消炎止痛膏質量控制方法研究

許　輝　劉　軍　代鵬程　李紅兵（中國人民解放軍第291醫院　包頭　014040）

消炎止痛膏質量控制方法研究

許輝劉軍代鵬程李紅兵（中國人民解放軍第291醫院包頭014040）

目的：建立消炎止痛膏有效的質量控制方法。方法：采用薄層色譜法鑒別血竭、冰片；運用高效液相色譜法測定血竭中的血竭素含量。結果：薄層色譜方法簡便、專屬性強、重復性好；含量測定結果準確，血竭素的平均回收率為98.07%（RSD=1.53%，n=6）；血竭素在0.1～0.6μg/mL范圍內呈良好的線性。結論：本方法可有效控制消炎止痛膏的質量。

消炎止痛膏 薄層色譜法 高效液相色譜法

消炎止痛膏是我院臨床應用40多年的自制制劑，由血竭、冰片等六味藥材組成，消炎收斂、止血止痛、生肌，用于肛裂、內痔、外痔、混合痔等肛門疾病和術后出血疼痛。本試驗采用薄層色譜法對處方中血竭、冰片進行薄層色譜鑒別。血竭是方中主藥，因此選定血竭素為該制劑的含量測定項目，以制定該制劑的質量標準。

1儀器與試藥

1.1儀器：UltiMate3000高效液相色譜儀（Thermo Fisher），包括UltiMate3000 RS雙三元泵，UltiMate3000 RS二極管陣列檢測器，UltiMate3000 RS自動進樣器，UltiMate3000 RS柱溫箱，變色龍7色譜工作站。

濾膜0.45um，Φ13mm（上海興亞凈化材料廠）

硅膠G薄層板，青島海洋化工廠（供薄層層析用）

血竭、冰片等陰性樣品自制。

中藥飲片經鑒定均符合《中國藥典》2015年版（一部）規定。

血竭高氯酸鹽對照品（批號0811—9302供含量測定用）血竭對照藥材（批號906—9607供鑒別用）冰片對照品（批號743—8902供鑒別用）均由中國藥品生物制品檢定所提供；消炎止痛膏委托加工自制制劑；乙腈為色譜純；其他試劑均為分析純。

2定性鑒別

2.1冰片的薄層鑒別：取本品2g，加甲醇20mL，60℃加熱旋搖5min，低溫過濾。濾液揮干，殘渣加醋酸乙酯2mL使溶解，作為供試品溶液。另取冰片對照品，加醋酸乙酯制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。陰性供試品制備：按處方不加冰片制成對應膏劑，按照供試品的制備方法，制備陰性對照液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷—醋酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。噴以5%香草醛硫酸溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性供試品在相應的位置上無斑點。

2.2血竭的薄層鑒別：取本品2g，加甲醇20mL，60℃加熱旋搖5min，低溫過濾。濾液作為供試品溶液，另取血竭對照藥材0.1g，同法制成對照藥材溶液。再取血竭素高氯酸鹽對照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。陰性供試品制備：按處方不加血竭制成對應膏劑，按照供試品的制備方法，制備陰性對照液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502）試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5μL、對照品溶液2μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿—甲醇（19∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性供試品在相應的位置上無斑點。

3血竭素含量測定

3.1色譜條件及系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-5%醋酸水（50∶50）為流動相，柱溫40℃，檢測波長471nm。理論板數按血竭素峰計算應不低于13000。

3.2對照品溶液的制備：精密稱取適量血竭素高氯酸鹽標準品，加入3%磷酸甲醇溶液，配制成每毫升含45μg血竭素的溶液。

3.3供試品溶液的制備：精密稱取消炎鎮痛膏2.0g于研缽中，加入3.0g硅藻土，精密稱定，研磨均勻。精密稱取2.0g混合粉于磨口錐形瓶中，精密加入20.00mL 3%磷酸甲醇，稱定重量。搖勻，放置過夜，超聲20min，稱重，補足失重，搖勻，過濾，取續濾液。

3.4測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

3.5陰性試驗：按樣品工藝制備缺血竭素的陰性對照品，按供試品溶液的制備項下操作，結果HPLC圖譜在與血竭相應的位置上沒有吸收峰，表明其他成分對測定無干擾。

3.6精密度試驗：按“3.3”項下制備供試品溶液，重復進樣6次，按血竭素峰面積計算，RSD＜2%。

3.7重現性與穩定性試驗：按正文平行制備六份供試品溶液，每份進樣2次，取平均值計算血竭素含量，RSD＜2%。取其中一份供試品溶液于0、11、13、16、27h測定，結果27h峰面積基本不變，血竭素的RSD為1.51%。

3.8線性關系的考察：配制50μg/mL的血竭素高氯酸鹽標準品溶液（換算成血竭素重量=血竭素高氯酸鹽重量/1.377），分別進樣2，4，6，8，10，12μL，以峰面積為縱坐標（Y），被測組分濃度（μg/mL）為橫坐標（X），進行線性回歸，得到血竭素的回歸方程：Y=0.2119X-0.0198（R2=1）。

3.9回收率試驗：精密稱取消炎止痛膏1.0g，加入對血竭素含量80%、100%、120%的對照品，按“3.3”項下制備供試品溶液，注入色譜儀，計算回收率，RSD＜2%。

3.10樣品測定

三批樣品含量測定

按2015版中國藥典血竭含量測定項下規定血竭素含量不低于1%，折算本制劑每克含量血竭素應不低于0.11mg/g。三批樣品均高于上述值，故采用藥典規定折算值0.11mg/g。

4討論

4.1色譜條件的選擇：參考有關文獻，本實驗以乙腈-5%醋酸水（50∶50）為流動相，替代磷酸緩沖鹽體系，指標成分保留時間比較恰當。在此條件下血竭素高氯酸鹽的理論塔板數大于13000，分離度、拖尾因子均符合藥典要求。

4.2檢測波長的選擇：取血竭素高氯酸鹽對照品溶液用DAD檢測器進行檢測，結果最大吸收波長為471nm。選擇在471nm處測定含量最為理想，峰形較好，干擾較少。

4.3由于本品為膏劑，在甲醇中超聲無法分散，導致血竭素提取不完全，故參考相關文獻加入硅藻土研磨分散。用量以研磨均勻后易成松散粉為宜，經試驗膏劑與硅藻土用量為2∶3。

4.4文獻表明酸化有利于血竭素的轉化，經實驗確定本制劑在3%磷酸甲醇中酸化12h以上，血竭素含量達到最高水平。

［1］國家藥典委員會.中國藥典［S］.第一部，中國醫藥科技出版社，2015：142.

［2］國家藥典委員會.中國藥典［S］.第一部，中國醫藥科技出版社，2015：57.

［3］謝艷，馬克昌，謝文.酸化對血竭中血竭素含量測定的影響［J］.中草藥，2000，31（4）：265.

Study on the Quality Control Method of Xiaoyan Zhitong Ointment

Xu Hui Liu Jun Dai Pengcheng Li Hongbing（The 291st Hospital of PLA，Baotou，Inner Mongolia 014040，China）

Objective：To establish an effective quality control method of Xiaoyan Zhitong Ointment.Methods：Thin-Layer Chromatography （TLC）was used to identify Daemonorops draco and Borneol；then the content of Dracorhodin in Daemonorops draco was determined by High Performance Liquid Chromatography.Results：The TLC method is simple with strong specificity and good repeatability；and content can be determined accurately.The average recoveries of Dracorhodin was 98.07%（RSD=1.53%，n=6）.Dracorhodin shows good linear relationship within the scope of 0.1～0.6μg.Conclusions：The method can effectively control the quality of Xiaoyan ZhitongOintment.

Xiaoyan Zhitong OintmentTCL HPLC

R286

A

1672-8351（2016）08-0009-02