老年腦出血患者血清基質金屬蛋白酶-9、細胞纖維連接蛋白水平及其與病情程度的相關性

董　娜　張雪青　穆　恩

(天津市環湖醫院電生理科，天津　300060)

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老年腦出血患者血清基質金屬蛋白酶-9、細胞纖維連接蛋白水平及其與病情程度的相關性

董娜張雪青穆恩1

(天津市環湖醫院電生理科，天津300060)

〔摘要〕目的觀察老年腦出血患者血清基質金屬蛋白酶(MMP)-9和細胞纖維連接蛋白(cFN)水平的變化及其與病情程度的關系。方法觀察60例老年腦出血患者和60例健康老年人(對照組)血清MMP-9和cFN水平，比較不同出血量和出血部位的腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的差異，分析腦出血患者血清MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和美國國立衛生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分的相關性。結果腦出血組血清MMP-9和cFN水平均明顯高于對照組(P<0.05)；大量出血組血清MMP-9、cFN水平高于中量出血組，中量出血組高于少量出血組(P<0.05)；腦室出血組血清MMP-9、cFN水平高于腦葉出血組，而腦葉出血組上述指標高于基底節出血組(P<0.05)；腦出血組MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和NIHSS評分顯著正相關(P<0.05)。結論血清 MMP-9及cFN 水平可間接反映腦出血患者腦組織損傷的嚴重程度，早期對其含量測定可輔助 CT 判斷病情。

〔關鍵詞〕腦出血；基質金屬蛋白酶-9；細胞纖維連接蛋白

腦出血占所有腦卒中的 10%～20%，是目前循證醫學證實有效治療手段較少的腦卒中之一〔1〕，腦出血的發生與腦血管的彈性下降及長期的慢性血管內皮損傷導致的動脈粥樣硬化有關，病死率及致殘率可達30%以上〔2〕。腦出血發生后可通過刺激周圍神經組織及血管促進生物活性物質的浸潤，加重組織損傷。基質金屬蛋白酶(MMP)-9是MMPs 的一種，MMP-9可以水解神經細胞間質成分中膠原纖維，參與炎癥細胞的損傷作用。細胞纖維連接蛋白(cFN)由動脈管壁的血管內皮細胞和成纖維細胞分泌，與心腦血管疾病有關，cFN的升高可以損傷血管內皮，進而參與腦出血導致的神經細胞損傷〔3〕。本研究探討老年腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的變化及其與腦出血量、水腫程度及出血部分的關系。

1資料與方法

1.1一般資料2014年3月至2015年6月我院老年腦出血患者60例，納入標準：①年齡≥65歲；②高血壓性腦出血者；③符合腦出血診斷標準。排除標準：①合并血管畸形或腦外傷者；②合并心臟、肝臟和腎功能不全者。男34例，女26例；年齡65～80歲，平均(72.45±6.21)歲。對照組60例為體檢健康老年人，男30例；女30例，年齡65～79歲，平均(72.37±5.87)歲。兩組年齡、性別無明顯差異，具有可比性。

1.2酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清MMP-9和cFN水平采取靜脈血，經1 500 r/min離心5 min后得到血清，4℃保存待測，以標準品稀釋液將標準品復溶，靜置15 min后混勻，倍比稀釋為7個濃度，取出板條，除了空白對照孔外每個孔加入不同濃度的標準品，劑量為100 μl/孔，采用封板蓋封住，室溫反應120 min，使用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次，室溫孵育1 h，PBS洗滌3次，加入底物(50 μl/孔)，避光孵育25 min，加入終止液5 min后測定450 nm處吸光度。人cFN ELISA 試劑盒購自美國 Cusabio 公司，MMP-9檢測試劑盒購自南京凱基生物科技有限公司。

1.3評價指標觀察血清MMP-9和cFN水平，比較不同出血量和出血部位的腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的差異，分析腦出血患者血清MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和美國國立衛生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分的相關性。

1.4統計學方法采用SPSS11.5統計軟件進行t檢驗或χ2檢驗，Pearson相關分析。

2結果

2.1兩組血清MMP-9、cFN水平比較腦出血組血清MMP-9和cFN水平均高于對照組(P<0.001)。見表1。

2.2不同腦出血量患者的MMP-9、cFN水平的比較大量出血組血清MMP-9、cFN水平高于中量出血組，中量出血組高于少量出血組(P<0.05)。見表1。

表1　兩組及各亞組血清MMP-9、cFN水平的比較

2.3不同出血部位的腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的比較腦室出血組血清MMP-9、cFN水平高于腦葉出血組，而腦葉出血組上述指標高于基底節出血組(P<0.05)。見表1。

2.4腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的相關性腦出血患者的MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和NIHSS評分顯著正相關(P<0.05)。見表2。

表2　腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的相關分析

3討論

腦出血與高血脂、糖尿病、高血壓、血管老化、吸煙等密切相關。腦出血患者往往由于情緒激動、費勁用力時突然發病，早期死亡率很高，同時30%～35%腦出血患者存在不同程度的運動障礙、認知障礙、言語吞咽障礙等后遺癥〔4〕。影響腦出血患者預后的因素中，除了腦出血導致的血腫本身外，腦出血周邊神經組織水腫、血管炎癥性刺激等原因導致的生物活性物質釋放，可以進一步促進腦血管的水腫、腦組織的損傷。cFN參與血管內皮損傷及血小板性血栓的形成，在腦缺血導致的周圍神經損傷中發揮了重要作用〔5,6〕；在缺血缺氧狀態下及血清炎癥因子白細胞介素(IL)-6、IL-10、腫瘤壞死因子(TNF)-α的刺激下，血管內皮細胞、成熟的纖維細胞、Ⅱ型膠質細胞等可合成 MMP-9，貯存在中性粒細胞和 T 細胞中的 MMP-9在腦缺血急性期大量釋放，促進腦血管水腫及神經元細胞的不可逆性損傷，導致面癱、言語障礙及精細運動功能障礙〔7,8〕。

Wang等〔9,10〕探討了基底節區腦出血導致的腦卒中患者的臨床資料，發現患者血清 cFN 的含量與 CT所示出血量間具有相關性 ，同時cFN與病情轉歸中腦出血的吸收具有顯著的相關性。腦水腫是腦出血的繼發性病理改變，腦水腫程度與患者的病死率及恢復期并發癥的發生具有重要的評估價值〔11〕，本次研究提示 cFN及MMP-9可以作為判斷腦出血患 者病情嚴重程度的臨床指標之一。

NIHSS通過評估感覺功能、瞳孔反應、意識障礙、運動系統受累等，進而評估腦血管疾病患者的神經功能，NIHSS評分越高，腦出血患者的預后越差〔12〕，本次研究表明MMP-9、cFN血清的升高，往往提示神經系統功能的損傷較為嚴重，二者是評估腦出血患者預后的重要臨床指標。本研究首次探討了不同部位腦出血患者血清MMP-9、cFN的差異，發現腦室出血患者的血清相關指標最高，而基底節出血患者表達最低，考慮豆紋動脈外側支破裂或者丘腦膝狀體動脈和丘腦穿通動脈破裂所致的腦出血，對于周圍腦組織的刺激較輕，MMP-9、cFN的分泌不足，另一方面，MMP-9、cFN的上述改變可以為協助診斷不同部位的腦出血提供參考，但其協助診斷的一致性仍需要隨機對照、獨立樣本的進一步探討。

4參考文獻

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11范敬爭,李冠武,田亞楠,等.MR磁量圖對自發性腦出血患者腦鐵過量沉積的定量研究〔J〕.磁共振成像,2013;4(2):99-103.

12王曉萍,趙燊,林慶明,等.亞低溫對大鼠腦出血后腦水腫及缺氧誘導因子-1α,血管內皮生長因子表達的影響〔J〕.中華急診醫學雜志,2013;22(5):496-500.

〔2014-12-19修回〕

(編輯苑云杰)

通訊作者：穆恩(1976-)，男，副主任醫師，博士，主要從事危重癥急救研究。

〔中圖分類號〕R743.9

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)13-3178-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.13.039

1天津醫院外科ICU

第一作者：董娜(1976-)，女，主治醫師，碩士，主要從事神經電生理研究。