不同高危型HPV檢測在宮頸癌早期篩查中的應用

2016-06-21 02:15:08許美權吳俊輝黃新翼

中國民族民間醫藥 2016年9期

許美權　吳俊輝　黃新翼

1.深圳大學第一附屬醫院病理科，廣東　深圳　518000；2.深圳市婦幼保健院病理科，廣東　深圳　518000

許美權1吳俊輝1黃新翼2

1.深圳大學第一附屬醫院病理科，廣東深圳518000；2.深圳市婦幼保健院病理科，廣東深圳518000

【摘要】目的：探討兩種高危型HPV檢測在宮頸癌早期篩查中的實施效果。方法：選擇宮頸癌患者80例作為研究對象，對其實施HC2-HPV-DNA(第二代雜交捕獲技術)與PCR(聚合酶鏈式反應)方法進行高危型HPV檢測。觀察對比兩組檢測方法對高危型HPV的診斷結果。結果：本組80例患者均經病理診斷確診，經PCR檢測HPV陽性率為90.00%，明顯低于HC2-HPV-DNA檢測的100.00%，差異具有統計學意義(P<0.05)；HC2-HPV-DNA檢測的敏感度、特異度分別為100.00%、100.00%，均高于PCR檢測的90.00%、87.50%(P<0.05)。結論：相較于PCR檢測，HC2-HPV-DNA技術更適于宮頸癌早期篩查，診斷準確率更高，適于臨床應用。

【關鍵詞】PCR；HC2-HPV-DNA；HPV檢測；宮頸癌；早期篩查

宮頸癌是婦科臨床常見的惡性腫瘤之一。近年來，隨著女性生活方式的變化，該病的發生率顯著上升，且有向年輕化擴增的趨勢，給其健康帶來了嚴重的影響[1]。目前，臨床普遍認為人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌主要的致病原因[2]。所以強化HPV檢測的符合率，并對感染者盡早采取干預措施是預防宮頸癌的關鍵。HC2-HPV-DNA(第二代雜交捕獲技術)與PCR(聚合酶鏈式反應)方法是檢驗HPV的主要方法，其中前者是美國FDA唯一認證的HPV實驗室診斷方法，具有生物安全性強及診斷結果準確等特點[3]。本研究通過分析HC2-HPV-DNA與PCR方法在臨床中應用效果，旨在探尋宮頸癌早期篩查的可靠方法，并以此完善防治措施。現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2014年5月至2015年5月期間于我院收治的宮頸癌患者80例，年齡25～60歲，平均年齡(44.5±5.3)歲。入組標準：所有患者均經病理檢查確診；有性生活史；患者對本次研究知情，已簽署知情同意書。排除標準：子宮切除史；合并宮頸管增生、宮頸糜爛及宮頸充血者；急性生殖道炎癥；盆腔放射治療；3d內沖洗過陰道或給陰道上藥或3個月內應用過性激素治療；妊娠期女性。

1.2方法

1.2.1采集標本采集本組患者的標本，采集前有如下幾點注意事項：24h內無性行為；3d內未采取過陰道沖洗或陰道上藥操作；取樣前未采取過任何婦科疾病治療；非月經期。采樣時將醮有生理鹽水的拭子拭凈宮頸，去除多余分泌物，通過窺器充分暴露宮頸口，用棉拭子在宮頸管內鱗柱上皮采樣，并順時針旋轉兩周，以便獲取到宮頸脫落細胞。最后將拭子浸入到保存液中，充分漂洗，放置于2～8℃的冰箱內待檢。

1.2.2設備與儀器HC2-HPV-DNA設備與試劑盒均由美國Digene公司提供，試劑盒注冊號：國食藥監械(進)字2009第3402244號；PCR檢測試劑盒由深圳港龍生物技術有限公司提供，批準文號：國食藥監械(準)字2011第3400935號。

1.2.3檢驗方法參照《中華婦產科學》[4]中的對HPV陰性、陽性診斷標準，評估兩種檢測方法的診斷效果。①PCR：根據HPV的L1基因靶序列制定高度特異的探針與引物，測定13種高危型HPV的DNA，具體操作方法嚴格參照試劑說明書執行。陰性標準：低于500拷貝/ml；陽性標準：500拷貝/ml 或以上。②HC2-HPV-DNA：通過試劑盒測定宮頸口脫落細胞中13種高危型HPV的DNA，具體操作方法嚴格參照試劑說明書執行。陰性標準：低于1.0pg/ml；陽性標準：1.0pg/ml或以上。

1.3觀察指標觀察對比兩組檢測方法對高危型HPV的診斷結果，診斷敏感度與特異度。

2結果

2.1兩組檢測方法對高危型HPV的診斷結果對比本組80例患者均經病理診斷確診，經PCR檢測HPV陽性率為90.00%，顯著低于HC2-HPV-DNA檢測的100.00%，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1　兩組檢測方法對高危型HPV的診斷結果對比

注：與PCR檢測方法比較，*P<0.05。

2.2兩種檢測方法對高危型HPV的診斷敏感度與特異度對比HC2-HPV-DNA檢測的敏感度、特異度分別為100.00%、100.00%，均高于PCR檢測的90.00%、87.50%(P<0.05)。見表2。

表2　兩種檢測方法對高危型HPV的診斷敏感度與特異度對比(%)

注：與PCR檢測方法比較，*P<0.05。

3討論

宮頸癌屬于女性生殖系統的常見惡性腫瘤，其發病率呈逐年遞增的趨勢。所以，采取有效的診療方法控制宮頸癌的發生、發展，降低其死亡率十分必要。目前，臨床認為HPV感染是導致宮頸癌的主要病因，且HPV持續性感染是宮頸癌起病、進展的重要標志物[5]HPV普遍存在于自然界中，且HPV病毒種類約有100余種，但多數病毒均不致病，能夠通過自身免疫系統進行清理，僅有部分病毒有致癌性[5]。研究發現，當體內持續存在HPV感染時，它與宮頸癌高危因素，例如：激素、肥胖、吸煙、多胎、早育及沙眼衣原體、巨細胞病毒、單純皰疹病毒等病原體混合感染及作用下，才能誘發宮頸癌[5]。根據HPV病毒的致病情況可將其分為高危型與低危型兩種，其中高危型HPV與宮頸癌的發生、發展具有密切的相關性，而消除高危型HPV可以有效降低宮頸癌的發生風險，對防治宮頸癌具有重要的意義。

異常細胞宮頸涂片篩查是診斷宮頸癌的主要方法，盡管宮頸細胞涂片有效提高了HPV的檢測率，但其自身卻有一定的局限性，主要表現為：對于腺體病變方面的診斷敏感度較低；重復性差，不同醫師觀察涂片可發現不同結果；無法預測疾病的潛在風險性，對細胞學正常的受試者無法預測其一年或兩年后得病的風險性；假陽性結果較多，而對假陽性受試者的情況進行追蹤與檢查能夠消耗掉許多醫療資源，造成資源浪費。近期研究發現，宮頸涂片即使在最佳條件下，其準確度也僅算作中等，且對宮頸癌前病變與宮頸癌監測的敏感度也相對較低[6]。所以，探尋一種檢測準確率更高的方法來完善宮頸癌篩查工作十分必要[7]。

目前，HC2-HPV-DNA與PCR是臨床用于測定高危型HPV的主要的方法[8]。其中HC2-HPV-DNA是美國FDA唯一認證的宮頸癌篩查方法，其原理是通過捕獲RNA抗體并以化學發光法將信號放大來觀察高危型HPV的存在，而PCR則是通過DNA擴增技術來測定高危型HPV[9]。相較于PCR技術，HC2-HPV-DNA的優勢主要表現為：①操作方法簡便；②無實驗交叉作用，降低了結果的假陽性反應，可靠性更強；③無酶抑制反應，降低了結果的假陰性反應；④操作過程中不會造成病毒復制，所以安全性較佳。本研究中，PCR檢測HPV陽性率為90.00%，顯著低于HC2-HPV-DNA檢測的100.00%(P<0.05)，這與相關報道結果一致[10-11]。此外，HC2-HPV-DNA檢測的敏感度、特異度也均高于PCR檢測方法(P<0.05)。從檢測原理來看，HC2-HPV-DNA應用了信號放大技術與探針技術，避免了PCR檢測過程中DNA錯配與交叉反應的假陽性，所以結果可靠性更強。雖然高危型HPV感染是宮頸癌的重要致病原因，但不能說明所有高危型HPV陽性患者均患有宮頸癌。所以，HC2-HPV-DNA技術無法完全取代宮頸活檢、TCT及宮頸涂片等檢查，但可作為評估宮頸癌風險的重要手段。

綜上所述，相較于PCR檢測，HC2-HPV-DNA技術更適于宮頸癌早期篩查，診斷準確率更高，適于臨床應用。

參考文獻

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