內皮微粒CD31+/CD42b-水平、頸動脈內膜中層厚度與冠狀動脈病變程度的相關性

權曉慧　王聰霞　李毓杰　石昭昭　秦少博

(西安市第一醫院心血管內科，陜西　西安　710002)

內皮微粒CD31+/CD42b-水平、頸動脈內膜中層厚度與冠狀動脈病變程度的相關性

權曉慧王聰霞1李毓杰石昭昭秦少博

(西安市第一醫院心血管內科，陜西西安710002)

〔摘要〕目的探討冠心病患者血漿內皮微粒CD31+/CD42b-水平、頸動脈內膜中層厚度(CIMI)與冠狀動脈病變程度的關系。方法選取該院2015年1～6月收治的冠心病患者137例，根據冠狀動脈造影結果及臨床表現，將患者分為冠狀動脈造影正常(對照)組42例，單支病變組35例，雙支病變組29例，三支及多支病變組31例，患者行頸動脈超聲檢查，檢測血漿內皮微粒CD31+/CD42b-水平，分析冠狀動脈病變程度與內皮微粒、CIMI的相關性。結果與對照組比較，冠心病組CD31+/CD42b-內皮微粒水平及CIMT明顯升高〔(1 307.29±382.68)mmol/L vs (835.98±260.85)mmol/L；(0.98±0.13)〕mm vs (0.83±0.11)mm，P<0.05〕。與對照組比較，隨著冠狀動脈病變程度的加重，CD31+/CD42b-內皮微粒水平及CIMT明顯增加( P<0.05)。多元Logistic回歸分析顯示CD31+/CD42b-內皮微粒水平及CIMT增厚與冠心病嚴重程度呈獨立正相關(OR=2.330，95%CI：1.635～6.356；OR=3.957，95%CI：1.125～4.784，P<0.05)。結論血漿內皮微粒CD31+/CD42b-水平及CIMI與冠狀動脈病變程度具有相關性，通過檢測內皮微粒及CIMI可預測冠狀動脈的病變程度。

〔關鍵詞〕冠心病；內皮微粒；頸動脈內膜中層厚度

內皮微粒(EMPs)是一種在內皮細胞激活或凋亡狀態下釋放的膜樣結構微泡，這種微泡帶有大量的內皮表面蛋白和生物信息，是檢測內皮功能潛在的生物學標記物〔1,2〕。頸動脈內膜中層厚度(CIMT)是反映頸部血管動脈硬化的早期指標，是診斷和預測冠心病的良好指標。本研究旨在通過對冠心病患者行血漿EMPs檢測及CIMT檢查，探討EMPs水平及CIMT與冠脈病變程度的相關性。

1資料與方法

1.1對象選取我院2015年1～6月診治的冠心病患者137例，自愿加入本研究并簽署知情同意書。將調查人群按冠狀動脈造影結果進行分組，正常對照組42例、單支病變組35例、雙支病變組29例、三支及多支病變組31例。137例患者中男73例，女 64 例，年齡62～83歲，平均(72.7±6.8)歲。排除標準：嚴重的肝腎功能不全、感染、惡性腫瘤、瓣膜性心臟病、原發性肺動脈高壓、肺栓塞、自身免疫性疾病及嚴重電解質紊亂等。患者相關生化指標包括血脂、血糖的檢測由本院生化檢驗中心完成。

1.2血漿EMPs的檢測所有受試對象均在清晨空腹靜息狀態下采集肘靜脈血5 ml，枸櫞酸鈉抗凝管收集血液，用于EMPs表達水平檢測。通過兩步離心法取上清，獲得貧血小板血漿，于-80℃冰箱保存直至集中檢測。檢測時，室溫下溶解貧血小板血漿，取50 μl加入特異性熒光標記抗體(anti-CD42-PE，anti-CD31-FITC，anti-CD144-APC ，美國BD 公司生產)0.5 μg。在室溫下孵育 20 min 后依次加入1 ml PBS 液待測，上機前用直徑為1.0 μm的標準微球定位設門，混合液即可上流式細胞儀(BD FACS calibur)檢測。

1.3CIMT的測量采用高分辨率的彩色血管多普勒超聲儀(型號：Acuson sequoia 512，德國西門子公司)，頻率8～12 MHz寬頻探頭。患者取平臥位，雙肩墊枕，頭向后略偏向檢查側對側，充分暴露頸部，測定部位在頸動脈竇近端1 cm總動脈段處、頸總動脈分叉部及其遠端1 cm頸內動脈段后壁處，左右各三個點，各測量3次，取平均值為CIMT。所有超聲檢查由本院超聲診斷科同一資深醫師完成。

1.4冠狀動脈造影方法及冠狀動脈病變程度評價冠狀動脈造影由經驗豐富的心臟介入醫生按照常規方法進行。根據冠脈造影結果分為冠心病組95例(左主干、前降支、回旋支、右冠狀動脈中至少1支冠狀動脈狹窄程度≥50%)和對照組42例(冠狀動脈狹窄程度均<50%)。Gensini積分采用美國心臟病協會的標準，最后進行冠狀動脈狹窄程度的病變定量評定：無狹窄計0分，狹窄≤25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計4分，76%～90%計8分，91%～99%計16分，100%計32分；不同節段冠狀動脈乘以相應系數：左主干病變，得分×5；左前降支近段，得分×2.5，中段得分×1.5，遠段得分×1；第一對角支得分×1；第二對角支得分×0.5；左回旋支近段得分×2.5，中段得分×1.5，遠段和后降支均得分×1，后側支得分×0.5；右冠近、中、遠段和后降支均得分×1。最終積分為各分支積分之和。

2結果

2.1冠心病組與對照組一般臨床資料比較冠心病組總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、CIMT及CD31+/CD42b-EMPs數量明顯高于對照組(P<0.05)；兩組年齡、性別、高血壓史、糖尿病史、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)、體重指數(BMI)比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　冠心病組與對照組一般臨床資料比較±s)

2.2各組患者Gensini積分與CIMT、CD31+/CD42b-EMPs數量的比較與對照組比較，單支病變組、雙支病變組和三支及多支病變組的CD31+/CD42b-EMPs及CIMT明顯增加，而且隨著冠狀動脈病變程度的加重，CD31+/CD42b-EMPs及CIMT亦隨之增加(P<0.05)，見表2。

2.3多因素Logistic回歸分析以冠狀動脈狹窄程度的積分為因變量，年齡、高血壓、糖尿病、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、BUN、Scr、Cys C、BMI、CIMT和CD31+/CD42b-為自變量，Logistic回歸分析顯示，LDL-C、Scr、CIMT和CD31+/CD42b-與冠心病嚴重程度呈獨立正相關(P<0.05)，見表3。

表2　各組患者Gensini積分與CIMT、

與對照組相比：1)P<0.05；與單支病變組相比：2)P<0.05

表3　多因素Logistic回歸分析

3討論

EMPs 作為效應因子,在正常血管內皮細胞的炎性反應和血栓形成等過程中發揮一定作用。因此，EMPs 被認為是連接內皮功能障礙與動脈血栓形成之間的紐帶〔3〕。國內外有研究〔4,5〕證實EMPs與冠心病相關，因此檢測外周血中EMPs水平對了解內皮細胞的功能狀態極為重要。

由于CD31+和CD42b-均表達于血小板膜表面，而內皮細胞膜表面只表達CD31+而不表達CD42b-，這樣用流式細胞儀檢測EMPs時，就可以定義 CD31+且CD42b-微粒為EMPs，在很多疾病的 EMPs 研究中都采用這種方法〔6，7〕。EMPs作為反映內皮損傷、功能紊亂的指標被國內外學者認可，內皮細胞的功能可因缺血、脂類物質沉著、機械性的血流動力學損傷而受損，從而導致內皮功能不全，繼而損傷的內皮可以釋放出EMPs，由此可以認為它們參與血管內膜增生和斑塊形成〔8，9〕。一項前瞻性研究對488例冠心病高風險患者隨訪36個月，多因素COX比例風險模型表明EMPs和年齡、超敏C反應蛋白、腦鈉肽一樣，與心血管事件獨立相關〔10〕，提示EMPs有望作為Framingham危險評分的補充，更好地預測冠心病高危人群的心血管事件風險。有研究發現〔11〕，冠心病患者的EMPs水平顯著高于健康對照人群，而急性心肌梗死組患者的EMPs水平又高于不穩定心絞痛組患者的水平。本文研究結果與前人研究結果一致，說明EMPs的升高不僅促進動脈斑塊的形成，而且增加了無癥狀患者的發病風險，通過檢測EMPs可以篩選出具有心血管疾病的高危患者，做到早期預防。

頸動脈超聲作為一種簡單易行、重復性好的檢查手段，可用于動態觀察動脈粥樣硬化的進展，CIMT可作為冠心病預測的重要指標〔12〕。頸動脈與冠狀動脈不僅在動脈粥樣硬化的發病機制上一致，而且在解剖結構上具有相似性，均為平滑肌細胞。本研究結果顯示，隨著冠狀動脈病變程度的加重，CIMT明顯增加。Alaee等〔13〕以CIMT>1.2 mm對冠心病進行預測，認為其陽性預測值為81%，陰性預測值為70.51%。Sadasivam等〔14〕在對50例18～25歲有冠心病家族史的健康人群檢查研究發現，其CIMT與對照組相比明顯增厚，TG水平亦升高，提示有冠心病家族史的年輕人更早出現頸動脈內膜的異常，CIMT可用于動脈粥樣硬化的早期篩查。Jeevarethinam等〔16〕同樣證實，CIMT是冠心病發生和嚴重程度的預測因素，并進一步發現頸動脈斑塊似乎更優于CIMT 值，但尚需進一步研究證實。

綜上所述，CD31+/CD42b-EMPs及CIMT與冠脈病變程度相關，通過CD31+/CD42b-EMPs的檢測及CIMT檢查，可評估患者血管的病變程度，為冠心病的早期預防提供臨床思路。

4參考文獻

1Osto E，Coppolino G，Volpe M，etal.Restoring the dysfunctional endothelium〔J〕.Curr Pharm Des,2007,13(10):1053-68.

2Burger D,Touyz RM.Cellular biomarkers of endothelial health:microparticles,endothelial progenitor cells,and circulating endothelial cells〔J〕.J Am Soc Hypertens,2012;6(2):85-9.

3Shantsila E，Kamphuisen PW，Lip GY.Circulating microparticles in cardiovascular disease:implications for atherogenesis and atherothrombosis〔J〕.J Thromb Haemost，2010;8(11):2358-68.

4Wekesa AL,Cross KS,O′donocan O,etal.Predicting carotid artery disease and plaque instability from cell-derived microparticles〔J〕.Eur J Vasc,2014;48(5):489-95.

5Bueno Jimenez C.Circulating microparticles from patients with coronary artery disease cause endothelial dysfunction〔J〕.Rev Esp Cardiol,2012;65(4):389.

6Preston RA,Jy W,Jimenez JJ,etal.Effects of severe hypertension on endothelial and platelet microparticles〔J〕.Hypertension,2003;41(2):211-7.

7Harrison M,Murphy RP,O Connor PL,etal.The endothelial microparticles response to a high fat meal is not attenuated by prior exercise〔J〕.Eur J Appl Physiol,2009;106(4):555-62.

8Rautou PE,Vion AC,Amabile N，etal.Microparticles,vascular function,and atherothrombosis〔J〕.Citv Res,2011;109(5):593-606.

9Hu SS,Zhang HG,Zhang QJ,etal.Small-size circulating endothelial microparticles in coronary artery disease〔J〕.PLoS One,2014;9(8):104.

10Nozaki T,Sugiyama S,Koga H,etal.Significance of a multiple biomarkers strategy including endothelial dysfunction to improve risk stratification for cardiovascular events in patients at high risk for coronary heart disease〔J〕.J Am Coll Cardiol,2009;54(7):601-8.

11Cui Y,Zheng L,Jiang M,etal.Circulating microparticles in patients with coronary heart disease and its correlation with interleukin-6 and C-reactive protein〔J〕.Mol Biol Rep,2013;40(11):6037-42.

12Lee YH,Shin MH,Kweon SS,etal.Normative and mean carotid intima-media thickness values according to metabolic syndrome in Koreans:the Namwon study〔J〕.Atherosclerosis,2014;234(1):230-6.

13Alaee A,Khademloo M.Evaluation of correlation between carotid artery intima media wall thickness and coronary arter stenosis in Sari,North of Iran〔J〕.Pak J Biol Sci,2008;11(19):2360-3.

14Sadasivam K,Nagarajan P,Durai I,etal.Carotid artery intima-media thickness in young adults with family history of coronary artery disease〔J〕.J Clin Diagn Res,2015;9(9):1-4.

15Jeevarethinam A,Venuraju S,Weymouth M,etal.Carotid intimal thickness and plaque predict prevalence and severity of coronary atherosclerosis:a pilot study〔J〕.Angiology,2015;66(1):65-9.

〔2015-12-17修回〕

(編輯袁左鳴/徐杰)

基金項目：國家自然科學基金資助項目(No.81273878)；西安市衛生局科技計劃項目(J2014005)

〔中圖分類號〕R54

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)11-2650-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.037

1西安交通大學醫學院第二附屬醫院心血管內科

第一作者：權曉慧(1979-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事冠心病發病機制研究。