不同標本類型對一種NT-proBNP（POCT法）檢測結果的影響

龍林會，陳芳四川省自貢市第三人民醫院檢驗科，四川自貢　643000

不同標本類型對一種NT-proBNP（POCT法）檢測結果的影響

龍林會，陳芳
四川省自貢市第三人民醫院檢驗科，四川自貢643000

目的 探討不同標本類型對一種POCT法檢測N末端B型利鈉肽（NT-proBNP）檢測結果的影響。 方法 收集6例患者樣本，其中男女各3例。另收集正常體檢者2例樣本作為樣本稀釋液。隨機收集20例心功能不全病例標本用于相關性分析。結果 以化學發光定量檢測作為標準，測定干燥血清管標本的NT-proBNP結果與武漢明德公司POCT法分析儀檢測兩種標本NT-proBNP濃度的Pearson相關系數分別是r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7；不同類型標本NT-proBNP（POCT法）濃度比較P＜0.05，差異有統計學意義；將干燥管分離出的血清為最適標本存放在室溫下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后測定的NT-proBNP，各組數據間差異無統計學意義（P＞0.05）。結論 該研究認為采用武漢明德公司POCT法檢測NT-proBNP使用干燥真空管采集標本為最適標本。

N末端B型利鈉肽，POCT法，檢測，心力衰竭

［Abstract］Objective To study the effect of different specimen types on the test results of NT-proBNP by the POCT method.Methods The specimens of 3 female cases and 3 male cases were collected，and another 2 specimens of cases of normal physical examiners were selected as the sample diluent，and 20 specimens of disease cases with cardiac insufficiency were randomly collected for the relevant analysis.Results The Pearson correlation coefficients of NT-proBNP result of dry serum tube specimen and NT-proBNP concentration of two specimens detected by the analysis meter by the POCT method in Wuhan Mingde Company were respectively rdrying tube=0.9528 and rEDTA-K2anticoagulative tube=0.9307 taking the chemiluminescence quantitative test as standards，the difference in the NT-proBNP concentration between different types of specimens had statistical significance，P＜0.05，the serum isolated from the drying tube were used as the optimal specimen and stored at the room temperature，and the NT-proBNP was measured after 0 h，2 h，4 h，8 h，12 h and 24 h，and the difference between groups had no statistical significance，P＞0.05.Conclusion The research shows that the specimen collected by the dry vacuum tube is the optimal specimen after testing NT-proBNP by the POCT method in Wuhan Mingde Company

［Key words］NT-proBNP；POCT method；Detection；Heart failure

心力衰竭（Heart Failure，HF）是指由于心臟功能障礙而產生的體征和癥狀的臨床綜合征；它是目前嚴重危害人類健康的最常見的一種綜合征 因此心衰的早期診斷及規范治療對逆轉左室重構，阻斷心血管病的發生與發展極為重要B-型腦利鈉肽（BNP）主要由心室分泌，因此在診斷心室功能障礙時，是個直接客觀的標志物。N末端B型利鈉肽（NT-proBNP）和BNP同屬利鈉肽家族，均用于臨床檢測心肌細胞受刺激后，產生含134個氨基酸的B型利鈉肽原前體（pre-proBNP），隨后形成含108個氨基酸的BNP前體（proBNP），后者在內切酶的作用下裂解為含有76個氨基酸 無生物活性的NT-proBNP和含有32個氨基酸 有活性的B型利鈉肽 （BNP）BNP半衰期短（22 min），體外穩定性差，而NT-proBNP半衰期較長（120 min），體外穩定性強，體外檢測影響因素相對BNP的檢測要少，且在心力衰竭患者中的濃度較BNP高，在有些情況下更有利于心力衰竭的診斷 在應用基因重組技術產生的重組人B型利鈉肽（rhBNP）進行治療時，測定NT-proBNP不受干擾［1］現在國內多數醫院采用進口的儀器和試劑進行檢測，成本較高，檢測時間較長，床旁檢測（POCT法）測定NT-proBNP可方便快速地提供較可靠檢驗結果，有助于醫生更早制訂治療策略，并節省治療費用；它作為中心實驗室的擴展，能夠增加檢測能力，并減輕實驗室檢驗人員的壓力；管理人員也能更合理地使用資源。更為重要的是它滿足了人們在時間上的需要，使患者及時得到診斷和治療［2］。怎樣獲得準確的檢測結果是至關重要的，其中選擇正確的標本類型是取得準確結果的關鍵。該院使用的武漢明德公司的NT-proBNP （POCT法）是一種國產試劑，在開始使用時，臨床反映檢測結果有偏高現象，經詳細調查，發現為標本類型選擇不適導致。現將在室溫下不同標本類型對該院應用的武漢明德公司NT-proBNP（POCT法）檢測結果影響分析如下。

1　材料與方法

1.1儀器、試劑與標本

1.1.1儀器與試劑NT-proBNP定量檢測采用羅氏Cobas E601電化學發光分析儀測定，校準液、試劑、質控物、消耗品等由羅氏公司原裝配套提供；NT-proBNP （POCT法），定量分析儀，試劑，質控卡由武漢明德公司提供。

1.1.2標本的選擇臨床標本采集考慮到檢測干擾的存在，所選標本均無溶血、脂血及黃疸的新鮮標本。抽血患者為臨床確診為心力衰竭患者。共收集6例患者樣本，其中男女各3例。另收集正常體檢者2例樣本作為樣本稀釋液。隨機收集20例心功能不全病例標本用于相關性分析。

1.2檢測方法

1.2.1標本采集于清晨空腹抽取靜脈血4～5 mL，分別置于EDTA-K2真空抗凝管、干燥血清管，3 000 r/min離心10 min，分離血清和血漿（標本管均由BD公司提供）。已有較多研究表明NT-proBNP定量檢測最適標本為干燥真空管采集的標本［3］。為了節約成本，使用美國羅氏公司Cobas E601免疫分析儀檢測干燥血清管標本NT-proBNP濃度。武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測兩種標本NT-proBNP濃度。

1.2.2標本準備將分離后的患者標本按不同標本管用低值血清或血漿進行配制成高值，中值，低值。立即連續測定高、中、低5次并取均值。剩余標本分別分裝成20份備用。

1.2.3室溫下穩定性實驗將干燥血清管標本于室溫（22℃±3℃）放置0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h，測定NT-proBNP濃度，根據其檢測結果觀察其結果穩定性。

1.3統計方法

2　結果

2.1相關性分析

以化學發光定量檢測作為標準，測定干燥血清管標本的NT-proBNP結果與武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測兩種標本NT-proBNP濃度的相關性比較，見表1。

表1　不同標本類型POCT法檢測NT-proBNP與Cobas E601免疫分析儀檢測NT-proBNP相關性分析

2.2不同類型標本NT-proBNP（POCT法）濃度比較

兩種不同類型標本中，NT-proBNP濃度存在明顯差異，EDTA-K2抗凝血漿較高，與干燥管標本的NT-proBNP水平相比明顯升高（P＜0.05），差異有統計學意義。這個結果與化學發光分析法檢測結果相關研究不符［3-4］，化學發光法定量檢測認為二者差異無統計學意義。見表2。

表2　不同標本類型NT-proBNP（POCT）檢測結果間比較（±s）

表2　不同標本類型NT-proBNP（POCT）檢測結果間比較（±s）

注：與干燥管（紅色頭）血清比較，△P＜0.05。

NT-proBNP（pg/mL）　干燥管（紅色頭）血清　EDTA-K2抗凝血漿高值中值低值8 440±743.64 560±66.71 148±19.24 （9 300±1 004.03）△（652±81.97）△（166±20.4）△

2.3 NT—proBNP（POCT法）不同保存條件下結果的穩定性觀察

將干燥管分離出的血清為最適標本存放在室溫下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后測定的NT-proBNP結果見下圖。NT-proBNP水平在室溫下24 h內檢測結果不受存放時間的影響，各組數據間差異無統計學意義（P＞0.05）。

注：A：干燥管標本NT-proBNP高值在室溫保存不同時間穩定性分析；B：干燥管標本NT-proBNP低值在室溫保存不同時間穩定性分析。

3　討論

①根據使用美國羅氏公司Cobas E601免疫分析儀檢測干燥血清管標本的NT-proBNP；其檢測結果與武漢明德公司NT-proBN（POCT）分析儀檢測兩種標本NT-proBNP濃度進行相關性分析結果可見（r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7）：檢測結果與武漢明德公司 NT-proBNP（POCT）分析儀檢測干燥管分離的血清標本結果相關性較好。與王偉佳等人研究相符［3-4］。

②通過表2結果分析可以看出，采用武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測NT-proBNP，EDTA-K2抗凝血漿檢測結果明顯高于干燥管（紅色頭）血清檢測結果，二者比較P＜0.05，差異有統計學意義，與采用化學發光分析法檢測的臨床研究不符［3-4］。盡管EDTA-K2抗凝血漿檢測結果明顯高于干燥管（紅色頭）血清檢測結果，似乎前者靈敏度更高，但特異性太低會增加臨床醫生鑒別診斷的難度，導致不必要的麻煩。目前NT-proBNP是臨床醫生對心衰發生和發展的觀測指標之一，其與臨床癥狀不符的異常升高或降低是引起臨床醫生質疑的重要原因［5］。

③結合相關性分析、不同類型標本檢測結果分析、該方法檢測NT-proBNP穩定性分析，以及“NT-proBNP臨床應用中國專家共識”的相關陳述，該院采用武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測NT-proBNP使用干燥真空管采集標本進行檢測。自2013年2月至今檢測結果穩定可靠。因此正確的選擇標本類型是獲得準確結果的前提。

④床旁檢測 （point of care testing，POCT）測定NT-proBNP方便快速地提供可靠檢驗結果，有助于醫生更早制訂治療策略，并節省治療費用；它作為中心實驗室的擴展，能夠增加檢測能力，并減輕實驗室檢驗人員的壓力；管理人員也能更合理地使用資源。但是該方法目前還無法進行國家性的標準化管理，所以在投入使用前一定要做方法的性能評價，選擇最適檢測條件，盡可能的避免一些影響因素導致的結果不準確。同時在應用的過程中多與臨床聯系，了解檢測結果與臨床診斷、臨床治療效果的評價，從而為臨床醫療和患者健康提供更有效的服務。

［1］NT-proBNP臨床應用中國專家共識小組.NT-proBNP臨床應用中國專家共識［J］.中國心血管病研究，2011，9（6）：401-408.

［2］康熙雄.床旁檢測臨床應用手冊［M］.人民軍醫出版社，2010，5（1）：前言.

［3］王偉佳，張秀明，溫冬梅，等.不同抗凝劑、樣本放置時間及保存溫度對B型利鈉肽和氨基末端B型利鈉肽原檢測的影響［J］.現代檢驗醫學雜志，2012，27（2）：83-87.

［4］戴雯，李艷，蘇漢文.標本類型及存放時問對心衰患者BNP 和NT-proBNP檢測結果的影響［J］.微循環學雜志，2010，20 （2）：37-38.

［5］韋丙奇，楊躍進，張健，等.血漿N末端B型利鈉肽原對預測心力衰竭患者住院病死率的價值［J］.中華心血管病雜志，2009，37：481-485.

Effect of Different Specimen Types on the Test Result of a Kind of NT-proBNP by the POCT Method

LONG Lin-hui，CHEN Fang
Department of Clinical Laboratory，Zigong Third People's Hospital，Zigong，Sichuan Province，643000 China

R541

A

1672-5654（2016）06（c）-0114-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.18.114

龍林會（1971.11-），女，四川宜賓人，本科，主管技師，主要從事臨床免疫學檢驗工作，E-mail：2644815114@qq. com）。

（2016-03-26）