Notch2分子對慢性乙型肝炎患者CD8+T細胞功能的影響及意義

李彧　連建奇　張野　王九萍　魏欣　張鴻　曹寧家　田穎　白雪帆

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Notch2分子對慢性乙型肝炎患者CD8+T細胞功能的影響及意義

李彧連建奇張野王九萍魏欣張鴻曹寧家田穎白雪帆

目的觀察慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T細胞中Notch2分子的表達情況，并分析Notch2分子對CD8+T細胞功能的影響。方法選擇30例慢性乙型肝炎患者和15名健康對照者，應用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞，應用免疫磁珠法分離CD8+T細胞，應用反轉錄實時定量PCR法檢測CD8+T細胞中Notch2 mRNA的表達水平。將分離的CD8+T細胞與HepG2.2.15細胞混合培養，并加入抗Notch2抗體，培養48 h后應用CCK-8法檢測細胞增殖，應用ELISA法檢測上清中IFN-γ、IL-2及TNF-α的表達水平。結果慢性乙型肝炎患者CD8+T細胞中Notch2 mRNA的表達水平明顯升高，較健康對照者升高超過5倍。應用抗Notch2抗體抑制Notch2分子信號通路后，混合培養細胞的增殖水平(8.88±1.56)×105較同型對照組(4.47±1.13)×105和空白對照組(4.39±0.95)×105均明顯升高，培養上清中的IFN-γ：3815±807 pg/mL和TNF-α：346.3±77.3 pg/mL的表達水平也較同型對照組IFN-γ：1316±484 pg/mL；TNF-α：139.8±40.1 pg/mL及空白對照IFN-γ：1383±604 pg/mL；TNF-α：124.0±45.5 pg/mL組顯著升高，差異均具有統計學意義。結論HBV感染可能通過提高Notch2的表達抑制CD8+T細胞的殺傷功能，誘導機體免疫耐受，導致感染慢性化。

慢性乙型肝炎；Notch1；Notch2；CD8+T淋巴細胞

乙型肝炎嚴重威脅人類的生命健康。乙型肝炎病毒(HBV)是一種不直接引起細胞破壞的嗜肝DNA病毒，可以導致慢性肝炎、肝硬化乃至肝癌[1]。其肝臟損傷的機制主要是由機體免疫系統介導的，并依賴于病毒的不斷復制。在急性自限性乙型肝炎患者體內可以發現多特異性的較高強度的CTL和Th細胞反應，而在慢性HBV感染者體內病毒特異性CTL和Th細胞存在數量和功能上的缺陷[2]。……