可見植入熒光標記和微金屬線碼標記標志拉薩裂腹魚的研究

朱挺兵， 顏文斌， 楊德國

(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護重點實驗室，湖北武漢 430223)

?

可見植入熒光標記和微金屬線碼標記標志拉薩裂腹魚的研究

朱挺兵， 顏文斌， 楊德國*

(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護重點實驗室，湖北武漢 430223)

摘要[目的]研究不同標記方法對拉薩裂腹魚的標記效果，為其增殖放流與效果評估提供技術(shù)支撐。[方法]分別采用可見植入熒光標記(VIE)、微金屬線碼標記(CWT)和空白對照處理對拉薩裂腹魚幼魚(5～7 cm)進行為期40 d的標志試驗,研究不同標記方法對拉薩裂腹魚的標記效果。[結(jié)果]VIE組試驗魚的存活率明顯高于CWT組和對照組。VIE組和CWT組試驗魚的標志保持率分別為100%和98%。VIE和CWT標記對試驗魚生長均沒有顯著影響。[結(jié)論] VIE標記是拉薩裂腹魚幼魚較適宜的短期標志方式。

關鍵詞拉薩裂腹魚；可見植入熒光標記；微金屬線碼標記；魚類標志

AbstractSchizothoraxwaltoniRegan; Visible implant fluorescent tag; Micro metal coded wire tag; Fish marking

拉薩裂腹魚(SchizothoraxwaltoniRegan) 隸屬鯉形目鯉科裂腹魚亞科裂腹魚屬，又名拉薩弓魚、貝氏裂腹魚，主要分布于西藏雅魯藏布江中游干支流，是當?shù)靥赜恤~類和主要經(jīng)濟魚類之一。拉薩裂腹魚主要以底棲無脊椎動物為食，兼食著生藻類，漁獲物個體一般在500 g/尾以上[1]。近年來，隨著雅魯藏布江流域經(jīng)濟和社會的快速發(fā)展，拉薩裂腹魚正面臨著棲息地破壞、過度捕撈、外來物種入侵等問題，導致其自然資源量明顯下降，嚴重威脅著拉薩裂腹魚的生存與物種延續(xù)。為保護這一物種，一些科研單位已經(jīng)開展了拉薩裂腹魚的人工增殖與放流研究，但目前還沒有開展比較系統(tǒng)的放流效果評估工作。可見熒光植入標記(Visible implant elastomer tag，VIE)和微金屬線碼標記(Coded wire tag，CWT)是2種最常見的魚類標記方法，被廣泛應用于魚類增殖放流活動的效果評估。筆者研究了VIE標記和CWT標記對拉薩裂腹魚的標志效果，旨在為拉薩裂腹魚增殖放流的效果評估提供技術(shù)儲備。

1材料與方法

1.1試驗魚試驗魚為2014年2月人工孵化的拉薩裂腹魚，2014年9月從四川律貝生物科技有限公司購得。試驗魚暫養(yǎng)于中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所武漢研究中心封閉循環(huán)水控溫養(yǎng)殖系統(tǒng)，暫養(yǎng)所用的圓形水缸直徑80 cm，水體積300 L，水溫保持在(15±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上。試驗魚暫養(yǎng)期間使用商業(yè)配合飼料(升索牌，型號S4)進行投喂。

1.2試驗方法共設置3個處理組，分別為可見植入熒光標記(VIE)組、微金屬線碼標記(CWT)組和對照組。試驗所用標記設備均由美國西太平洋公司(NMT)生產(chǎn)。

從試驗魚中挑選規(guī)格較為統(tǒng)一(5～7 cm)的個體進行試驗，每個處理組100尾試驗魚。試驗時，先用0.3 mg/L的MS-222將試驗魚麻醉，然后測量全長和體重，再迅速進行標志操作。使用CWT標記時，利用標記槍將CWT標記(長1.10 mm、直徑0.25 mm)注入試驗魚背部肌肉，標志后用檢測棒(V-Detector; NMT)進行檢測，以確保標志成功。使用VIE標記時，使用0.3 mL注射器將橙色熒光絡合物注入試驗魚的頭部皮層，并肉眼檢查顏色標志是否完好。標志操作均由同一個人完成。為排除由于操作人員經(jīng)驗不足而造成的影響，標記的前30尾試驗魚不用于正式試驗。標志完成后，將試驗魚放入封閉循環(huán)水控溫養(yǎng)殖系統(tǒng)的水缸中，每個處理組2個缸，每缸放入50尾試驗魚，2個平行。對照組試驗魚不進行標志，但其他處理均按照與標記組相同的要求進行試驗。試驗期間水溫控制在(15.0±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上，光照周期12L:12D。試驗魚每天飽食投喂2次，所用飼料為商業(yè)配合飼料。分別于試驗開始后的第7天和第40天，對試驗魚生長、存活和標志保持率進行檢測。

2結(jié)果與分析

2.1存活率與標志保持率由表1可知，試驗結(jié)束時，VIE標記組試驗魚的存活率為45%，明顯高于CWT標記組(9%)和對照組(19%)，說明VIE標記對試驗魚存活的影響要小于CWT標記。對照組試驗魚存活率較低的原因是由于試驗1個月后對照組試驗魚突發(fā)小瓜蟲病，至試驗結(jié)束時病情已經(jīng)得到控制。VIE標記組和CWT標記組試驗魚的標記保持率都在98%以上，說明2種標記方法對拉薩裂腹魚的短期標志保持率都較高。

表1不同標志方式下拉薩裂腹魚幼魚的存活率與標志保持率比較

Table 1Comparison of survival rate and marker retention rate ofS.younghusbandijuveniles under different marking ways

試驗時間Testtimed存活率Survivalrate∥%VIE組VIEgroupCWT組CWTgroup對照組Controlgroup標志保持率Markerretentionrate∥%VIE組VIEgroupCWT組CWTgroup01001001001001007849095100100404591910098

2.2生長情況由表2可知，試驗開始時，各組試驗魚的全長和體重都比較接近。試驗結(jié)束時，VIE標記組試驗魚的體重增長了13.8%，CWT標記組試驗魚的體重增長了5.5%，對照組試驗魚的體重增長了7.5%，說明VIE標記對拉薩裂腹魚生長的影響較小。

3討論與結(jié)論

在開展魚類標記試驗時，都希望盡可能減小標記操作對魚類生長和存活的影響。該研究結(jié)果表明VIE標記和CWT標記對拉薩裂腹魚幼魚的生長沒有顯著影響，但是VIE標記組存活率明顯高于CWT標記組。造成這種差異的原因可能在于標志部位的不同。VIE標記只在魚體的表皮層操作，沒有傷及更深層的體組織，因而試驗魚可以快速愈合傷口。CWT標記要插入魚體肌肉深處，試驗魚規(guī)格又較小，可能對試驗魚造成了較大的傷害，從而最終降低了總體的存活率。

表2　不同標志方式下拉薩裂腹魚幼魚的生長情況

該研究結(jié)果表明VIE標志和CWT標記對拉薩裂腹魚均具有極高的標志保持率。然而，一些研究表明VIE標記和CWT標記在不同時間尺度下對魚類的標志效果存在較大差異。例如，采用VIE標記和CWT標記標志小鰻鱺(Anguillaanguilla)的32 d標志保持率分別為100%和99%，但512 d的標志保持率分別為66%和99%，說明VIE只適合短期標志，而CWT更適合長期標志[2]。造成這種現(xiàn)象的原因可能在于VIE標記會隨著魚體的生長而擴散和淡化，到了一定程度肉眼將無法識別顏色，而CWT標記是固態(tài)的金屬絲，不會自行擴散，只要找準部位就能用檢測棒檢測到信號。由于條件所限，筆者只開展了為期40 d的試驗，未能進行更長時間的試驗，但在更長的時間尺度下CWT標記拉薩裂腹魚幼魚的長期標志保持率可能會保持較高水平，而VIE標記拉薩裂腹魚幼魚的保持率可能會高于溫帶和熱帶地區(qū)的魚類，由于西藏魚類生長速度緩慢，VIE標記在皮層的擴散速度可能會更慢。

由于患小瓜蟲病的影響，該研究中各組試驗魚的最終存活率均不高。因此，該試驗無法說明標記對試驗魚的存活能力是否有影響。但是，筆者同步開展的VIE和CWT對拉薩裸裂尻魚的標志效果試驗也許能說明一定的問題。拉薩裸裂尻魚和拉薩裂腹魚均屬于裂腹魚類，且分布區(qū)域也大體一致。ZHU T等[3]研究表明VIE和CWT對拉薩裸裂尻魚的存活均沒有顯著影響。該試驗中VIE組拉薩裂腹魚的存活率高于對照組。據(jù)此推斷，VIE標記對拉薩裂腹魚幼魚的存活率沒有顯著影響，而CWT組試驗魚的存活率略低于對照組。目前，并不能確定CWT標記或患病是影響成活率的主因，仍需要進一步研究。

綜合考慮成本、操作的便利性，損傷性和標志保持率等因素，VIE標記是拉薩裂腹魚幼魚短期標志的較佳方式。

參考文獻

[1] 西藏自治區(qū)水產(chǎn)局.西藏魚類及其資源[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995.

[2] SIMON J,DORNER H.Growth,mortality and tag retention of smallAnguillaanguillamarked with visible implant elastomer tags and coded wire tags under laboratory conditions [J].Journal of applied ichthyology,2011,27(1)：94-99.

[3] ZHU T,GUO W,WU X,et al.Effects of visible implant elastomer and coded wire tags on growth and survival ofSchizopygopsisyounghusbandiRegan,1905[J].Journal of applied ichthyology,2016,32(1)：110-112.

基金項目農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(201403012)。

作者簡介朱挺兵(1987- )，男，江西南康人，助理研究員，博士，從事魚類生態(tài)學研究。*通訊作者，研究員，碩士生導師，從事魚類保護生物學研究。

收稿日期2016-03-22

中圖分類號S 931.1

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2016)13-004-02

Study of Visible Implant Fluorescent Tag and Micro Metal Coded Wire Tag inSchizothoraxwaltoniJunvenile

ZHU Ting-bing,YAN Wen-bin,YANG De-guo*

(Yangtze River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences/Key Laboratory of Freshwater Biodiversity Conservation,Ministry of Agriculture,Wuhan,Hubei 430223)

Abstract[Objective] To examine the effect of different marking methods on Schizothorax waltoni Regan,and to provide technical support for its artificial releasing and effect evaluation.[Method] Junvenile S.waltoni Regan (total length 5-7 cm) were treated with visible implant elastomer tag (VIE)implantation,coded wire tag (CWT)implantation and no implantation (control) for 40 days,effects of different marking methods on S.waltoni were studied.[Result] The survival rate of experimental fish in VIE group was significantly higher than that of CWT and control group.Tag retention in VIE and CWT group were 100% and 98%,respectively.No significant effects were found of both VIE and CWT marking on the growth of experimental fish.[Conclusion] VIE is suitable short-term marking method for S.waltoni junvenile.