HPV 陽性患者行宮頸活檢及免疫組化P16 蛋白檢測的臨床意義分析

李紫燕

（常州市腫瘤醫院 病理科，江蘇 常州 213000）

0 引言

宮頸癌屬于臨床常見的惡性腫瘤之一，對女性生命健康造成嚴重威脅。宮頸癌和癌前病變與高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染關系密切[1]。早期檢測高危型HPV，對篩查宮頸癌和癌前病灶意義重大。另有研究指出，HPV 持續性感染會造成P16 蛋白過度表達[2]。本研究選擇2018 年1 月至2019 年3 月在我院經第二代雜交捕獲法（HC2）、薄層液基細胞學技術（TCT）聯合檢測確診的135 例HPV 陽性患者，旨在分析HPV 陽性患者行宮頸活檢及免疫組化P16 蛋白檢測的臨床意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年1 月至2019 年3 月在我院行常規子宮頸活檢的135 例高危型HPV 陽性患者為研究對象，均經HC2、TCT 聯合檢測確診；其中年齡20-78 歲，平均（45.31±2.25）歲。免疫組化及病理切片均由兩位高年資醫師聯合診斷。入組患者均簽署知情同意書。本研究經醫學倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1 宮頸細胞學

使用TCT 實施宮頸細胞學檢查，用TBS 分類法診斷。分為未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細胞（ASU）、無宮頸上皮內病變（NILM）、高度鱗狀上皮病變（HSIL）、低度鱗狀上皮細胞病變（LSIL）。

1.2.2 高危型HPV 檢測

使用專用細胞采集器采集標本，HC2 法定量檢測HPV68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18 型等13 種HPV-DNA 含量。使用美國Digene公司HC2 基因雜交捕獲儀與HPV DNA 高危型檢測試劑盒。結果判斷：HPV-DNA＜1.0 pg/mL 為陰性，反之為陽性。

1.2.3 免疫組織化學

使用Max Vision 法對P16 蛋白檢測。經4 %甲醛溶液固定標本，常規石蠟包埋，4 μm 切片備用。嚴格按照試劑盒說明書進行染色操作。試劑盒與抗體均購自福州邁新生物技術有限公司。P16 表達定位于細胞質或細胞核，≥90%的上皮細胞彌漫表達為（+++），10-90 %的上皮細胞表達為（++），經副基底層、基底層有少量散在細胞P16 陽性為（+），鱗狀上皮無表達（-）。

1.3 統計學分析

應用SPSS 21.0 統計軟件對數據分析，計數資料以n（%）表示，卡方（χ2）檢驗，計量資料用(±s)表示，t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸細胞學與宮頸活檢

宮頸細胞學：135 例患者經檢測HSIL 27 例，LSIL 46 例，ASU 19 例，NILM 43 例。宮頸活檢：高級別上皮病變者33 例，低級別上皮病變者59 例，炎癥/萎縮43 例。TCT 檢查NILM 中經病理活檢有5例為陽性，漏診率為11.63%，見表1。

表1 宮頸細胞學與宮頸活檢對比

2.2 P16 蛋白表達

高級別上皮病變中P16 蛋白層彌漫陽性，低級別上皮病變中大部分患者P16 呈局灶性陽性，陽性細胞占據鱗狀上皮的下1/3；炎癥/萎縮中多無P16 蛋白表達。P16 蛋白在高級別上皮病變、低級別上皮病變、炎癥/萎縮陽性表達率分別為100.00 %（33/33）、83.05 %（49/59）、34.88 %（15/43），差異有統計學意義（χ2=45.653，P=0.000），見表2，圖1-3。

表2 P16 蛋白在宮頸活檢中的表達

圖1

圖2

圖3 高級別上皮病變P16 蛋白表達（HE×100）

3 討論

女性生殖系統HPV 感染極為常見，感染后8-10個月多數患者癥狀可自行消除，僅有5 %-10 % 患者存在持續感染，并發展為宮頸癌高危人群[3-4]。HPV 是宮頸癌的重要病因，而高危型HPV 感染是宮頸癌發生的必要條件。我國宮頸癌的普查率相對較低，尚無成熟的篩查模式。早期發現高危型HPV感染，盡早實施正確有效的干預措施治療，預防宮頸癌的發生。

高危型HPV 檢測與宮頸細胞學檢查是臨床用于宮頸病變篩查的常用手段，可有效確定高風險人群，提高診斷準確率，但細胞學檢查結果易受到檢測醫生的主觀影響，重復性欠佳。本研究中，TCT 檢查NILM 中經病理活檢有5 例為陽性，漏診率為11.63 %，提示針對TCT 和HPV 陽性者，應及時實施宮頸活檢檢查確診，降低漏診率。p16 基因位于人類染色體9P21，屬于抑癌基因，對有絲分裂具有負反饋調節作用。在正常組織和HR-HPV 陰性的宮頸癌中無p16 陽性表達，但p16 陽性表達在宮頸癌前病變和HR-HPV 陽性的宮頸癌中較高[5]。相關研究顯示[6]，多種腫瘤的發生、進展與P16 蛋白異常甲基化密切相關。P16 蛋白于宮頸組織中強陽性表達，提示宿主細胞中的HPV進行整合。P16 蛋白與HR-HPV 聯合檢測，可有效分流TCT 中ASUS 患者。本研究結果顯示，P16 蛋白在高級別上皮病變、低級別上皮病變、炎癥/萎縮陽性表達率分別為100.00 %、83.05 %、34.88 %，隨著病變級別的進展P16 蛋白表達逐漸升高。高級別上皮病變、低級別上皮病變、炎癥/萎縮中P16 蛋白分別呈彌漫陽性、局灶性陽性、無表達，提示檢測P16 蛋白表達情況，利于臨床鑒別炎癥/萎縮、宮頸上皮病變。

綜上所述，對HC2 篩查高危型HPV 陽性患者應及時實施病理活檢聯合免疫組化P16 蛋白檢測，降低誤診或漏診率，利于臨床早期實施干預措施，改善患者預后。