-0081-11

1 0.3969/j.issn.1004-616x.2016.02.001

2015-07-10；

2015-12-19

國家重大新藥創制資助項目(2013ZX09302302，2012ZX09J12203，2012ZX09301002-001-009)

作者信息： 劉漢清，E-mail：hanqingl@163.com。*

，靳洪濤，E-mail：jinhongtao@imm.ac.cn；王愛平，E-mail：wangaiping@imm.ac.cn