山楂提取物對地高辛誘導大鼠心律失常的拮抗作用

李　馨　黃海燕

(重慶市江北區人民醫院心血管內科，重慶　400020)

山楂提取物對地高辛誘導大鼠心律失常的拮抗作用

李馨黃海燕

(重慶市江北區人民醫院心血管內科，重慶400020)

〔摘要〕目的探討山楂提取物對地高辛誘導心律失常的拮抗作用。方法研究分為實驗組(n=8)和對照組(n=8)。地高辛，以40 μg·kg-1·min-1劑量，注射到實驗組和對照組大鼠誘導心律失常。與此同時，山楂提取物滴注實驗組大鼠；等量0.9%NaCl滴注到對照組大鼠。分析大鼠心電圖QRS波增寬及動脈血壓變化。結果實驗組大鼠比對照組存活時間長(P=0.002)。地高辛注射起始兩組間QRS波增寬無統計學差異(P=0.812)。對照組心動過緩特別明顯(P=0.01)。在地高辛和0.9%NaCl滴注期間對照組觀察到最大QRS波時間是53.29±3.99 ms(P=0.001)。而實驗組室性心律失常持續時間比較短。實驗組動脈血壓降低到(32.67±6.89)mmHg(P<0.001)。結論山楂提取物具有拮抗地高辛誘導心律失常作用。

〔關鍵詞〕山楂攝取物；心律失常；地高辛

山楂中主要含黃酮類化合物、有機酸、微量元素及氨基酸等〔1〕。研究證明，山楂提取物能顯著降低家兔和大鼠的血脂，并對動脈粥樣硬化有治療作用〔2〕。山楂中的黃酮苷及復雜的二聚黃烷和多聚黃烷類，有顯著的擴張血管、降低血壓效果〔3〕。另外，山楂還具有增加心肌收縮力、減慢心律的作用；可擴張冠狀動脈并降低心肌耗氧量，改善心肌的血液供應，并能降低外周阻力，對心血管系統起到改善作用〔4〕。洋地黃中毒死亡通常是由于致命的心律紊亂〔5〕。盡管已有報道山楂提取物可以抑制烏頭堿、氯化鈣和腎上腺素所致的心律失常〔6〕。但是山楂提取物對地高辛誘導心律失常的作用未見相關報道。因而，本研究評價山楂提取物對地高辛誘導大鼠心律失常的拮抗作用。

1材料和方法

1.1試劑山楂提取物購于臨沂愛康藥業有限公司，批號AKH010-A，然后溶于0.9% NaCl，配成5 mg/ml溶液(pH7.4);地高辛注射液購于杭州民生藥業有限公司(國藥準H33021711)。

1.2動物及分組雄性Wistar大鼠，體重250～300 g(山西醫科大學實驗動物中心提供)，用隨機數字表法分為對照組(n=8，同時滴注地高辛和0.9%NaCl)及實驗組(n=8)，同時滴注地高辛和山楂提取物。

1.3方法

1.3.1手術操作取Wistar大鼠，稱重，戊巴比妥鈉(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，先分離出大鼠右側頸動脈，一手用顯微外科鑷子在靠近頭側結扎處小心夾起頸動脈,另一手用顯微外科直剪小心在頸動脈上剪一斜口，小心將管插入,然后結扎固定，連接多導生理儀連續監測大鼠血壓。左、右頸內靜脈也同樣插管，滴注山楂提取物或0.9%NaCl。

1.3.2地高辛誘導心律失常在研究開始前，6只大鼠被用于明確地高辛誘導心律失常的劑量。地高辛通過左頸內靜脈滴注，起始劑量是5 μg·kg-1·min-1，滴注時間是60 min。如果沒有觀察到心律失常(QRS波延長；室性心律失常)，地高辛劑量逐漸增加到40 μg·kg-1·min-1〔7〕。最終，40 μg·kg-1·min-1的地高辛滴注10 min時觀察到室性心律失常。比較各組大鼠QRS波延長間期、室性期前收縮持續時間、室性心動過速和室顫的持續時間。

1.3.3提取物滴注兩組大鼠穩定30 min后(心率:340～380次/min;收縮壓:100～140 mmHg)，通過左頸內靜脈滴注地高辛(40 μg·kg-1·min-1)。同時，對照組以0.9%NaCl通過右頸內靜脈滴注(1 ml·kg-1·min-1)；而實驗組通過右頸內靜脈滴注山楂提取物(4 mg·kg-1·min-1)。地高辛、0.9%NaCl和山楂提取物滴注時間都持續60 min,0.9%NaCl和山楂提取物滴注量相等。

1.3.4數據測量標準肢體導聯心電圖置于大鼠胸腔四肢附近的四個區域，記錄心電圖波形。心電圖儀在整個實驗過程中持續監視大鼠心電圖，根據心電圖分析心律失常。從心電圖記錄計算心率。多導生理儀連續記錄大鼠動脈血壓。

1.4統計學方法采用SPSS17.0軟件進行Wilcoxon秩和檢驗及單因素方差分析。

2結果

2.1山楂提取物對大鼠心電圖和存活的影響大鼠穩定以后(心率和血壓在30 min內穩定)，對照組和實驗組大鼠開始滴注地高辛，導致QRS間期延長、心動過緩、心臟停搏。對照組和實驗組大鼠心動過緩分別起始于滴注后(21.03±1.67)min和(27.12±2.61)min。與對照組(49.86±2.34 min)相比，實驗組(62.13±2.20 min)大鼠的存活時間更長(P=0.002)。實驗組有4只大鼠在地高辛滴注后還存活。實驗組與對照組間QRS波延長起始時間無顯著差別〔(29.94±2.47)min vs (28.01±1.99)min,P=0.812〕。

2.2山楂提取物對大鼠心率的影響盡管在穩定期間兩組大鼠心率相似，但在滴注地高辛后兩組大鼠心率逐漸降低，對照組大鼠心動過緩更加明顯(P=0.01)。對照組大鼠在地高辛和0.9%NaCl滴注期間最大QRS期間更長(P=0.001)。實驗組QRS持續時間在滴注期長于穩定期(P=0.001)，見表1。

表1　實驗組和對照組測量數據的比較±s,n=8)

與本組穩定期比較：1)P<0.01；與對照組地高辛滴注期比較：2)P<0.001

2.3山楂提取物對大鼠心律失常的影響實驗組大鼠室性期前收縮持續時間為(29.25±1.98) min，室性心動過速持續時間是(39.19±8.02)min,室顫時間是(11.94±4.46)min,均低于對照組(48.56±7.19)min、(41.25±7.03)min及(23.12±6.71)min(均P<0.001)。

2.4山楂提取物對大鼠血壓的影響各組大鼠的動脈血壓都降低。實驗組大鼠血壓降低幅度更顯著(P<0.05)。對照組大鼠動脈血壓在滴注期降低(P<0.05)。見表2。

表2　各組大鼠研究期間動脈血壓的變化

與對照組同時點比較：1)P<0.05，與本組0 min比較：2)P<0.05

3討論

本研究表明，山楂攝取物對地高辛誘發大鼠心律失常具有保護作用。由于不同大鼠誘導產生不同類型的心律失常，本研究采用QRS間期延長以及室性期前收縮、室性心動過速和室顫的持續時間作為心律失常的標志。結果證實,與對照組相比，實驗組大鼠室性心律失常均下降。

研究已經發現，地高辛引起動物心臟毒性模型，包括多種室性和室上性心律失常〔7〕。而且，QRS間期延長早于其他心律失常出現。動物實驗證實，過量洋地黃與心肌細胞膜上Na+-K+-ATP酶結合而抑制該酶活性，使心肌細胞膜內外Na+-K+主動耦聯轉運受損，心肌細胞內Na+濃度升高，使細胞膜上Na+-Ca2+交換增多，細胞內Ca2+增多，肌漿網內Ca2+也增多，導致正性肌力和心律失常〔8〕。最近Gonano等〔9〕人證實激活的鈣-鈣調蛋白激酶Ⅱ通過磷酸化Ryanodine受體，導致肌漿網內Ca2+漏出，調節哇巴因誘發的心律失常和毒性影響。山楂提取物抗心律失常的確切機制目前尚不清楚。在一項研究中發現山楂提取物可以延長動作電位時程并且推遲復極；另一方面，還可以阻止心肌細胞K+外流，這與Ⅲ類抗心律失常藥物的作用機制一樣〔10〕。山楂提取物抗心律失常的機制可能是通過調節相關信號通路。同時，研究發現山楂當中的皂苷和黃酮化合物分別具有降低血壓和抗心律失常作用〔11〕。

山楂植物提取物是世界公認的藥物來源。山楂中分離得到的物質主要有黃酮類、黃烷及其聚合物類、有機酸類，另外還有三萜類和甾體類等。Salehi等〔12〕研究發現，在缺血性心肌損傷大鼠模型中，山楂提取物具有抗低血壓和心律失常的效應。此外，Swaminattan等〔13〕人實驗結果提示山楂提取物減少大鼠心臟缺血再灌的氧化應激反應，抑制細胞凋亡，具有保護心臟的作用。本研究進一步證實了山楂提取物對地高辛誘發的大鼠心律失常具有保護作用。

本研究具有一定的局限性。首先，我們沒有具體分析山楂提取物中各種不同成分對地高辛誘發的大鼠心律失常的影響。其次，地高辛誘導大鼠心律失常劑量是40 μg·kg-1·min-1，但沒有進一步的增加劑量，還需要在臨床上進一步的研究。

4參考文獻

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3張勁松.山楂的藥理作用和臨床應用新說〔J〕.中國中醫藥咨訊,2012;4(3):97．

4樓陸軍,羅潔霞,高云.山楂的化學成分和藥理作用研究概述〔J〕.中國藥業,2014;23(3):92-4.

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13Swaminattan JK,Khan M,Mohan IK,etal.Cardioprotective properties of Crataegus oxycantha extract against ischemia-reperfusion injury〔J〕.Phytomedicine,2010;17(10):744-52.

〔2015-12-30修回〕

(編輯曹夢園)

〔中圖分類號〕R514.7

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)11-2628-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.027

第一作者：李馨(1980-)，女，主治醫師，在讀碩士，主要從事心血管內科疾病研究。