Agilent1100、1200液相色譜儀的維護與維修

宋學英　楊　華　吳英婷　樊媛潔

(首都醫科大學醫學實驗與測試中心，北京 100069))

儀器使用與維修

Agilent1100、1200液相色譜儀的維護與維修

宋學英楊華吳英婷樊媛潔

(首都醫科大學醫學實驗與測試中心，北京 100069))

摘要：介紹了Agilent1100、1200液相色譜儀的維護與維修的方法。通過日常對儀器的觀察，發現故障的發生原因，提出解決方法。有助于延長儀器的使用壽命，保證儀器的完好率與使用率。

關鍵詞：液相色譜儀維護

高效液相色譜(HPLC)具有高分離效率、高選擇性和高靈敏度的特點，目前已成為化學、生物化學、醫藥衛生、石油化工和環境保護等領域中不可缺少的檢測工具[1]。安捷倫1100、1200液相色譜儀是8～10年以前的產品，目前這些儀器由于購買年限較長，早已過了保修期，進入了故障頻發期，如果總是請廠家上門維修即花錢又耽擱時間，影響儀器的使用，所以做好儀器的日常維護工作，學會自己動手排除一些小故障十分必要，同時可節省時間保證儀器的正常使用。

1液相色譜的工作原理

色譜分離原理： 溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationary phase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出[1](圖1)。

HPLC系統一般由輸液泵、脫氣機、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成， 輸液泵、自動進樣器、色譜柱、檢測器是關鍵部件[2，3]。

圖1　液相色譜儀的工作原理

2Agilent1100、1200日常維護與故障排除

2.1泵的維護與故障排除

2.1.1泵的工作原理

高壓輸液泵是液相色譜儀分析系統中重要單元部件，用于將流動相和樣品輸入到色譜柱和檢測器中，從而使樣品得到分析，其性能的好壞直接影響整個儀器和分析結果的可靠性。

液相色譜儀的高壓輸液泵有兩種類型，即通常稱謂的恒流泵和恒壓泵。恒流泵使輸出的液體流量穩定；而恒壓泵則使輸出的液體壓力穩定。恒流泵中有往復泵，注射泵。

Agilent1100、1200泵是一個累積型柱塞往復串聯泵，累積型柱塞往復泵有兩個泵頭，以串聯方式連接在一起，這樣可以提供平穩的液流。之所以如此是因為兩個泵腔排液體積不同，第一級泵腔是第二級泵腔的2倍。整個泵系統包含：一個入口單向閥(主動閥)和一個出口單向閥(purger閥)，2個柱塞桿和2個柱塞桿密封墊，阻尼器和壓力傳感器。原理示意圖如圖2所示，實物圖如圖3所示。

圖2　Agilent1100、1200液相色譜儀泵原理示意圖

圖3　Agilent1100 1200液相色譜儀泵的實物圖

2.1.2泵故障排除與日常維護

在日常工作中常常可以遇到系統超壓的現象，首先應斷開泵出口的管路，排除進樣器以后和泵以后故障的原因。如果是泵的故障，解決方法：首先應該檢查出口閥的閥芯，觀察閥芯是否變黑，如果閥芯變黑，更換出口閥芯(注：出口閥芯是一次性的，不可超聲清洗后再使用，否則會污染整個系統。)，便可以解決問題。如果更換了出口閥芯，仍不能解決問題，可更換柱塞桿密封墊，基本上可解決出現泵超壓的問題[4]。

泵壓低或無泵壓，應檢查流路，看是否有漏液情況或溶液根本就沒進入系統中。一般系統漏液，會有漏液提示，無論是泵、自動進樣器、柱溫箱及檢測器均有提示。如果是沒有泵進溶液，應檢查溶劑過濾頭和主動閥。溶劑過濾頭的檢查方法：把溶劑過濾頭拔掉，看流動相是否會因重力的作用而流下，如果溶劑過濾頭被污染，可用30%硝酸浸泡，然后再用超純水清洗干凈，玻璃材質溶劑過濾頭不可用超聲的方法清洗。排除了溶劑過濾頭的原因后，應檢查主動閥，看進入主動閥的管路內是否有氣泡，如果有，說明是主動閥芯故障，這時應把泵的電源關閉，拔掉主動閥電源，拆開主動閥芯，用50%異丙醇超聲清洗主動閥芯10分鐘，再把主動閥復原，打開泵的電源，觀察主動閥是否能夠正常泵液，如果還不能解決問題，說明主動閥芯過臟，如果有備用的閥芯，請更換。如果沒有，實驗又不能中斷，可用10%的磷酸超聲清洗2～3分鐘，然后用超純水把酸清洗掉，這樣清洗一般可解決問題。注意：用磷酸清洗時時間不宜過長，否則會損壞閥芯中的金屬。

主動閥漏液：如果有備用的主動閥，可換一個新的主動閥，如果沒有，可試著拆開主動閥體的四個六角形螺絲，更換主動閥體上的密封墊(圖4)。

圖4　主動閥拆開后各個部件

泵的日常維護：首先流動相要清潔，要使用色譜級的試劑和超純水作為流動相，如果使用緩沖鹽，要過0.22μm的濾膜。水相使用不超過48小時且要用棕色瓶裝，因為水特別是緩沖鹽在陽光照射下易長菌。如果有機相用的是乙腈，要把原來瓶中的試劑倒掉換成新試劑，用棕色試劑瓶裝，因為乙腈長時間在陽光的照射下易產生聚合現象，出現絮狀沉淀。如果泵帶有seal wash裝置，一定要打開seal wash(10%異丙醇)裝置，且要定期更換[2]。實驗完后，要把含有緩沖鹽的流動相用等比例的不含鹽的流動相替換，用甲醇沖洗系統，使系統保存在甲醇中，然后將水相的流路用甲醇灌注，以免長時間不用時管路內長菌[5]。

2.2Agilent1100、1200自動進樣器的故障排除與維護

自動進樣器經常出現的故障有進樣針和進樣針座堵塞、六通閥中的轉子損壞及由于突然停電等原因造成的機械手被卡死，不能移動等故障。如果發現機械手被卡死的故障，關閉自動進樣器的電源，過1～2分鐘后再開啟電源，讓自動進樣器自檢或點擊進樣器的復位鍵，使其重新復位，如果還不能解決問題，可轉動自動進樣器后面的絲杠，使機械手轉出后再點擊復位鍵，問題即可解決。

如果發現系統壓力升高，在排除了泵及色譜柱、檢測器的原因后，可以檢查進樣針和進樣針座是否被堵塞，清洗進樣針座的方法：可將六通閥上的管線5、6反接(如圖5所示)，設流速為1mL/min沖洗，(注意：不要讓液體流到漏液傳感器上)或將針座拆下來，接到泵的出口上沖洗針座，洗干凈后，可把針座再裝回去即可。

圖5　六通閥連接示意圖

沖洗進樣針的方法：將進樣針抬起，將六通閥上2號位置的管線接到6的位置上，進樣針抬起，沖洗進樣針(進樣針下可放一個小燒杯以免液體流到漏液傳感器上造成停泵)。

排除進樣針和針座堵塞的問題，可將六通閥拆開，觀察六通閥的定子是否有堵塞的現象，同時觀察六通閥的轉子是否損壞，可用超聲的方法清洗六通閥的定子或更換六通閥的轉子即可。

自動進樣器的日常維護：由于樣品瓶密封墊的反復使用，會使瓶蓋上的瓶墊碎屑進入到進樣器的針或針座中，造成進樣針或針座堵塞或損壞。因此，要及時更換樣品瓶蓋上的瓶墊。

2.3Agilent1100、1200檢測器的維護與保養

紫外檢測器的日常維護：經常檢查氘燈的使用時間，發現氘燈使用的壽命快到時，要注意及時備好，以免在使用過程中由于氘燈點不燃而耽誤實驗。

檢測器在使用一段時間后，流通池有可能被污染，可用異丙醇清洗流通池。實驗完畢后，養成沖洗流通池的習慣，可以不接色譜柱，而用一個兩通連接系統，用水和甲醇分別沖洗系統，可避免流通池被污染[6]。

總之在日常使用時,注意定期維護色譜系統，延長儀器的使用壽命，保證儀器的完好率，保證科研的順利進行。

參考文獻

[1]嚴勁, 方舸, 盧皖琴.高效液相色譜( HPLC) 的管理和維護.醫療裝備[J]. 2010,(4)：74-75.

[2]宋學英,楊華,趙逸松，等.高效液相的儀應用分析.中國醫學裝備，2015,(1)：29-31.

[3]梁潔銀.HP1100高效液相色譜儀的常見故障分析. 中國醫療設備[J].2011, (12)：123.

[4]尹翠英，趙國芬，康月菊，蘇素文，等. Agilent1100 高效液相色譜儀的日常維護和常見故障排除[J].河北化工，2008,(6)：60-61.

[5]吳少敏，張雅芝，殷博昊．高效液相色譜的使用與維護.實驗室科學[J].2011，(3)：183-186.

[6]陳紹初，張馳，等.高效液相色譜使用中常見問題與對策.中國制藥裝備[J].2011,(7)：54-56.

Maintenance of agilent1100,1200 liquid chromatograph.

Song Xueying,Yang Hua,Wu Yingting,Fan Yuanjie

(MedicalIaboratoryandTestingCenterofCapitalMedicalUniversity.Beijing100069,China)

Abstract：In this paper, the method of maintenance of agilent1100,1200 liquid chromatograph is introduced.

Key word:liquid chromatograph；maintenance

作者簡介：宋學英， 1985年畢業于北京大學物理實驗技術專科，多年來一直從事液相色譜儀的管理與測試任務。

DOI:10.3936/j.issn.1001-232x.2016.03.021

收稿日期：2015-11-27