正交試驗優化氯霉素包合工藝的實驗研究

鐘　貞　李　穎

1.麗珠集團麗珠制藥廠，廣東　珠海　519020；2.珠海天鴻潤生物工程有限公司，廣東　珠海　519020

?

正交試驗優化氯霉素包合工藝的實驗研究

鐘貞1李穎2*

1.麗珠集團麗珠制藥廠，廣東珠海519020；2.珠海天鴻潤生物工程有限公司，廣東珠海519020

【摘要】目的：研究復方爐甘石氯霉素包合的制備工藝，以提高氯霉素洗劑的穩定性。方法：采用飽和水溶液法制備氯霉素包合物，通過正交試驗，以包封率為考察指標，篩選最佳工藝條件。結果：氯霉素-γ-環糊精包合物的最佳制備工藝條件為：氯霉素與γ-CD的質量比為1∶2，包合溫度為40℃，包合時間為2h，γ-CD與水的用量比例為1∶30(g/ml)。用該工藝獲得的氯霉素包合物進行制備復方爐甘石氯霉素洗劑，在6個月后檢測結果與生產時進行對比，氯霉素含量較為穩定。結論：γ-環糊精包合氯霉素制備的復方爐甘石氯霉素洗劑工藝穩定，重現性良好，為工業化生產復方爐甘石氯霉素洗劑提供實驗依據。

【關鍵詞】復方爐甘石氯霉素；工藝改進；正交實驗

復方爐甘石氯霉素洗劑是皮膚科常用藥物，具有收斂、止癢、殺菌、消炎的功效，臨床對滲出性皮炎、感染性濕疹、膿皰瘡及痱子等有較好療效[1-2]。復方爐甘石氯霉素洗劑包括爐甘石、氯霉素、氧化鋅、薄荷等主要成分，但氯霉素在水溶液中穩定性差，容易降解，其發生水解的同時，也易發生氧化還原反應，降解產物主要有二氯乙酸、1-(4-硝基苯)- 2-二羥基乙酰胺基-1,3-丙二醇、1-(4-硝基苯)- 2-氨基-1,3-丙二醇、對硝基苯甲醛、4,4′氮雜苯甲酸等多種過敏原[3-4]，該類物質是引起過敏反應的主要原因。為降低復方爐甘石氯霉素洗劑中過敏物質的生成，提高復方制劑的穩定性和質量，本文將對該制劑工藝進行改進研究。

1儀器與材料

1.1儀器1260型液相色譜儀(日本島津)；DZKW-4電熱恒溫水浴鍋(北京中興偉業儀器有限公司)；SHZ-D循環水式真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)；6020AB真空干燥箱(北京中興偉業儀器有限公司)；BS110S電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)；XTZ-05T體視顯微鏡(上海光學儀器六廠)。

1.2材料氯霉素對照品(批號：130303-200614)、氯霉素二醇物對照品(批號：100712-201303)、對硝基苯甲醛對照品(批號：130562-200501)均由中國藥品生物制品檢定所提供；γ-環糊精(γ-CD，批號：20150607，西安天正藥用輔料有限公司)；無水乙醇(批號：20150806，成都市科龍化工試劑廠)；聚維酮-PVP(批號：20150607，西安天正藥用輔料有限公司)；正己烷(批號：20141201，成都市科龍化工試劑廠)；鹽酸(批號：20141125，成都市科龍化工試劑廠)。

2方法與結果

2.1氯霉素含量測定

2.1.1色譜條件色譜柱：C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相：甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45)；進樣量：20μl；檢測波長：272nm；流速：1.0ml/min。

2.1.2標準曲線的繪制精密稱取對照品0.02g，置100ml容量瓶中，用甲醇溶解并用30%甲醇稀釋至刻度，精密吸取對照品溶液1、2、4、6ml及對照貯備液10ml于10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，照標準方法進樣，以對照品濃度為橫坐標(C)，峰面積為縱坐標(A)進行線性回歸，回歸方程為A=9.127×103C+0.0987(R2=0.9998)，表明氯霉素濃度在15～28μg范圍內線性關系良好。

2.1.3包合物中氯霉素含量測定精密稱定20mg氯霉素包合物，置于50ml干燥的容量瓶中，用30%甲醇溶解并稀釋至50ml，搖勻，60℃水浴5min，過濾，取續濾液5ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；根據所做標準曲線，按外標法以峰面積計算氯霉素含量。按下式進行計算氯霉素包封率：氯霉素包封率(%)=包合物中氯霉素含量/氯霉素投藥量×100%。

2.2氯霉素環糊精包合工藝優選

2.2.1包合物制備采用飽和水溶液法制備氯霉素-γ-環糊精包合物。精密稱取0.3g氯霉素干燥粉末，加30ml甲醇使其完全溶解，備用。按不同投藥比例精密稱取γ-環糊精干燥粉末，根據輔料與水的比例用60℃的溫水使γ-環糊精完全溶解，冷卻待用。將氯霉素溶液緩緩加入到γ-環糊精的水溶液中，使用磁力攪拌器制備包合物。完全包合后在4℃的環境中放置48h，洗滌抽濾，60℃干燥4h，得黃色疏松包合物，分別測定氯霉素-γ-環糊精包合物的得率。

2.2.2正交實驗根據前期預實驗和相關文獻研究[5]，制備工藝主要影響因素有：氯霉素與γ-CD的質量比例(A)、包合溫度(B)、包合時間(C)、γ-CD 與用水量的質量比(D)進行L9(34)正交實驗，各因素水平見表1。正交實驗結果采用公式藥物包封率，結果見表2和表3。

表1　氯霉素包合物制備工藝正交實驗因素和水平

表2　正交試驗藥物包封率

表3　氯霉素包合物制備工藝優化方差分析

注:F0. 05(2, 2)=19.00，F0.01(2,2)=99.00。

通過綜合分析評比結果表明，影響氯霉素藥物包封率的因素依次為A>C>D>B，主要影響因素為氯霉素與γ-CD的用量比例(A)、包合時間(C)。綜合分析得率的首要影響因素以及包封率的首要影響因素，得到最佳工藝條件為A1B2C2D2，即氯霉素與γ-CD的質量比為1∶2，包合溫度為40℃，包合時間為2h，γ-CD與水的用量比例為1∶30(g/ml)。

2.3最優條件的驗證以最佳制備工藝制備6份氯霉素包合物，按最佳包合工藝為A1B2C2D2，進行驗證性試驗，包封率如表4所示。此時包封率為78.30%，RSD為1.20%。表明該制備工藝穩定可靠，重現性良好。

表4　驗證性試驗

2.4復方爐甘石氯霉素的制備取甘油加水適量，加入爐甘石、氧化鋅細粉，邊加邊攪拌成糊狀，備用，取氯霉素包合物，加水溶解(原氯霉素用吐溫-80及適量乙醇溶解)，薄荷腦用乙醇溶解，分別緩緩加入到備用液中，然后攪拌加水使成1000ml。按上述設計，配制氯霉素包合后的氯霉素爐甘石洗劑，取三批試制品，在溫度(40±2)℃，相對濕度75%±5%的條件下保存。在6個月內，每隔1個月取樣一次，按穩定性重點考察項目檢測并進行氯霉素含量測定，檢測結果與生產時進行對比，結果表明復方爐甘石氯霉素在加速試驗條件下密封保存各項指標變化不明顯。

3討論

復方爐甘石氯霉素屬于混懸劑類型，容易沉淀分層，且氯霉素對光、pH值及熱敏感的增強均會引起其分解反應[6]。在炎熱的夏季特別不利于運輸和保存，局部溫度或短時間強烈光照均導致氯霉素含量的降低、增加過敏原，導致臨床應用中產生不良反應，影響藥物治療效果。γ-環糊精具有比β-環糊精更大內容體積，可包裹更多的藥物分子，應用范圍廣，尤其適用于大分子類抗生素藥物。此外，γ-環糊精具有極強水溶性，常溫下γ-環糊精溶解度為25.6g/100ml，而β-環糊精溶解度為1.88g/100ml[7]。隨著γ-環糊精應用范圍的擴大、生產成本的降低，市場價格也在下降，更多的藥物將應用γ-環糊精進行包合[8]。氯霉素與γ-環糊精包合后，對其包合物進行全波長掃描發現其最大吸收未變，仍在277nm附近，包合并未出現性質的改變，然而其溶解性增強，與爐甘石混懸沉淀時間變長。采用包合后的氯霉素制備復方爐甘石氯霉素洗劑，由于氯霉素包合在疏水γ-環糊精空腔內，化學性質穩定，對光、溫度及pH值的變化敏感性降低，其分解速度降低，在試用中不良反應減少，擴大了藥物的適用范圍。對于化學性質不穩定溶解性差的制劑，可以在上述工藝制備的包合物基礎上，再進一步制備成具有良好溶解特性的制劑，為臨床用藥中達到更好的療效提供了實驗依據。

參考文獻

[1]楊慧,邵陽,陳昌云.復方爐甘石洗劑中氧化鋅含量測定方法探索[J].南京曉莊學院學報,2012,5(3):59-62.[2]聶秀霞,曾文雪,莫國棟,等.紫外-可見分光光度法測定氯霉素爐甘石洗劑中氧化鋅的含量[J].江西中醫藥大學學報,2015,26(31):70-72.

[3]李云霞,戴衛紅,王文習.氯霉素滴耳液的穩定性考察[J].解放軍藥學學報,2011,27(5):468-470.

[4]謝芳,哈益明,王鋒,等.γ射線輻照水溶液中氯霉素的降解研究[J].輻射研究與輻射工藝學報,2008,26(3):151-155.

[5]馬素英,張疆莉,尚校軍,等.小檗堿β-環糊精包合物研究[J].中國新藥與臨床雜志,2010,29(10):754-758．

[6]倪曉霞,王慶芬,劉曉玲.復方氯霉素醇溶液中兩組分含量測定及有關物質檢查[J].中國藥師,2014,17(11):1879-1881．

[7]張揚,周裔彬,曹勝男,等.β-和γ-環糊精與丁酸乙酯包合物的制備及結構表征[J].食品與發酵工業,2014,40(9):34-38.

[8]陳迪釗,朱士龍,李勇,等.青藤堿-γ-環糊精包合物的性質及譜學分析[J].食品科學,2013,34(3):115-118.

作者簡介：鐘貞，碩士，主管藥師，主要從事藥物制劑的研究。

通信作者：李穎，工程師，主要從事藥物制劑的研究。

【中圖分類號】R283.6

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)12-0022-02

(收稿日期：2016.04.14)

Study on Improvement of the Lotion of Compound of calamine and chloramphenicol

ZHONG Zhen1LI Ying2*

1. Livzon(Group) PharmaceuticalFactory,Zhuhai 519020，China；2.Zhuhai Tian Hong run Biological Engineering Co.Ltd.,Zhuhai 519020，China

Abstract:Objective To study the Improvement process of the lotion of compound of calamine chloramphenicol. Methods Using a saturated aqueous solution inclusion complex of chloramphenicol prepared by orthogonal experiment to evaluate the preparation of entrapment was screened optimum conditions. Results Chloramphenicol was preferably after γ-cyclodextrin optimum preparation conditions cyclodextrin inclusion complexes as follows: the mass ratio of chloramphenicol and γ-CD was 1∶2, the inclusion temperature was 40℃, inclusion time was 2h , γ-CD and the ratio of the amount of water is 1∶30(g/ml). During the six-month test, the test results were compared with October, Compound calamine chloramphenicol under accelerated test conditions sealed the indicators did not change significantly.Conclusion Compound calamine lotion chloramphenicol process γ-cyclodextrin inclusion chloramphenicol prepared stable, reproducibility, and provide a theoretical basis for the industrial production of compound chloramphenicol calamine lotion.

Key words:Compound calamine chloramphenicol; Improvement process; Orthogonal experiment