板藍(lán)根有效成分的測(cè)定及比較*

黎艷光，梁青云，梁真寶，李海怡

(吉林大學(xué)珠海學(xué)院，廣東珠海 519100)

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板藍(lán)根有效成分的測(cè)定及比較*

黎艷光，梁青云，梁真寶，李海怡

(吉林大學(xué)珠海學(xué)院，廣東珠海 519100)

摘要：本實(shí)驗(yàn)用不同溶劑提取板藍(lán)根中靛藍(lán)和靛玉紅，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定出各提取液中靛藍(lán)與靛玉紅的含量，從而得出提取靛藍(lán)和靛玉紅效果最好的溶劑，最后得出靛藍(lán)靛玉紅在75%乙醇溶液中有較高的溶解度。

關(guān)鍵詞：板藍(lán)根，靛藍(lán)，靛玉紅，紫外分光光度計(jì)

板藍(lán)根在我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)史上應(yīng)用歷史悠久，《神農(nóng)本草經(jīng)》上品欄中有“藍(lán)實(shí)”記載。當(dāng)今，板藍(lán)根制劑用量之大，堪稱中成藥之最。板藍(lán)根性寒味苦，有清熱解毒、涼血消腫之功效，臨床廣泛用于抑菌、抗病毒、抗血小板聚集、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等方面，近年有發(fā)現(xiàn)有抗內(nèi)毒素的作用[1]。靛藍(lán)和靛玉紅作為板藍(lán)根的主要有效成分，同時(shí)在評(píng)價(jià)板藍(lán)根制劑的質(zhì)量時(shí)，靛藍(lán)和靛玉紅作為板藍(lán)根制劑的質(zhì)控指標(biāo)。為了提高板藍(lán)根的利用率，本實(shí)驗(yàn)采用了四氫呋喃、75%乙醇、三氯甲烷分別作為溶劑進(jìn)行了提取板藍(lán)根中的有效成分的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，并用UV法測(cè)定提取液中靛藍(lán)和靛玉紅的含量，從而得出靛藍(lán)和靛玉紅在哪種溶解劑中溶解度最好。

1實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1材料與試劑

板藍(lán)根，購(gòu)于廣東省珠海市金灣區(qū)三灶鎮(zhèn)壯音藥店；靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品，上海源葉生物科技有限公司；四氫呋喃，分析純，鄭州廣杰化工有限公司；無(wú)水乙醇，分析純，鄭州廣杰化工有限公司；氯仿，分析純，鄭州廣杰化工有限公司。

1.2儀器

蒸餾裝置，實(shí)驗(yàn)室自制；回流裝置，實(shí)驗(yàn)室自制；索氏提取器，實(shí)驗(yàn)室自制；DHT型磁力攪拌電熱套，山東省菏澤市祥龍電子科技有限公司；九陽(yáng)料理機(jī)，九陽(yáng)有限公司；UV-2450紫外分光光度計(jì)，日本島津公司；DHG-9140A型恒熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技儀器有限公司。

2方法與結(jié)果

2.1材料處理

精密稱取3份各為10 g的干燥板藍(lán)根粗粉，并過(guò)40目篩。[2]

2.2靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品的配制

稱取5mg的靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品，分別置兩個(gè)100mL容量瓶中，加四氫呋喃溶解并定容。

分別取上述靛藍(lán)溶液0.3mL、0.35mL、0.4mL、0.45mL于5mL容量瓶中，用四氫呋喃定容，即靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

再分別取上述靛玉紅溶液1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL于5mL容量瓶中，用四氫呋喃定容，即靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.3樣品的配制

稱取3份10g的板藍(lán)根粉末分別加入50mL圓底燒瓶，再分別加入25mL四氫呋喃、 25mL氯仿、25mL 75%乙醇溶液[3]，回流4h，減壓過(guò)濾，蒸餾后置5mL容量瓶定容，最后各稀釋5倍。

2.4吸收曲線的繪制

在紫外-可見分光光度計(jì)上，以四氫呋喃為空白對(duì)照，分別對(duì)靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，得到吸收曲線，確定靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品最大吸收波長(zhǎng)。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用四氫呋喃調(diào)零作參比，于靛藍(lán)最大波長(zhǎng)處測(cè)定3.0μg/mL、3.5μg/mL、4.0μg/mL、4.5μg/mL靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，于靛玉紅最大波長(zhǎng)處測(cè)定10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值A(chǔ)，最后以A對(duì)c作圖，繪制工作曲線(見圖1、圖2)。

圖1　靛藍(lán)的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2　靛玉紅的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.6樣品濃度的測(cè)定

分別在最大波長(zhǎng)度測(cè)定樣品的吸光度值，并讀出濃度。

2.7實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、表2。

表1　紫外分光光度法測(cè)樣品中靛藍(lán)濃度數(shù)據(jù)表

表2　紫外分光光度法測(cè)樣品中靛玉紅濃度數(shù)據(jù)表

2.8結(jié)果分析

從表1可以看出，在溶劑中提取靛藍(lán)的濃度由高到低為75%乙醇、四氫呋喃、氯仿。從表2中可得知，不同溶劑中所提取的靛玉紅的濃度由高到低為75%乙醇、四氫呋喃、氯仿。

3小結(jié)與討論

靛藍(lán)靛玉紅在75%乙醇溶液中有較高的溶解度，相比之下，四氫呋喃、氯仿提取的效果沒(méi)那么好，因此，建議使用75%乙醇作為提取劑，既經(jīng)濟(jì)實(shí)惠毒性小，有利于生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)，今后在提取大量的靛藍(lán)和靛玉紅可使用75%乙醇作為提取劑。靛藍(lán)和靛玉紅有抗內(nèi)毒素、抗癌等功能性作用，除了制成板藍(lán)根顆粒外，綜合靛藍(lán)和靛玉紅的性質(zhì)，在其他劑型開發(fā)將有很大的發(fā)展空間。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉云海，吳曉云，方建國(guó)，等.板藍(lán)根化學(xué)成分研究[J].中南藥學(xué)，2003，1(5)：302-305.

[2] 張建軍，薄少英，張玉霞，等.板藍(lán)根提取工藝的探討[J].中國(guó)中藥雜志，1990，15(5)：287-289.

[3] 劉依，韓魯佳，閻巧娟，等.板藍(lán)根中靛藍(lán)和靛玉紅的提取及其質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，8(6)：5-8.

Determination of Active Ingredients of Radix Isatidis and Comparison

LI Yan-guang，LIANG Qing-yun，LIANG Zhen-bao，LI Hai-yi

(Zhuhai College of Jilin University，Zhuhai 519100，Guangdong，China)

Abstract：This experiment uses different solvents to extract the indigo and indirubin from indigowoad root. Determining the content of the indigo and indirubin in each extract solvent which can conclude the solution that extract most content of indigo and indirubin with ultraviolet spectrophotometer.Finally it is concluded that the indigo and indirubin have higher solubility in 75% ethanol solution.

Key words：indigowoad root，indigo，indirubin，ultraviolet spectrophotometer

*基金項(xiàng)目：廣東省大學(xué)生科技創(chuàng)新培育專項(xiàng)資金(NO：pdjh2015b0931)；2015年度大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃院級(jí)項(xiàng)目(NO：DC2015007)

中圖分類號(hào)：R 927.2