核基質結合區結合蛋白質1在胃癌中的表達及其與臨床病理特征的關系

胥 穎，董丹丹，李 科，李芳華

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院病理科，四川 成都 610072)

核基質結合區結合蛋白質1在胃癌中的表達及其與臨床病理特征的關系

胥 穎，董丹丹，李 科，李芳華

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院病理科，四川 成都 610072)

目的 檢測胃癌組織中核基質結合區結合蛋白質1(special AT-rich sequence-binding protein 1，SATB-1)與臨床病理特征的相關性。方法 應用免疫組織化學Envision法檢測97例胃癌患者和20例癌旁組織中SATB1蛋白的表達，應用Spearman法分析其與臨床病例特征的相關性。結果 胃癌組織中SATB1蛋白表達陽性率為60%，高于癌旁組織10%，差異有統計學意義(P< 0.05)。SATB1蛋白在胃癌中的陽性表達率與淋巴結轉移，腫瘤浸潤深度和臨床TNM分期密切相關(P< 0.05)，與年齡、性別、腫塊大小無顯著相關性(P> 0.05)。結論 SATB1在胃癌組織中的高表達預示胃癌惡性程度高，臨床分期晚，可能存在淋巴結轉移，預后不良，因此檢測SATB1表達可作為臨床篩選胃癌高危轉移者、制定治療方案和判斷預后的一個新指標。

胃癌；核基質結合區結合蛋白質1；免疫組織化學

胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一，發病率和病死率均很高，在我國其病死率居各類癌癥病死率的第一位，在世界范圍內，胃癌的病死率居各類惡性腫瘤的第二位。多數胃癌確診時已屬于晚期，發生侵襲和轉移是造成死亡的主要原因[1]。探討胃癌的發展和轉移機制，尋找可能的預測指標，對監測胃癌病程進展，轉移潛能及預后估計具有重要的價值。本研究采用免疫組織化學檢測胃癌及毗鄰癌旁胃粘膜組織中核基質結合區結合蛋白1(special AT-rich sequence-binding protein 1，SATB1)，并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集四川省人民醫院病理科2015年1月至6月間手術切除并病理診斷明確為胃腺癌的97例患者，其中男78例，女19例，年齡31～81歲，中位年齡63歲；中高分化44例，低分化53例；腫瘤未侵及漿膜者20例，侵及漿膜或漿膜外者77例；淋巴結轉移72例，無淋巴結轉移25例。根據美國腫瘤-淋巴結-轉移(tumor node metastasis，TNM)分期標準，Ⅰ期+Ⅱ期22例，Ⅲ期+Ⅳ期75例。術前均未行放射治療或化學治療。另選取距離腫瘤5 cm以上正常胃黏膜組織20例作為對照。

1.2 試劑 SATB1(產品編號：BIO66710兔抗人多克隆抗體)購自英國beacomBio公司，Envision法免疫組織化學試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自DAKO公司。

1.3 免疫組織化學染色 取經10%甲醛固定，石蠟包埋的存檔蠟塊，4 μm連續切片，56 ℃烤片2 h后經二甲苯連續脫蠟3次，每次10 min，100%，90%，85%乙醇脫二甲苯各5 min，水洗后進行Envision免疫組織化學染色。具體步驟如下：①水洗，pH6.0檸檬酸鹽修復液高壓修復3 min；②水洗，3%H2O2阻斷內源性過氧化物酶10 min；③水洗，Harris蘇木素復染10 s；④PBS緩沖液洗片，滴加SATB1(工作濃度1∶3000)一抗置于4 ℃冰箱孵育過夜；⑤次日用PBS緩沖液洗片，滴加DAKO公司Envision(K5007)二抗，37 ℃孵育30 min；⑥PBS緩沖液洗片，DAB顯色，光鏡下控制顯色時間，入水終止反應；⑦常規脫水，封片。染色步驟嚴格按照要求進行，用PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性切片作為陽性對照。

1.4 判定標準 SATB1主要定位于細胞核，出現棕黃色顆粒為陽性表達，SATB1判讀采用二級計分法。按陽性細胞的比例計分：陽性細胞0～5%為0分，5%～10%為1分，10%～50%為2分，>50%為3分。按染色強度計分：無色為0分，淡黃色為弱染色計1分，黃色或深黃色為中度染色計2分，黃褐色或棕褐色為強染色計3分。將上述兩項得分結果相乘：<3分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。均在不了解臨床資料的情況下閱片。

1.5 統計學方法 采用SPSS 22.0統計軟件包進行數據分析。計數資料比較采用卡方檢驗，相關性用Spearman相關分析，P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SATB1在胃癌及癌旁組織中的表達 免疫組化檢測顯示，SATB1陽性表達均位于細胞核，呈棕黃色顆粒。SATB1在胃癌組織的陽性表達率為60%(59/97)，癌旁正常組織中呈極弱陽性或陰性，陽性表達率僅為10%(2/20)，差異有統計學意義(P< 0.05)，見圖1、圖2。

圖1 SATB1在胃腺癌中的表達(Envision法) a：陽性(×100)； b：陽性(×40)；c：陰性(×100)

圖2 SATB1在癌旁正常胃黏膜組織中陰性表達，Envision法(×100)

2.2 胃癌SATB1的表達與臨床病理參數特征的關系 SATB1表達與患者的年齡、性別、腫瘤直徑、分化程度等無相關性(P> 0.05)。浸及漿膜或漿膜外組和未及漿膜組的陽性表達率分別為66.2%和40%，差異有統計學意義(χ2=4.585，P=0.032)；有淋巴結轉移組和未發生淋巴結轉移的陽性表達率分別為68%和40%，差異有統計學意義(χ2=6.130，P=0.013)；TNM分期Ⅲ+Ⅳ期和Ⅰ+Ⅱ期的陽性表達率分別為66.7%和40%(χ2=4.736，，P=0.030)。SATB1在胃癌中的陽性表達與腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移、病理TNM分期密切相關(P< 0.05)，見表1。

表1 97例胃癌SATB1表達與臨床病理特征的關系

3 討論

SATB1 是一種組織特異性表達的核基質結合區結合蛋白，在胸腺細胞中顯著表達。SATB1位于3號染色體3p23區，全長763個氨基酸，包含2個CUT序列，可以通過形成類似盤狀同源區域的二聚體，以非常高的親和力與核基質區相結合，進而調節DNA結合能力和胞核內亞結構的定位，并招募染色質重建因子，通過影響染色質高級結構從而實現對目標基因表達的時空特異性調控，從而進一步調節細胞分化，凋亡，腫瘤生長與轉移。

Han等在2008年首次報道了SATB1與腫瘤的關系，他們檢測到24種乳腺上皮細胞，僅在侵襲性的乳腺細胞中檢測到了SATB1 mRNA和蛋白的表達。研究發現，SATB1能對涉及腫瘤發生的1000多種基因的表達進行調控，包括控制黏附性，細胞周期，細胞外基質，信號通路，細胞間連接和凋亡的基因等，因而被稱為“基因組織者”。SATB1能上調腫瘤生長基因的表達，同時下調抑癌基因[2]。在接下來的幾年中，已經有報道SATB1在各種實體腫瘤中過表達與預后及臨床病理參數之間的關系，比如結腸癌的研究中，發現SATB1的高表達與結直腸癌的TNM分期，腫瘤浸潤深度，淋巴結轉移和預后不良等因素密切相關。這些發現都提示SATB1在結腸癌的發生發展起重要作用[3～5]，此外還有報道稱在肝癌[6]，子宮內膜癌[7]，卵巢癌[8]，前列腺癌等的異常高表達與這些腫瘤浸潤轉移密切相關。

本實驗研究采用免疫組化檢測了97例胃癌組織中SATB1的表達，結果發現59例胃癌SATB1陽性(60%)，而在20例癌旁正常胃黏膜組織中SATB1陽性率僅為10%。胃癌組織中SATB1的高表達與腫瘤病理分期以及浸潤深度，淋巴結轉移呈密切相關，提示SATB1在胃癌晚期發生浸潤及轉移的過程中起到了重要作用，胃癌SATB1的表達與腫瘤的發生，發展進程，預后密切相關，提示SATB1可能會成為預測早期胃癌的惡性程度和潛在轉移傾向的新指標，用于患者腫瘤的治療方案和預后評估提供依據，具有十分重要的臨床意義。

[1] 劉科. 核基質結合蛋白SATB1對胃癌生物學行為的影響及其機制研究[D].華中科技大學，2010.

[2] 譚曉虹，岑洪，郭保平，等. 乳腺癌組織中特異AT序列結合蛋白1的表達及臨床意義[J]. 實用醫學雜志，2012，28(1)：83-85.

[3] 陳翠敏，江丹，丁彥青，等. 結腸癌組織中SATB1的表達及其臨床意義[J]. 診斷病理學雜志，2012，19(2)：140-143.

[4] 畢洪鐘，王偉，胡敏敏，等. 特異性核基質結合區結合蛋白1在消化系腫瘤中的研究進展[J]. 世界華人消化雜志，2014，22(1)：67-73.

[5] 高超，朱艷卿，劉穎，等. SATB1基因在結直腸癌中的表達及其臨床意義[J]. 腫瘤防治研究，2013，40(2)：159-163.

[6] 李光輝，楊定華，李湘竑，等. SATB1在不同侵襲潛能肝癌細胞株的表達[J]. 南方醫科大學學報，2012，32(7)：986-990，994.

[7] 楊興杰，張杰，牛娜，等. SATB1與ER、PR在子宮內膜樣腺癌中的表達及臨床意義[J]. 實用醫學雜志，2012，28(6)6：948-950.

[8] 趙曉蘭，王平. SATB1、BRMS1在書卵巢漿液性腺癌中的表達及其與臨床病理特征的關系[J]. 四川大學學報(醫學版)，2011，42(1)1：82-85，105.

SATB1 expression in gastric cancer and relationship between the expression and clinicopathologic characteristics

XU Ying，DONG Dan-dan，LI Ke，LI Fang-hua

(Department of Pathology，Sichuan Academy of Medical Science & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

Objective To investigate the expression of nuclear matrix combining area binding protein 1(SATB -1)in gastric cancer tissues and the relationship between the expression and clinicopathologic characteristics.Methods The expression of SATB-1 in 97 samples of gastric cancer tissue and 20 samples of tissue adjacent to carcinoma were measured by using Envision method of immunohistochemistry.Spearman analysis was used to explore the relationship between the expression and clinicopathologic characteristics.Results The positive rate of SATB1 protein expression in the cancer tissue was 60% that was higher than that of tissue adjacent to carcinoma (10%)(P< 0.05).The positive rate of SATB1 expression in gastric cancer was significantly associated with lymph node metastasis，tumor infiltration depth and clinical TNM stage (P< 0.05)，but not associated with age，gender and tumor size (P> 0.05).Conclusion The high expression of SATB1 in gastric cancer tissue indicates the high gastric malignant degree and late clinical stage with a potential lymph node metastasis and poor prognosis.Therefore，detection of SATB1 expression can be used as a novel marker for screening the risk of gastric cancer metastasis，making the treatment plan and predicting the prognosis.

Gastric cancer； SATB1；Immunohistochemistry

R361

A

1672-6170(2016)02-0060-03

2015-11-06；

2016-01-06)