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先天性白內障大鼠的血壓與體溫基礎數據分析

2016-07-29 01:17:50田小蕓尤金煒惲時鋒
中國比較醫學雜志 2016年1期

田小蕓,尤金煒,董 敏,方 天,劉 捷,惲時鋒

(南京軍區南京總醫院比較醫學科,南京 210002)

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先天性白內障大鼠的血壓與體溫基礎數據分析

田小蕓,尤金煒,董敏,方天,劉捷,惲時鋒

(南京軍區南京總醫院比較醫學科,南京210002)

【摘要】目的為了完善先天性白內障大鼠的背景資料,對該大鼠的血壓與體重及體溫進行了測定,并進行相關性分析。方法分別取三個體重段的正常瞼裂白內障大鼠、小眼白內障大鼠和正常對照SD大鼠各30只,雌雄各半,用多道生理信號采集系統進行實驗。結果三個體重段雌雄大鼠的血壓間無統計學意義(P>0.05),但隨著體重的增加,血壓與體重之間逐漸形成相關關系;同品系雄性大鼠標準體重與老齡大鼠血壓間有統計學意義(P<0.01)。各體重段雌雄大鼠體溫有統計學意義(P<0.01),且雄性體溫均低于雌性。結論白內障大鼠的血壓、體重和體溫的變化符合大鼠的生理特性,為今后該鼠的使用提供理論基礎。

【關鍵詞】先天性白內障;大鼠;血壓;體溫;相關分析

隨著生命科學的發展,實驗動物的質量也越來越受到人們的重視,動物質量的好壞直接影響實驗結果,良好的實驗結果應該具有可比性、可重復性;除了疾病的預防與控制外,實驗動物正常的生理數據是反映該動物健康狀況的重要生理指標。正常瞼裂白內障大鼠是2007年由我科屏障環境SD 繁殖大鼠離乳仔鼠中發現,后將正常瞼裂白內障大鼠按封閉群進行繁殖傳代,后代中有正常瞼裂白內障大鼠,小眼白內障大鼠和無白內障大鼠三種表型,將小眼白內障大鼠按近交系進行繁殖傳代,后代中前5代均為小眼白內障,第6代開始出現分化,第7代出現1只長牙大鼠,后代中有小眼白內障大鼠(表現雙眼和單眼白內障大鼠二種表型),也有小眼無白內障大鼠,留下雙小眼白內障大鼠進行繁殖傳代,后代中還是小眼(雙、單眼)白內障和小眼無白內障大鼠二種表型,且小眼白內障的比例越來越少,經過多種方式不斷選育及回交,現小眼白內障已近交傳至23代,后代均為小眼白內障大鼠,為了完善該品系大鼠的背景資料,我們取不同體重和性別的大鼠進行了血壓和體溫的測定,報導如下:

1材料和方法

1.1實驗動物

清潔級瞼裂白內障大鼠、小眼白內障大鼠和SD大鼠各30只,周齡為7~8周、10~11周和1年,體重為199.2~217.8 g、253.9~270.1 g、387.1~600.9 g,雌雄各半,由南京軍區南京總醫院比較醫學科自繁【SCXK(軍)2012-0014】,實驗在南京軍區南京總醫院比較醫學科的動物實驗環境中進行【SYXK(軍)2012-0047】。并按使用的3R原則給予人道的關懷。

1.2飼養管理及環境

實驗大鼠均飼養在屏障環境中,室內的溫、濕度均由中央空調控制,溫度為20℃~26℃,相對濕度為50%~70%,光照明暗交替12 h/d,大鼠所食飼料為60Co輻射飼料,營養成份為粗蛋白21.8%,粗脂肪為4.0%,粗灰份為7.8%,粗纖維3.0%,水份10.1%,鈣1.7%,磷1.08%。另每周加喂一次葵花籽。飲水為消毒的酸化水,使用的墊料、盒子等一切用具均進行131℃ 5 min高壓預真空滅菌。

1.3方法

分別取體重為199.2~217.8 g、253.9~270.1 g、387.1~600.9 g的大鼠各30只,雌雄各半進行分組實驗,血壓、體溫的測定用成都儀器廠生產的多道生理信號采集處理系統進行測定。

1.4統計學方法

2結果

2.1不同體重大鼠的血壓及與體重相關性比較

表1 標準體重大鼠的血壓與體溫表

注:1-正常瞼裂白內障雄性;2-正常瞼裂白內障雌性;3-小眼白內障雄性;4-小眼白內障雌性;5-正常對照SD雄性;6-正常對照SD雌性;*:雌雄間的差異顯著性,*P< 0.05,**P<0.01;△:同性別間的差異顯著性,△P<0.05。

Note:1-cataract male rat with normal fissura palpebrae;2- cataract female rat with normal fissura palpebrae;3- microphthalmos cataracts male rat;4- microphthalmos cataracts female rat; 5-normal male rat;6- normal female rat;*:compare male with female,*P<0.05,**P<0.01;△:compare with the same sex,△P<0.05.

經統計分析表1,各組間血壓無差異(P>0.05),經體重與血壓的相關性分析r=0.131,P=0.172,表示此時體重與血壓間不存在相關性。正常瞼裂白內障大鼠和正常對照SD大鼠雌雄間直腸溫度差異有統計學意義(P<0.01),小眼白內障大鼠雌雄間差異無統計學意義;小眼白內障大鼠與正常瞼裂白內障大鼠和正常大鼠雌性間直腸溫度間有統計學意義(P<0.05)。

經統計分析表2,各組間血壓無統計學意義(P>0.05),經體重與血壓的相關性分析r=0.246,P=0.03,表示此時體重與血壓間存在一定的相關性。此階段大鼠的直腸溫度雌雄間差異有統計學意義(P<0.01),小眼白內障大鼠與正常瞼裂白內障大鼠和正常對照SD大鼠同性別間直腸溫度差異有統計學意義(P<0.01)。

表2 體重在260 g左右時大鼠的血壓與體溫表

注:1-正常瞼裂白內障雄性;2-正常瞼裂白內障雌性;3-小眼白內障雄性;4-小眼白內障雌性;5-正常對照SD雄性;6-正常對照SD雌性;*:雌雄間的差異顯著性,**P<0.01,△:同性別間的差異顯著性,△△P<0.01。

Note:1-cataract male rat with normal fissura palpebrae;2-cataract female rat with normal fissura palpebrae;3-microphthalmos cataracts male rat;4-microphthalmos cataracts female rat;5-normal male rat,6-normal female rat;*:compare male with female,**P<0.01;△:compare with the same sex,△△P<0.01.

表3 老年大鼠的血壓與體溫表

注:1-正常瞼裂白內障雄性;2-正常瞼裂白內障雌性;3-小眼白內障雄性;4-小眼白內障雌性;5-正常對照SD雄性;6-正常對照SD雌性;*:雌雄間的差異顯著性,*P< 0.05,**P<0.01;△:同性別間的差異顯著性,△P<0.05。

Note:1-cataract male rat with normal fissura palpebrae;2- cataract female rat with normal fissura palpebrae;3- microphthalmos cataracts male rat;4- microphthalmos cataracts female rat; 5-normal male rat;6- normal female rat;*:compare male with female,*P<0.05,**P<0.01;△:compare with the same sex,△P<0.05.

經統計分析,表3白內障和小眼白內障組間血壓無統計學意義(P>0.05),正常對照組雄雌間有統計學意義(P<0.05),經體重與血壓的相關性分析r=0.246,P=0.007,表示此時體重與血壓間存在相關關系。各組大鼠雌雄間直腸溫度差異有統計學意義(P<0.01),正常瞼裂白內障大鼠與小眼白內障大鼠雄性間差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2血壓隨體重的變化

隨著體重的增加,同一品系雄性大鼠的血壓變化見圖1。

注:a:正常瞼裂白內障大鼠;b:小眼白內障大鼠;c:正常大鼠。圖1 同一品系雄性大鼠血壓隨體重的變化Note: a: cataract rat of normalfissura palpebrae;b: microphthalmos cataracts rat;c: normal rat.Fig.1 The change of blood pressure with the different body weight in same strain male rats

經統計分析,三個體重段雄性大鼠隨著體重增加,血壓間有差異,正常瞼裂白內障大鼠的1體重血壓與2、3體重血壓間差異有統計學意義(P<0.01);小眼白內障大鼠2與1、3體重血壓間差異有統計學意義(P<0.05),1與3體重血壓間差異有統計學意義(P<0.01);正常對照SD大鼠3與1,2體重血壓間差異有統計學意義(P<0.01);三個品系的雌鼠隨著體重的增加血壓間差異無統計學意義(P>0.05)。

2.3應用多道生理信號采集系統測量血壓時的圖截屏

注:A:血壓線;B:脈搏線;C:體溫線。圖2 大鼠血壓和體溫采集圖Note:A: line of blood pressure;B: line of sphygmus;C: line of body temperature.Fig.2 Picture of the blood pressure and body temperature in rats

圖2最底下的線是體溫線,中間的是脈搏,當大鼠在暗袋中平靜時,脈搏顯示均勻,此時加壓,脈搏阻斷,然后緩慢放氣,脈搏逐漸恢復,如圖2,重復3次,取均值。

3討論

實驗動物種類繁多,雖然各實驗動物彼此間有一定的相似性,但它們畢竟在解剖和生理上存在著差異,各有特點。動物實驗必須具有可重復性或再現性,研究人員才能依據結果做出正確的估計與評價。所以,在選擇實驗動物時要盡量選用符合實驗要求的標準化實驗動物。自發性疾病動物模型的最大優點是:疾病的發生、發展與人類對應的疾病很相似,即疾病均是在自然條件下發生,因而這類模型應用價值較高,但這類模型來源相對困難。白內障大鼠是我科室進行多年培育的一個新品系,實驗動物要求來源清楚,背景明確;大鼠的血壓和體溫的測定對完善該品系大鼠的背景資料具有重要的意義。

在2007年屏障離乳SD 仔鼠中發現5只先天性白內障大鼠,后培育傳代,為了將白內障大鼠培育成為一個新品系,我們對各生理指標作了相應的檢測與分析,已經做了大鼠的繁殖試驗、生長測定、血液血指標、臟器重量及系數和白內障晶狀體的病理學研究[1-5],還有下頜骨測定,毛色基因及生化標記基因位點、皮膚移植和突變基因等的檢測。

本實驗中的大鼠血壓與體重在標準范圍內無相關性,但隨著體重的增加,血壓與體重存在一定的相關關系。對于人類的研究也顯示肥胖或超重者患高血壓的風險是正常人群的2~6倍,隨著年齡的增長和體重的增加,血壓呈上升趨勢[6-7]。血壓是指血管內的血液對于單位面積血管的測壓力。正常大鼠的血壓范圍是收縮壓82.35~119.925 mmHg,舒張壓59.925~89.925 mmHg,該實驗鼠不同體重段的收縮壓均在正常范圍內。我們采用的是成都儀器廠制造的多道生理儀,有一個不銹鋼的實驗平臺,在測大鼠尾壓時先要打開恒溫浴槽,將水溫調至38.5℃,溫水由水管流經實驗平臺,這樣不會因外界溫度的變化對大鼠產生應急干擾,大鼠裝入黑色袖套放在實驗平臺上,待大鼠安靜后進行加壓測血壓,從而獲得尾動脈壓。表中的脈搏數是指在測大鼠血壓時,隨著血壓球的放氣,脈搏逐漸恢復至加壓前,我們取剛恢復時的脈搏測定血壓時的值就是表中的脈搏數。

在測大鼠血壓的同時也測了直腸溫度。恒溫動物能維持機體體溫的恒定,具有體溫調節功能;溫度對實驗動物的影響表現在生殖、泌乳、機體抵抗力、生長、形態、新陳代謝和實驗反應性等方面。各組大鼠雌雄間的直腸溫度間有差異顯著性,并且是雄性大鼠的體溫稍低于雌性大鼠,這也附合雄雌性的生理特點。以前測大鼠體溫有用水銀溫度計直接測肛門溫度,容易挫傷腸壁或折斷體溫計[8],或是在麻醉狀態下有創手術中進行血壓測定,麻醉和有創自身就會干擾動物的血壓[9],我們是采用無創無麻醉且在大鼠安靜狀態下進行,避免了各種干擾,確保動物的各生理指標采集的準確性。

參考文獻:

[1]田小蕓,董敏,尤金煒,等.先天性白內障大鼠培育初報[J].實驗動物與比較醫學,2013,33(5):358-360.

[2]田小蕓,尤金煒,董敏,等. 先天性白內障大鼠的繁殖性能及其生長發育[J].中國比較醫學雜志,2013, 23(12):10-12.

[3]田小蕓,趙志剛,許龍祥,等.先天性白內障大鼠主要臟器重量與臟器系數[J].實驗動物與比較醫學,2014,34(5):1-3.

[4]田小蕓,尤金煒,董敏,等.先天性白內障大鼠血液生化及血液流變學分析[J].中國比較醫學雜志,2014, 24(3):20-24.

[5]田小蕓,吳波,章如松,等.先天性白內障大鼠的病理學研究[J].醫學研究生學報,2015,28(8)820-823.

[6]邵也常,鄧木蘭,劉小清,等.成年人體重10年變化與血壓關系的探討[J].高血壓雜志,2003,11(5):476-478.

[7]李琛,謝江柳,張紅霞,等.體重指數與血壓關系的研究[J].中國實用醫藥,2011,5(6):63-64.

[8]宋根偉,歐陽露,張曉燕,等.一種用體溫計快速測量大鼠體溫的方法[J].山西醫藥雜志,2013,42(1):37.

[9]高俊濤,田晶,劉志洋,等.中暑模型大鼠急性生理改變研究[J].吉林醫藥學院學報,2011,32(4):187-189.

〔修回日期〕2015-12-25

[基金項目]南京總醫院基金(2011001)。

[作者簡介]田小蕓(1965-),女,碩士,副主任技師,研究方向:實驗動物疾病模型。 [通訊作者]惲時鋒(1965-),男,獸醫學博士,主任技師,研究方向:實驗動物管理。

【中圖分類號】R-332

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 01-0054-04

doi:10.3969.j.issn.1671.7856. 2016.001.010

Correlation analysis on the blood pressure and body temperature of congenital cataract rat

TIAN Xiao-yun, YOU Jin-wei,DONG-Min,FANG-Tian, Liu Jie, YUN Shi-feng

(Department of Comparative Medicine, Nanjing General Hospital of Nanjing Military Region, PLA,Nanjing 210002,China)

【Abstract】ObjectiveTo optimize the background of the congenital cataract in rats, the blood pressure, body temperature and weight of rats were measured and correlation analysis. MethodsWe took three kinds of rats(cataracts rat,microphthalmos cataracts rat and normal rat)as subjects, each kind with half males and females was divided into three groups by weight, each of which contains 30 rats. We used the Multi-channel physiological signal acquisition system for test. ResultsBlood pressure has no significant difference among the three segments of male and female rats(P >0.05). With the increase of body weight,blood pressure and body weight formed a relevant relationship gradually.In the same male strain,there was significant difference between the standard weight(207 g) and the aging weight(494 g)(P < 0.01). In the same body weight range, the temperature difference between male and female rats was significant(P < 0.01),and the male’s temperature was lower than the female. ConclusionsThe changes in blood pressure,body weight and temperature of cataract rats conformed to the physiological characteristics of rats,which provide a theoretical basis for the use of catatacts rats in the future

【Key words】Congenital cataract; Rat; Blood pressure; Body temperature; Correlation analysis

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