中國對蝦與日本對蝦對白斑綜合征病毒耐受力的比較

蓋春蕾，葉海斌，許 拉，王曉璐，于曉清

(山東省海洋生物研究院，山東省海水養殖病害防治重點實驗室，山東青島 266002)

?

中國對蝦與日本對蝦對白斑綜合征病毒耐受力的比較

蓋春蕾，葉海斌，許 拉，王曉璐，于曉清

(山東省海洋生物研究院，山東省海水養殖病害防治重點實驗室，山東青島 266002)

摘要[目的]比較中國對蝦與日本對蝦對白斑綜合征病毒的耐受力，為WSSV的病害防治提供參考。[方法]在鹽度30‰和(24±2)℃下，將體長約8～9 cm的中國對蝦(Fenneropenaeus chinensi)與日本對蝦(Marsupenaeus japonicus)停食48 h后，投喂感染白斑綜合征病毒(WSSV)的死亡對蝦，觀察其攝食及感染情況，比較這2種蝦的對WSSV耐受力。[結果]中國對蝦的平均死亡率為63.33%，發病高峰期為4～5 d，而日本對蝦的平均死亡率為54.44%，發病高峰期為5～7 d，中國對蝦的發病率于日本對蝦，發病時間也較日本對蝦早。[結論]中國對蝦對WSSV的耐受能力要強于日本對蝦。

關鍵詞中國對蝦；日本對蝦；WSSV；耐受能力

白斑綜合征(WSD)是危害對蝦健康養殖的主要病癥[1-2]。近幾年，山東省內對蝦白斑綜合征病毒(Whitespotsyndromevirus，WSSV)監測表明WSD總體樣品陽性率超過20%，對對蝦養殖具有重大風險。中國對蝦(Fenneropenaeus chinensis)和日本對蝦(Marsupenaeus japonicus)為主要養殖種類，但日本對蝦WSSV的檢出率低于中國對蝦，成功養殖率也高于中國對蝦。研究表明，對蝦的死亡時間因不同種類、感染方式和感染劑量而異[3-4]。孫成波等[5]研究發現凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)和斑節對蝦(Penaeus monodonFabricius)在人工感染條件下其病毒復制時間及抵抗力存在差異。筆者比較了中國對蝦和日本對蝦對WSSV的耐受力，探討日本對蝦較中國對蝦低WSSV攜帶率及發病率的原因，以期為WSSV的病害防治提供參考。

1材料與方法

1.1材料健康中國對蝦和日本對蝦取自昌邑示范基地未發病蝦池，體長約8～9cm。試驗前隨機抽取2種對蝦各10尾，采用二步PCR法檢測WSSV，檢測結果均為陰性，在水族箱暫養7d，2種對蝦保持養殖環境一致，每天投喂2次配合飼料或鮮活餌料，每天換水1次。

1.2方法 試驗用海水為經厚沙層過濾的天然海水，鹽度為30‰，溫度(24±2)℃。試驗用水泥池長1.0m、寬0.5m、高0.5m，試驗前用20g/m3的漂白精消毒處理。養殖期間每天吸污2次，換水1次，換水量30%左右。

1.2.1感染死亡對蝦的制備。取實驗室自制感染WSSV的死亡對蝦，投喂前采用熒光實時定量PCR儀分析對蝦肌肉中的WSSV，選出2尾對蝦WSSV含量為109拷貝/g的對蝦，以備投喂。

1.2.2中國對蝦對WSSV的耐受力測定。每個水泥池飼養120尾健康中國對蝦，停食48h后，每個水泥投入1尾感染WSSV死亡的中國對蝦，觀察中國對蝦的攝食情況，及時撈出頭胸甲出現白斑WSSV發病癥狀的中國對蝦，記錄撈出的每尾蝦的發病時間，直至感染WSSV的中國對蝦被吃完。同時，設置1個空白對照，飼養120尾健康的中國對蝦，不投喂感染的對蝦。

1.2.3日本對蝦對WSSV的耐受力測定。每個水泥池飼養120尾健康日本對蝦，停食48h后，每個水泥池投入1尾感染WSSV死亡的日本對蝦，觀察日本對蝦的攝食情況，及時撈出頭胸甲出現白斑WSSV發病癥狀的日本對蝦，記錄撈出的每尾蝦的發病時間，直至感染WSSV的日本對蝦被吃完。同時，設置1個空白對照，飼養120尾健康日本對蝦，不投喂感染的對蝦。

1.3數據統計比較中國對蝦與日本對蝦對投喂病蝦后感染發病數量和發病時間，分析二者對WSSV耐受力的差異。

2結果與分析

2.1投喂病蝦后中國對蝦感染死亡數量及死亡率由表1可知，投喂1尾死蝦后，試驗組76尾中國對蝦出現感染癥狀，經檢測均攜帶WSSV，感染率為63.33%。中國對蝦感染發病高峰期集中于第4～5天，日發病數量約35尾/d。對照組死亡4尾對蝦，通過分子生物學檢測未檢測到WSSV，可排除因為病毒感染致死的可能。

表1　中國對蝦組投喂死蝦每天的死蝦數量

2.2投喂病蝦后日本對蝦死亡數量及死亡率由表2可知，投喂1尾死蝦后，試驗組65尾日本對蝦均出現白斑感染癥狀，經檢測均帶有WSSV，感染率為54.44%。日本對蝦感染發病高峰期集中于5～7d，日發病數量約20～30尾/d，其感染時間較中國對蝦要晚，感染數量要低于中國對蝦。對照組日本對蝦未出現死亡狀況。

表2　日本對蝦組投喂死蝦每天的死蝦數量

3結論與討論

該試驗投喂1尾死亡對蝦后，中國對蝦的平均死亡率為63.33%，發病高峰期在4～5d，而日本對蝦的平均死亡率為54.44%，發病高峰期在5～7d，中國對蝦的發病率高于日本對蝦，發病時間也比日本對蝦早，其原因可能有以下方面：①攝食時間差異。中國對蝦具有連續攝食的特點，日本對蝦白天潛伏在池底很少活動，日落后攝食[6]，因此同時投喂死蝦后其攝食死蝦的時間不同，被感染時間也不同。②種間形態差異。中國對蝦甲殼較薄，死蝦容易被攝食，而日本對蝦甲殼厚，死蝦不易被攝食，病毒傳播較慢。不同種類的對蝦感染病毒后的存活時間存在差異[7]。李素紅等[8]研究也表明即使同一種屬不同家系之間的中國對蝦，對WSSV的敏感性也存在較大差異。中國對蝦和日本對蝦屬于不同種，對WSSV抗性不一，因而耐受時間不一。③餌料差異。對蝦體內存在眾多的抗病因子(如各種水解酶、溶解酶、抗菌肽等)，具有相當的抗病能力，餌料不同會造成抗病因子也存在差異[9]。中國對蝦對蛋白需求(40%)較日本對蝦(60%)要低。Pascual等[10]報道當對蝦攝食蛋白含量40%的飼料時，一些免疫指標(血淋巴細胞總數、基礎和激活的呼吸爆發)顯著高于攝食蛋白含量為5%和15%的飼料。劉棟輝等[11]報道當飼料蛋白含量為20%時，凡納濱對蝦的血淋巴指標(如細胞總數、酚氧化敏活性、血藍蛋白和血淋巴蛋白)均顯著較低。這些非特異免疫指標的高低可反映蝦的免疫狀況，影響對蝦對病毒的抵抗力。飼養日本對蝦以投喂藍蛤等動物性餌料為主，蛋白質含量高，而飼養中國對蝦多投喂配合飼料，蛋白質含量較低，因此餌料的差異可能是導致中國對蝦和日本對蝦對WSSV耐受力不同的重要因素。

參考文獻

[1] 何建國，翁少萍，鄧敏，等.斑節對蝦白斑病病原與病理[J].中山大學學報論叢(自然科學版)，1996(S1)：12-15.

[2] 何建國，莫福.對蝦白斑綜合癥病毒爆發流行與傳播途徑、氣候和水體理化因子的關系及其控制措施[J].中國水產，1999(7)：34-41.

[3] 江世貴，何建國，呂玲，等.白斑綜合癥病毒對斑節對蝦親蝦的感染及垂直傳播的初步研究[J].中山大學學報(自然科學版)，2000，39(S1)：164-171.

[4] 江世貴，何建國，馬之明，等.白斑綜合癥病毒對斑節對蝦幼體和仔蝦的致病性[J].中山大學學報(自然科學版)，2000，39(S1)：172-176.

[5] 孫成波，何建國，黎子蘭，等.凡納濱對蝦和斑節對蝦對WSSV敏感性的比較[J].湛江海洋大學學報，2006，26(3)：17-20.

[6] 陳宗堯，王克行.實用對蝦養殖技術[M].北京：農業出版社，1987：11-13.

[7] 張天時，李素紅，孔杰，等.中國對蝦自然感染與人工感染WSSV抗病力的比較[J].海洋與湖沼，2010，41(5)：763.

[8] 李素紅，張天時，孟憲紅，等.中國對蝦雜交優勢對自然感染白斑綜合征病毒的抗病力分析[J].水產學報，2007，31(1)：69-71.

[9]SODERHALLK.Invertebrateimmunity[J].DevCompImmunol，1999，23(4/5)：413-421.

[10]PASCUALC，ZENTENOBE，CUZONCG，etal.Litopenaeus vannameijuvenilesenergeticbalanceandimmunologicalresponsetodietaryprotein[J].Aquaculture，2004，236：431-450.

[11] 劉棟輝，何建國，劉永堅，等.極低鹽度下飼料蛋白質量分數對凡納濱對蝦生長表現和免疫狀況的影響[J].中山大學學報(自然科學版)，2005，44(S1)：217-222.

基金項目國家蝦產業技術體系項目(CARS-47)。

作者簡介蓋春蕾(1982- )，男，山東青島人，助理研究員，碩士，從事病害防控方面的研究。

收稿日期2016-04-08

中圖分類號S 945.4

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2016)13-171-02

ComparisonofToleranceAbilityofFenneropenaeus chinensisandMarsupenaeus japonicasagainstWhiteSpotSyndromeVirus(WSSV)

GAIChun-lei,YEHai-bin,XULaetal

(KeyLaboratoryofMarineAquacultureDiseasePreventionandControlinShandongProvince,ShandongInstituteofMarineBiology,Qingdao,Shandong266002)

Abstract[Objective] The aim was to compare tolerance ability of Fenneropenaeus chinensis and Marsupenaeus japonicas against WSSV, and provide reference for prevention and control of WSSV. [Method] Under salinity 30‰ and (24±2)℃, body length about 8-9 cm Fenneropenaeus chinensis and Marsupenaeus japonicas were used as study object, after indigestion for 48 h, feeding dead prawn infected WSSV, the tolerance ability against WSSV was compared. [Result] The average mortality of Fenneropenaeus chinensis was 63.33%, peak incidence was 4-5 d, the average mortality of Marsupenaeus japonicas was 54.44%, peak incidence was 5-7 d. The mortality of Fenneropenaeus chinensis was higher than that of Marsupenaeus japonicas, the disease appearance time was also earlier than Marsupenaeus japonicas. [Conclusion] The tolerance ability of Fenneropenaeus chinensis against WSSV is stronger than that of Marsupenaeus japonicas.

Key wordsFenneropenaeus chinensis; Marsupenaeus japonicas; WSSV; Tolerance ability