圍手術期輸血對膀胱癌患者免疫功能的影響

王維維 熊亞南 于丹軍 劉波周 明璐 林翠 張穎

圍手術期輸血對膀胱癌患者免疫功能的影響

王維維 熊亞南 于丹軍 劉波周 明璐 林翠 張穎

目的通過對圍術期膀胱癌患者輸血前后T淋巴細胞群及NK細胞活性的變化的觀察，探討輸血對膀胱癌患者免疫功能的影響。方法隨機選擇70例膀胱癌手術病例，分成輸血組(BT)47例與非輸血組(NBT)23例，分別采集手術前1周之內，以及術后第1天、第3天、第7天的外周靜脈血，用流式細胞儀測定T淋巴細胞亞群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK細胞活性，并計算CD4＋/CD8＋比值，分析其變化規律。結果BT組與NBT組術前各項指標相比較無顯著性差異(P＞0.05)；術后第1天，BT組和NBT組各項指標相比較于術前均有顯著性差異(P＜0.05)，但BT組與NBT組各項指標相比較無顯著性差異(P＞0.05)；術后第3天、第7天，BT組各項指標相比較于術前有顯著性差異(P＜0.05)；NBT組各項指標相比較于術前無顯著性差異(P＞0.05)；BT組各項指標與NBT組相比較均有顯著性差異(P＜0.05)。結論輸血對膀胱癌患者的細胞免疫功能有較強的抑制作用。

輸血；膀胱癌；T細胞亞群；NK細胞；圍手術期

1 材料與方法

1.1 一般資料收集2015-01—11秦皇島市第一醫院和唐山市工人醫院膀胱癌患者70例，其中男性48例，女性22例；年齡為40～69歲。上述患者均經病理確診。根據術前3 d到術后10 d內有無輸血史分為兩組。其中輸血組(BT組)男性為30例，女性為17例。未輸血組(NBT組)男性18例，女性5例。輸血組圍手術期輸血量(2～4)單位，均為庫存懸浮紅細胞。術前3個月內無輸血史，術前及圍手術期內未進行放療、化療及免疫治療。

1.2 檢測方法分別采集手術前1周之內，以及術后第1天、3天、7天的外周靜脈血2～3 mL。以流式細胞儀測定T淋巴細胞亞群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK細胞，并計算CD4＋/CD8＋比值。

2 結果

圍術期T活性細胞亞群與NK細胞活性的變化百分比(表1～2)。結果顯示：①BT組術后第1天與術前各項指標相比較，CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均顯著性減少(P＜0.05)，但CD8＋T細胞無顯著性差異(P＞0.05)；BT組術后第3天、第7天與術后第1天相比較，CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均無顯著變化(P＞0.05)，但與術前相比較，均有顯著性減少(P＜0.05)。②NBT組術后第1天與術前各項指標相比較，CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均顯著性減少(P＜0.05)，但CD8＋T細胞無顯著性差異(P＞0.05)；NBT組術后第3天、第7天與術后第1天相比較，CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均有顯著變化(P＜0.05)，但各項指標與術前相比較，均無顯著性差異(P＞0.05)，基本恢復至術前水平。③BT組與NBT組相比較：術前的CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD8＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均無顯著差異(P＞0.05)，CD8＋T細胞無顯著性差異(P＞0.05)；術后第1天，BT組與NBT組的CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均無顯著差異(P＞0.05)，但明顯低于術前水平，CD8＋T細胞無顯著性差異(P＞0.05)；術后第3天、第7天，BT組CD3＋T細胞、CD4＋T細胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細胞均明顯低于NBT組(P＜0.05)，CD8＋T細胞無顯著性差異(P＞0.05)。

表1 圍手術期CD3+、CD4+、CD8+T細胞及CD4+/CD8+比值的變化百分比(±s)

表1 圍手術期CD3+、CD4+、CD8+T細胞及CD4+/CD8+比值的變化百分比(±s)

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表2 圍術期NK細胞活性的變化百分比(±s)

表2 圍術期NK細胞活性的變化百分比(±s)

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3 討論

2010年全球腫瘤學統計資料顯示，隨著環境污染的加重和生活水平的不斷提高，腫瘤發病率正逐步上升[1]。惡性腫瘤就是人們所說的癌癥，它是100多種相關疾病的統稱。當身體內細胞發生突變后，它會不斷地分裂，不受身體控制，最后形成癌癥。膀胱癌是泌尿系統最常見的惡性腫瘤，發病率居泌尿系統惡性腫瘤的首位。輸血是指從靜脈輸入血液，是臨床上一項重要的搶救和治療措施。輸血的治療作用除了用以補給血量，維持血容量，提高血壓以抗休克和防止出血性休克的措施外，還可供給具有帶氧能力的紅細胞以糾正因紅細胞減少或其帶氧能力降低所導致的急性缺氧癥；補充各種凝血因子以糾正某些患者血液凝固障礙。但輸血不僅可以傳播傳染病、引起嚴重的輸血反應，甚至可以引起輸血相關移植物抗宿主病和輸血相關的免疫抑制(TRIM)[2]。TRIM的機制尚不是很清楚，可能的機制包括非特異性免疫抑制、封閉性抗體、血漿抑制因子、克隆缺失、抗獨特型抗體、抑制淋巴細胞、抑制NK細胞的活性、供受者微嵌合體白細胞的形成[3]。但它的發生主要與輸注同種異體白細胞或白細胞產物有關，其中包括通過細胞因子網絡調節使受者機體免疫反應趨向Ⅱ型免疫應答[4]。

T細胞在細胞免疫中發揮著重要的作用[5]。其中，CD3＋代表細胞免疫的總體水平；CD4＋輔助其他細胞參與免疫應答；CD8＋抑制其他免疫細胞的功能。CD4＋/CD8＋比值也是重要的免疫指標，比值顯著降低說明機體免疫調節功能低下，常被作為癌癥預后不良的標志。NK細胞也是重要的免疫細胞，它對T細胞、B細胞、骨髓干細胞等均有調節作用，并通過釋放淋巴因子對機體免疫功能進行調節。NK細胞能直接或分泌細胞毒因子而殺傷腫瘤細胞。它的活性降低，代表著腫瘤發展和發生遠處轉移[6]。手術對機體也會產生免疫抑制[7]。本實驗研究也驗證了此說法。結果顯示膀胱癌患者術后第1天和第3天時，CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細胞均較術前顯著性減少，CD8＋顯著性增加(P＜0.05)。

對于膀胱癌患者，無論是術前患者血尿導致的嚴重貧血，還是術中患者出血，輸血都是治療膀胱癌患者的一種有效的輔助手段。但輸血與腫瘤的復發有關。輸血可以增加腫瘤復發率是1981年Gantt提出的。到目前為止，不少文獻報道了如食管癌、肺癌、胃癌等患者圍手術期輸血可能使患者機體免疫功能低下、增加了癌癥復發率[8-11]。同時通過實驗也觀察到了輸血可導致癌癥患者手術后感染率增高。Silliman對直腸癌患者進行觀察與研究，得出結論輸血增加術后感染率[12]。Blajchman總結了最近幾年前瞻性的研究結果發現，腫瘤患者圍手術期輸血，術后細菌感染率明顯增加[13]。本實驗的結果顯示：術前的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細胞無顯著性變化。CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細胞在術后第1天均明顯下降，達到最低點。提示術后機體免疫狀況下降。在術后第3天左右，NBT組逐漸恢復，然而BT組持續處于較低水平，恢復緩慢，兩組間進行比對，差異有統計學意義(P＜0.05)。CD8＋在膀胱癌BT組術后水平高，與NBT組術后3 d比較差異有統計學意義(P＜0.05)。提示圍手術期輸血患者較非輸血患者機體免疫功能有明顯下降。

為了減少輸血后腫瘤的復發與感染，我們采取以下措施[14]。第一應避免不必要的輸血，提高臨床輸血水平，避免不必要的血液輸注是保證血液輸注安全的一項重要措施[15]。第二應該用去除白細胞的血液或血液制品。劉杰等人[16]對100例惡性腫瘤化療患者分別輸注全血和成分血液(去除白細胞)，然后對輸血前后T細胞亞群、NK細胞活性、紅細胞C3b受體花環率等細胞免疫功能進行檢測。得出結論對惡性腫瘤患者輸去除白細胞的血液能提高機體的細胞免疫功能。還有很多實驗也證明了應使用白細胞過濾器去除血液中的白細胞，可以減少腫瘤的復發和術后感染[17-18]。第三應該盡量做到自體輸血。王世端等人[19]選擇了直腸癌、結腸癌和胃癌患者30例，將其隨機分成兩組，一組輸全血，另一組是術中自體血回輸給患者。用流式細胞儀測定T細胞亞群和NK細胞的數量。然后進行分析，得出結論圍術期輸異體血抑制患者免疫功能，自體輸血免疫抑制輕微，且術后免疫功能很快恢復。

4 結論

本實驗研究證明輸血對圍手術期膀胱癌患者免疫功能具有抑制作用，且免疫抑制作用在短期內不易清除，可能促進膀胱癌患者的復發、增加術后感染和降低術后遠期生存率。所以在對膀胱癌患者進行治療和手術時，能不輸血就盡量不要輸血，在不得不輸血的情況下，盡量輸去除白細胞的血液。在醫療設備齊全及條件允許的情況下，最好自體輸血。我們要做到合理科學的輸注血液。

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ObjectiveTo study the influence of perioperative blood transfusion on immunologic function of bladder cancer sufferers through the observation on the changes of T lymphocyte mass and NK cell activity before and after blood transfusion.Methods70 cases of bladder cancer surgery were selected randomly and divided into blood transfusion group(BT)of 47 cases and non-blood transfusion group(NBT)of 23 cases.Peripheral venous blood of the samples was obtained one week before the surgery，and on the 1st，3rd and 7th day after surgery.CD3＋，CD4＋，CD8＋of T lymphocyte subsets and the cell activities of NK were tested by flow cytometry(FCM)，and the ratio of CD4＋/CD8＋was calculated，then the change regularities were analyzed.ResultsThere was no significant difference in the indicators between BT group and NBT group before surgery(P＞0.05)；the indicators in both BT group and NBT group showed clear changes on the 1st day after surgery compared with those before surgery(P＜0.05)，but the difference in indicators between BT group and NBT group was not obvious(P＞0.05)；the indicators of BT group on the 3rd and 7th day after surgery had significant differences compared with the preoperative results(P＜0.05)，while the indicators of NBT group changed little compared with the preoperative results(P＞0.05).The indicators between BT group and NBT group showed significant differences(P＜0.05).ConclusionPerioperative blood transfusion shows strong inhibitory effect on immunologic function of bladder cancer sufferers.

Blood transfusion；Bladder cancer；T cell subset；NK cell；Perioperative period

2016-02-26)

1005-619X(2016)06-0628-03

10.13517/j.cnki.ccm.2016.06.029

063000華北理工大學基礎學院(王維維，熊亞南)；

066000秦皇島市第一醫院(于丹軍，劉波，周明璐，林翠)；

110000遼寧中醫藥大學杏林學院(張穎)

熊亞南