調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠生物學相關指標的影響

何如平　葉健烽　張曉明　簡政威　黃志超　李大強　劉　楊

(東莞市人民醫院心血管內科，廣東　東莞　523000)

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調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠生物學相關指標的影響

何如平葉健烽張曉明簡政威黃志超李大強劉楊1

(東莞市人民醫院心血管內科，廣東東莞523000)

〔摘要〕目的研究調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠生物學相關指標的影響。方法選擇15周齡經屬性證候分類，篩選出肝火亢盛證高血壓大鼠72只，隨機分為對照組與觀察組。觀察組大鼠給予調肝降壓顆粒，對照組大鼠給予去離子水，作為對照組本次研究對兩組大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況、用藥過程中的癥狀、用藥過程中內皮素(ET)、一氧化氮(NO)、心房鈉尿肽(ANP)變化以及用藥過程中腎素活性(PRA)、血漿降鈣素基因相關肽(GGRP)、血管緊張素(Ang)Ⅱ變化進行觀察分析。結果治療后，觀察組和對照組血壓、心率以及體重相比差異顯著(P<0.05)。治療后，觀察組小鼠的易激惹程度明顯下降，痛閾以及眼球突出度同治療前比差異顯著(P<0.05)，同對照組相比差異顯著(P<0.05)；治療前兩組大鼠的ET 、NO、ANP值均無統計學差異(P>0.05)，具有可比性；治療后，觀察組ET值以及ANP明顯下降，NO值明顯升高，治療前后差異顯著(P<0.05)，觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)；觀察組治療前后PRA、AngⅡ均有下降(P<0.05)，GGRP值有一定的下降，但是治療前后無顯著差異(P>0.05)；同對照組相比差異具有統計學意義(P<0.05)。觀察組治療前后PRA、AngⅡ均有下降(P<0.05)，GGRP值有一定的下降，但是治療前后無統計學意義(P>0.05)；同對照組相比差異顯著(P<0.05)。 結論調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠的生物學相關指標都有顯著改善。

〔關鍵詞〕調肝降壓顆粒；高血壓肝火亢盛證

醫學研究發現高血壓肝火亢盛證是大鼠在14～18周齡的集中表現〔1〕。本研究擬分析調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠生物學相關指標的影響。

1材料與方法

1.1實驗動物選擇15周齡經屬性證候分類，篩選出高血壓肝火亢盛證雌性大鼠72只，體重155～220 g，平均(190±12)g。隨機分為對照組與觀察組。將兩組大鼠樣本連續喂養7 d后進行每組的血壓測量、行為學實驗和宏觀表征采集等前期調整型訓練后，按照臨床證候標準采取對動物實施宏觀表征等效轉化，并判別證候屬性，收縮壓情況，易激怒狀態，宏觀彼表征的評判，篩選出肝火亢盛證的大鼠。兩組大鼠年齡、體重類型等方面無統計學差異具有可比性(P>0.05)。

1.2藥品與儀器調肝降壓顆粒主要由柴胡、香附、佛手、夏枯草、梔子、黃芩、丹皮、菊花、雙鉤藤組成，本次實驗用藥是由山東中醫藥大學附屬醫院制劑室包裝無糖免煎顆粒；其中實驗儀器及藥劑有SoftronBP-98A 型動脈測壓儀，JD-01GSZ型平衡旋轉儀。大鼠血清內皮素(ET)、一氧化氮(NO)、心房鈉尿肽(ANP)等酶聯免疫吸附實驗藥劑盒以及動物行為實時記錄并分析的系統。

1.3用藥方法觀察組大鼠給予調肝降壓顆粒，對照組大鼠給予去離子水。觀察組大鼠在15周齡開始服用藥物，一次9 g/kg(用藥量換算成成人劑量的16倍，相當于按公斤算是的轉換方法)，1次/d，連續服藥6 w。對照組給予相同體積的去離子水，通過灌胃胃藥，作為空白對照。

1.4大鼠各項體征指標的測量

1.4.1大鼠血壓、心率及體重的測量采用SoftronBP-98A 型動脈測壓儀檢測大鼠安靜狀態下的血壓。測前連接好儀器，開啟熱泵控制溫度36～37℃，固定大鼠，預熱10 min后，按照儀器說明書嚴格操作，測量大鼠尾牙，測量3次，并做好記錄。

1.4.2大鼠易激惹程度的評分1分：握持頸部處時驚跳、尖叫；2分：握持頸部處時欲咬人或咬人；3分：提攜尾部處時馬上驚跳、尖叫，欲咬人，甚至與同籠其他大鼠打斗頻繁；0分：無上述狀況者。

1.4.3大鼠宏觀表現采集記錄大鼠常見狀態包括精神情況、活動量和痛閾以及眼球突出度等一般狀態。

1.4.4血清制備與提取及分析檢測用藥過程中ET、NO、ANP變化以及用藥過程中腎素活性(PRA)、血漿降鈣素基因相關肽(GGRP)、血管緊張素(Ang)Ⅱ變化進行觀察分析。

1.5統計學分析采用SPSS18.0軟件進行t檢驗。

2結果

2.1兩組大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況比較治療前兩組小鼠的血壓、心率以及體重無統計學意義(P>0.05)；但觀察組治療6 w后，血壓下降明顯；心率顯著(P<0.05)；體重也略微下降，但是與治療前相比無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組血壓、心率以及體重相比差異顯著(P<0.05)，見表1。

2.2兩組大鼠用藥過程中的癥狀比較治療前兩組的易激惹程度、痛閾以及眼球突出度均無統計學差異(P>0.05)，治療后，觀察組小鼠的易激惹程度明顯下降，痛閾以及眼球突出度同治療前比差異顯著(P<0.05)，同對照組相比差異顯著(P<0.05)，見表2。

2.3兩組大鼠用藥過程中ET 、NO、ANP變化比較治療前兩組大鼠的ET 、NO、ANP值均無統計學差異(P>0.05)；治療后，觀察組ET值以及ANP明顯下降，NO值明顯升高(P<0.05)，觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)，見表3。

2.4兩組大鼠用藥過程中PRA 、GGRP、AngⅡ變化比較用藥前兩組大鼠各項指標均無明顯差異(P>0.05)；觀察組治療后PRA、AngⅡ均有顯著的下降(P<0.05)，GGRP值有輕微的下降，但無統計學意義(P>0.05)；觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)，見表4。

表1　兩組的大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況比較±s,n=36)

與治療前比較:1)P<0.05；下表同

表2　兩組大鼠用藥過程中的癥狀比較±s,n=36)

表3　兩組大鼠用藥過程中ET 、NO、ANP變化比較

表4　兩組大鼠用藥過程中PRA 、GGRP、AngⅡ變化比較

3討論

高血壓肝火亢盛證在臨床上有各種表現，主要為在外部刺激下，患者會出現反復、持續時間較長的神經緊張、煩躁不安、焦慮等情緒上的變化〔2〕，內部表現為肝郁氣滯證以及患者的交感神經活動會增強，進而舒縮血管中樞傳出收縮血管的沖動占優勢，各種表現導致患者的小動脈收縮〔3～5〕，小動脈與血管阻力直接相關，小動脈收縮會使得周圍血管阻力上升，進而患者血壓上升〔6～9〕，隨著病情的推移血壓會繼續上升，最后發展為高血壓肝火亢盛證〔10〕。ET是一種21肽的血管活性物質，該物質由內皮細胞分泌，是到目前為止發現的活性最為強大的內源性的血管收縮劑，ET與靶細胞膜上的受體結合后，激活鳥苷酸環化酶和Ca2+通道，引起Ca2+內流,升高胞質內Ca2+濃度，從而使血管收縮痙攣，外圍阻力增加，引起血壓升高。所以ET是一種高效的、長期致高血壓劑，其作用機制主要就是ET直接收縮血管，進而增加了血管外周阻力，同時與其他的血管活性物質之間相互作用，從而使血壓持續上升。ANP是一種多肽類激素〔11〕，是由心房肌細胞合成、存儲且分泌的具有排鈉利尿、對抗升壓激素的作用。本研究說明調肝降壓顆粒有很好的降壓作用，可以明顯地抑制高血壓的增長趨勢，同時調肝降壓顆粒在降低血壓的同時能過對大鼠的體重的下降有一定的緩解作用。本研究另外調肝降壓顆粒在降血壓的同時對患者出現的各類病癥有很大的改善，充分體現了中藥的整體調整作用。調肝降壓顆粒對高血壓肝火亢盛證大鼠的生物學相關指標都有顯著改善，提高大鼠的生存質量，為臨床實踐及中醫研究的提供可靠保障。

4參考文獻

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〔2015-10-22修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

基金項目：東莞市科技計劃醫療衛生類科研項目(No.201110515001085)

〔中圖分類號〕R541.4

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)13-3133-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.13.017

1山東中醫藥大學附屬醫院心內科

第一作者：何如平(1981-)，男，碩士，主治醫師，主要從事冠心病臨床研究。