甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病的室內(nèi)及田間試驗

茹李軍，鄭雪松*，盧偉平，陳　宇，丑靖宇，朱杰華，李　淼

（1.中化農(nóng)化有限公司技術(shù)部，上海200002；2.沈陽化工研究院有限公司/新農(nóng)藥創(chuàng)制與開發(fā)國家重點實驗室，遼寧沈陽110021；3.河北農(nóng)業(yè)大學植物保護學院，河北保定071000）

甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病的室內(nèi)及田間試驗

茹李軍1，鄭雪松1*，盧偉平1，陳宇1，丑靖宇2，朱杰華3，李淼2

（1.中化農(nóng)化有限公司技術(shù)部，上海200002；2.沈陽化工研究院有限公司/新農(nóng)藥創(chuàng)制與開發(fā)國家重點實驗室，遼寧沈陽110021；3.河北農(nóng)業(yè)大學植物保護學院，河北保定071000）

進行了4種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌的室內(nèi)毒力測定，防治馬鈴薯黑痣病的室內(nèi)盆栽試驗及田間藥效試驗。采用菌絲干重法測定4種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑室內(nèi)毒力結(jié)果表明，烯肟菌胺、唑菌酯、唑胺菌酯及烯肟菌酯對馬鈴薯黑痣病菌毒力相當，與嘧菌酯無明顯差異。室內(nèi)盆栽試驗結(jié)果表明，相對于其他測試藥劑，烯肟菌胺與唑胺菌酯對馬鈴薯黑痣病防效相對更好，分別為74.3%和77.1%。田間藥效試驗結(jié)果表明，播種時，溝施烯肟菌胺或唑胺菌酯對馬鈴薯黑痣病有較好抑制作用，推薦劑量均為187.5 g/hm2。

甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑；立枯絲核菌；黑痣病；室內(nèi)毒力；田間藥效

在2015年初北京召開的“馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略研討會”上，馬鈴薯主糧化已經(jīng)上升為國家戰(zhàn)略[1]，但中國馬鈴薯生產(chǎn)技術(shù)仍很薄弱，影響馬鈴薯產(chǎn)量與品質(zhì)的因素很多，而黑痣病成為馬鈴薯生產(chǎn)發(fā)展瓶頸屢屢被報道[2]。馬鈴薯黑痣病是由立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kuhn）引起的土傳和種傳病害，又稱立枯絲核菌病、莖基腐病、黑色粗皮病[3]。該病主要危害馬鈴薯的幼芽、莖基部及塊莖，造成缺苗斷壟，嚴重時導致植株死亡，收獲后薯塊商品性降低。

甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑多數(shù)作用于真菌萌發(fā)、侵染、生長和產(chǎn)孢的各個過程，具有殺菌譜廣的特點[4]。烯肟菌胺、唑菌酯[5]、唑胺菌酯[6]及烯肟菌酯均是沈陽化工研究院開發(fā)的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，對立枯絲核菌具有較好的抑菌活性[7]。當前，中國獲得防治黑痣病登記的品種僅有嘧菌酯、咯菌腈及噻呋酰胺。本研究通過室內(nèi)活性比較、室內(nèi)盆栽及田間試驗，篩選出防治馬鈴薯黑痣病的其他甲氧基丙烯酸酯殺菌劑，以期為防治馬鈴薯黑痣病提供更多選擇。

1　材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1供試菌種

馬鈴薯黑痣病菌立枯絲核菌（R.solani）為河北農(nóng)業(yè)大學馬鈴薯病害研究中心保存的菌株，其采集地點、年份、分離部位和融合群等相關(guān)信息見表1。

表1　供試菌株Table 1Detail of tested isolates

1.1.2供試藥劑

20%烯肟菌胺懸浮劑、20%唑菌酯懸浮劑、20%唑胺菌酯懸浮劑及20%烯肟菌酯懸浮劑由中化農(nóng)化有限公司提供；對照藥劑250 g/L嘧菌酯懸浮劑、25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑（先正達公司）市購獲得。

1.2試驗方法

1.2.1菌絲干重法測定藥劑對黑痣病菌的毒力

采用菌絲干重法測定供試藥劑對馬鈴薯黑痣病菌的毒力。在前期毒力測定基礎(chǔ)上，設定了1，0.5，0.25，0.125和0 μg/mL 5個濃度，每個濃度4次重復。每個三角瓶中PD培養(yǎng)基100 mL，接種3個直徑為6 mm的菌盤，25℃恒溫黑暗條件下培養(yǎng)3 d，過濾后獲得菌絲，然后將菌絲置于80℃烘箱中干燥3 h，待菌絲冷卻至室溫后稱其干重。根據(jù)藥劑濃度與菌絲干重抑制率的關(guān)系，計算藥劑的抑制中濃度EC50。

1.2.2盆栽試驗測定藥劑對黑痣病的防病效果

稱取燕麥100 g于250 mL錐形瓶中，用無菌水浸泡10~12 h后進行高溫滅菌。將足量MWC-4菌盤與燕麥混合，22℃下培養(yǎng)3周，每3 d晃動錐形瓶1次，以防止菌盤與燕麥粒結(jié)塊，待黑痣病菌充分生長于燕麥粒上后進行接種。

馬鈴薯的盆栽種植：將蛭石與土壤干熱滅菌后，按1∶2比例裝入用75%乙醇消毒的塑料花盆中。供試品種為‘費烏瑞它’，選取芽長3~10 mm的薯塊進行播種。溫室條件下培養(yǎng)。

盆栽接種：取已接菌的燕麥粒（每個處理30 g）與蛭石混合，24 h后用于播種。

試驗分為對照組和試驗組，每個處理20次重復。對照組分為清水對照（未接菌）、空白對照（接菌未施藥）和藥劑對照（嘧菌酯）。試驗組為中化農(nóng)化有限公司的4種新藥劑。供試藥劑均稀釋100倍，每個重復施藥300 mL，分3步施入花盆。（1）在盆中加入1/3栽培基質(zhì)（蛭石與菌土混合物）后，在其上噴施100 mL稀釋藥劑，播種馬鈴薯；（2）再放入約1/3栽培基質(zhì)后，再次噴施100 mL稀釋藥劑；（3）將剩余栽培基質(zhì)放入后，施入剩余的100 mL稀釋藥劑。

接種6周后，調(diào)查馬鈴薯植株地下莖部分的被侵染情況，按黑痣病級別分級標準記錄植株的發(fā)病情況，并計算病情指數(shù)[8]。

0級：薯塊上無病斑；

1級：病斑小，病部面積占整個薯塊表面積的5%以下；

2級：病斑較小，病部面積占整個薯塊表面積的6%~10%；

3級：病斑較小或個別較大，病部面積占整個薯塊表面積的11%~25%；

4級：病斑大小均有分布，病部面積占整個薯塊表面積的26%~50%；

5級：病斑大小均有分布，病部面積占整個薯塊表面積的51%以上。

1.2.3承德甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病田間試驗

試驗田位于河北省承德市圍場縣銀窩溝鄉(xiāng)。試驗地地勢平坦，土質(zhì)為栗鈣土，肥力較高。供試品種為‘費烏瑞它’，露天栽培。2014年4月15日播種。壟距0.8 m，株距0.3 m，馬鈴薯黑痣病常年均有發(fā)生。

供試藥劑和用量為20%烯肟菌胺懸浮劑、20%唑胺菌酯懸浮劑187.5 g/hm2，對照藥劑250 g/L嘧菌酯懸浮劑187.5 g/hm2。施藥方法為溝施法：先開溝，播種后使用噴霧器將藥液均勻噴至薯塊上和溝中，覆土即可。溝施用藥液450 L/hm2。對照藥劑25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑100 mL/100kg種子，施藥方法為拌種法：將切好的馬鈴薯芽塊平鋪到塑料布上，將配好的藥液均勻噴灑到芽塊上，攪拌均勻后撒上滑石粉（2.5 kg/100kg種薯），混勻晾干后播種。拌種藥液量4 L/100kg種薯。另設不施藥的空白對照。小區(qū)面積96 m2，3次重復。出苗后（6月1日）調(diào)查出苗率，馬鈴薯開花期（6月30日）調(diào)查馬鈴薯植株黑痣病發(fā)生情況，收獲時（8月7日）調(diào)查馬鈴薯薯塊黑痣病發(fā)病情況。

出苗率調(diào)查：每小區(qū)隨機5點取樣，每點調(diào)查20株，記錄出苗株數(shù)。

馬鈴薯植株黑痣病調(diào)查：每小區(qū)隨機5點取樣，每點調(diào)查20株，將馬鈴薯植株及未出苗芽塊挖出，觀察其莖基部和根部是否有鐵銹色病斑，芽眼附近是否有白色粉末狀物。如果有上述癥狀則視為黑痣病。調(diào)查并記錄病株數(shù)。

收獲時馬鈴薯黑痣病調(diào)查：每小區(qū)5點取樣，每點收獲4株馬鈴薯，5點共收獲20株馬鈴薯。調(diào)查薯塊上黑痣病發(fā)病情況，按病斑占整個薯塊的面積劃分病級[9]。

0級：薯塊上無病斑；

1級：病斑小，病部面積占整個薯塊表面積的5%以下；

3級：病斑較小，病部面積占整個薯塊表面積的6%~10%；

5級：病斑較小或個別較大，病部面積占整個薯塊表面積的11%~25%；

7級：病斑大小均有分布，病部面積占整個薯塊表面積的26%~50%；

9級：病斑大小均有分布，病部面積占整個薯塊表面積的51%以上。

藥效計算方法：

出苗率（%）=（出苗數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100

病株率（%）=（病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100

植株黑痣病防治效果（%）＝[（對照發(fā)病率－處理發(fā)病率）/對照發(fā)病率]×100

病薯率（%）=（病薯數(shù)/調(diào)查總薯數(shù)）×100

病情指數(shù)=Σ（各級病薯數(shù)×相對級數(shù)值）/（調(diào)查總薯數(shù)×9）×100

薯塊黑痣病防治效果（%）=[（對照區(qū)病情指數(shù)－處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)]×100

1.2.4長春甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病田間試驗

試驗設在長春市雙陽區(qū)山河街道佟家村3社進行。供試田地為壤質(zhì)粘土，土壤有機質(zhì)2.71%。馬鈴薯品種為‘費烏瑞它’，露天栽培。2014年5月3日播種。壟距0.6 m，株距0.3 m。馬鈴薯黑痣病常年發(fā)生。

小區(qū)面積75 m2，3次重復。出苗后（6月1日）調(diào)查出苗率，馬鈴薯開花期（6月30日）調(diào)查植株黑痣病發(fā)生情況，收獲時（8月7日）調(diào)查馬鈴薯黑痣病病薯發(fā)生情況。試驗劑量、調(diào)查及藥效計算方法同上。

2　結(jié)果與分析

2.1藥劑對馬鈴薯黑痣病菌的毒力測定

供試藥劑對黑痣病菌都有較強的抑制作用（表2）。烯肟菌胺、唑菌酯、唑胺菌酯及烯肟菌酯對馬鈴薯黑痣病菌毒力EC50值都在0.50 μg/mL左右，而嘧菌酯的EC50為0.07 μg/mL。但烯肟菌胺、唑菌酯、唑胺菌酯與烯肟菌酯EC50值95%置信限與嘧菌酯有重疊，烯肟菌胺、唑菌酯、唑胺菌酯與烯肟菌酯對馬鈴薯黑痣病毒力與嘧菌酯無明顯差異。

表2　供試藥劑毒力方程及其抑制中濃度Table 2Virulence equation and EC50of fungicides to R.solani

2.2盆栽試驗測定藥劑對黑痣病的防病效果

接種6周后調(diào)查發(fā)現(xiàn)清水對照未發(fā)病，其病情指數(shù)為0，未施藥的空白對照病情指數(shù)達到了70；而對照藥劑（嘧菌酯）處理黑痣病發(fā)病最輕，其病情指數(shù)為12。供試4種新藥劑和對照藥劑對黑痣病均有一定的防效。烯肟菌胺和唑胺菌酯的防控效果較好，而唑菌酯與烯肟菌酯對馬鈴薯黑痣病防效相對較差（表3）。

表3　甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治黑痣病室內(nèi)盆栽試驗Table 3Efficacy of strobilurin fungicides for suppressing potato black scurf

2.3承德甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病田間試驗

承德田間試驗結(jié)果表明（表4），使用20%烯肟菌胺SC和20%唑胺菌酯SC 187.5 g/hm2在馬鈴薯播種時溝施，對黑痣病防治效果與對照藥劑250 g/ L嘧菌酯SC溝施法及25 g/L咯菌腈FS拌種法差異不明顯。各處理間馬鈴薯出苗率差異亦不顯著。

2.4長春甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病田間試驗

長春田間試驗結(jié)果表明（表5），20%唑胺菌酯SC和20%烯肟菌胺SC 187.5 g/hm2在馬鈴薯播種時溝施，馬鈴薯的出苗率顯著高于250 g/L嘧菌酯SC。20%烯肟菌胺SC 187.5 g/hm2對馬鈴薯薯塊黑痣病防效與25 g/L咯菌腈FS處理差異不顯著，但顯著高于20%唑胺菌酯SC和250 g/L嘧菌酯SC。選用溝施法的唑胺菌酯及嘧菌酯處理對馬鈴薯植株黑痣病防效差異不顯著，但顯著低于選用拌種法的咯菌腈處理。

3　討論

表4　2014年承德甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑防治馬鈴薯黑痣病田間試驗Table 4Control efficacy of four strobilurins fungicides on potato black scurf in field trial of Chengde in 2014

馬鈴薯黑痣病是種薯和土壤帶菌傳播的病害，控制難度較大，生產(chǎn)上通常采取綜合防治方法，但藥劑防治仍為重要的防治手段之一[9]。中國獲取防治馬鈴薯黑痣病正式登記的僅有嘧菌酯、咯菌腈和噻呋酰胺單劑，據(jù)報道吡唑醚菌酯、氟唑環(huán)菌胺[10]、甲基立枯磷等對黑痣病防效也很理想。馬鈴薯黑痣病的施藥方法既有溝施法也有拌種法[11]，本研究即選嘧菌酯溝施法和咯菌腈拌種法作為對照，篩選防治馬鈴薯黑痣病的其他解決方案。

室內(nèi)毒力試驗說明20%烯肟菌胺懸浮劑、20%唑胺菌酯懸浮劑、20%唑菌酯懸浮劑及20%烯肟菌酯懸浮劑對馬鈴薯黑痣病菌的毒力無明顯差異，這與趙杰等[7]測定的烯肟菌胺、唑胺菌酯及烯肟菌酯對立枯絲核菌毒力無明顯差異結(jié)論一致。防治馬鈴薯黑痣病藥效試驗中，病級分級尚未有國家標準，且未用藥劑處理發(fā)病程度明顯不同。為便于統(tǒng)計分析，盆栽試驗與田間試驗馬鈴薯黑痣病分級標準有所差異。室內(nèi)盆栽試驗說明4種殺菌劑對黑痣病都有一定的防效，但不同推薦劑量下略低于對照藥劑嘧菌酯。烯肟菌胺和唑胺菌酯防效相對烯肟菌酯和唑菌酯防效更好些。2014年防治馬鈴薯黑痣病的田間試驗結(jié)果表明，烯肟菌胺、唑胺菌酯與嘧菌酯對植株黑痣病防效差異不顯著，防治薯塊黑痣病烯肟菌胺防效相對較好。

綜上所述，20%烯肟菌胺懸浮劑、20%唑胺菌酯懸浮劑、20%烯肟菌酯懸浮劑和20%唑菌酯懸浮劑對馬鈴薯黑痣病菌均有較強的毒力。20%烯肟菌胺懸浮劑和20%唑胺菌酯懸浮劑可在馬鈴薯播種時通過溝施使用，有效防治莖與薯塊黑痣病發(fā)生，推薦劑量為187.5 g/hm2。

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Toxicity Bioassay and Field Trial of Strobilurin Fungicides Against Potato Black Scurf

RU Lijun1,ZHENG Xuesong1*,LU Weiping1,CHEN Yu1,CHOU Jingyu2,ZHU Jiehua3,LI Miao2
(1.Sinochem Agrochem Co.,Ltd.,Shanghai 200002,China;2.State Key Laboratory of the Discovery and Development of Novel Pesticide/Shenyang Research Institute of Chemical Industry Co.,Ltd.,Shenyang,Liaoning 110021,China;3.College of Plant Protection,Agricultural University of Hebei,Baoding,Hebei 071000,China)

ract:Four strobilurin fungicides were tested for their toxicities onRhizoctonia solaniby laboratory bioassay,in greenhouse pot experiment and open field trials.The bioassay using weighting dry mycelium method indicated that fenaminstrobin,pyraoxystrobin,pyrametostrobin and enostroburin had similar toxicity to R.solani and no obvious difference from azoxystrobin,the control.The pot experiment showed that fenaminstrobin and pyrametostrobin had better control efficacy than other fungicides tested,being 74.3%and 77.1%,respectively.Field trials demonstrated that furrow application of fenaminstrobin and pyrametostrobin at the rate of 187.5 g/ha had good efficacy on control of potato black scurf.

rds:strobilurin;Rhizoctonia solani;black scurf;toxicity biossasay;field efficacy

S532

B

1672－3635（2016）02-0112-06

2015-03-22

中化股份科技投入計劃項目（092013011y）。

茹李軍（1971-），男，碩士，技術(shù)總經(jīng)理，主要從事創(chuàng)制產(chǎn)品應用技術(shù)研究與推廣。

（Corresponding author）：鄭雪松，技術(shù)總監(jiān)，主要從事創(chuàng)制產(chǎn)品應用技術(shù)探索與推廣，E-mail:xuesong716@163.com。