前列腺癌組織中Glypican-3蛋白的表達及意義

李 勇，趙新鴻，孟曉東，陳 濤，劉 健，邱建宏

(中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院泌尿外科，河北 石家莊 050082)

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·論 著·

前列腺癌組織中Glypican-3蛋白的表達及意義

李 勇，趙新鴻，孟曉東，陳 濤，劉 健，邱建宏*

(中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院泌尿外科，河北 石家莊 050082)

目的探討磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3(Glypican-3，GPC-3)蛋白在前列腺癌組織中的表達及意義。方法選取前列腺癌和前列腺增生組織各30例標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)SP法染色，分析GPC-3蛋白在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達情況。 結(jié)果GPC-3蛋白在前列腺癌組織中的陽性表達率高于前列腺增生組織(P<0.05)，Gleason評分≥7分的前列腺癌組織中GPC-3蛋白的陽性表達率高于Gleason評分<7分者(P<0.05)。結(jié)論GPC-3蛋白在前列腺癌組織中高表達，可能與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。

前列腺腫瘤；前列腺增生；磷脂酰肌醇蛋白聚糖類

隨著人口老齡化、飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣的改變，我國前列腺癌的發(fā)病率和病死率呈逐年上升的趨勢，已成為嚴(yán)重影響我國老年男性身體健康的疾病之一[1]。目前對于前列腺癌標(biāo)志物的研究進展相對緩慢，無法滿足臨床需求，因此尋求更多有效輔助前列腺癌診斷的腫瘤標(biāo)志物意義重大。磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3(Glypican-3，GPC-3)定位于人類染色體X26.1，基因組結(jié)構(gòu)全長大于900 kb，可編碼580個氨基酸的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量約為66 000[2]。GPC-3是硫酸乙酰肝素糖蛋白家族的一員[3]。目前認(rèn)為 GPC-3的HS鏈與生長因子及其受體、細胞外基質(zhì)蛋白等大量生物效應(yīng)分子相互作用，參與調(diào)節(jié)細胞形態(tài)和各種細胞行為(黏附、增殖、遷移和分化等)[4-5]。研究發(fā)現(xiàn)GPC-3基因的表達變異與多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)，尤其對原發(fā)性肝癌的診斷具有重要意義，其特異性高于甲胎蛋白[6]。本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測GPC-3蛋白在前列腺癌和前列腺增生組織中的表達，旨在分析GPC-3蛋白能否成為輔助診斷前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取1998年8月—2012年6月中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院泌尿外科前列腺癌和前列腺增生組織各30例標(biāo)本。前列腺癌組30例，年齡56～89歲，平均(71.0±7.8)歲；前列腺體積13.89～192.20 mL，平均(73.3±18.3) mL；血清總前列腺特異性抗原(prostate specific antigen，PSA)6.6～177.0 μg/L，平均(51.8±12.4)μg/L; Gleason評分≥7分26例，Gleason評分<7分4例；臨床分期Ⅰ～Ⅱ期22例，Ⅲ～Ⅳ期 8例。前列腺增生組30例，年齡43～79歲，平均(69.8±6.2)歲；前列腺體積13.84～189.20 mL，平均(75.1±22.3) mL；血清PSA 1.8～15.3 μg/L，平均(4.3±1.7) μg/L。2組年齡、前列腺體積比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 石蠟標(biāo)本4 μm切片連續(xù)切片，采用免疫組織化學(xué)SP法進行染色，同時設(shè)置陽性對照和陰性對照，以試劑盒自帶的陽性片免疫組織化學(xué)染色結(jié)果為陽性對照，以磷酸緩沖鹽替代一抗的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果為陰性對照。光鏡下觀察GPC-3的表達情況。

1.3 結(jié)果判定 采用半定量計分法判定，選取5個高倍鏡視野(×400)，按切片中陽性細胞比例分別記0～4分：陽性細胞≤5%為0分，>5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%～75%為3分，>75%為4分；按染色深淺分別記0～3分，染色深度以多數(shù)細胞為準(zhǔn)，無陽性細胞為0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；陽性細胞的百分率得分與免疫組織化學(xué)染色強度的得分的乘積分成4個等級：0分為(-)，1～ 2分為(+)，3～ 4分為(++)，5～ 12分為(+++)，最終(-)和(+)記為低表達，(++)和(+++)記為高表達[7]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

GPC-3蛋白在前列腺增生組織中陽性表達較少，少量細胞的細胞質(zhì)著色，染色淺，呈黃色或淺黃色顆粒(圖1)；GPC-3蛋白在前列腺癌組織中陽性表達較多，大量細胞的細胞質(zhì)著色，染色較深，呈深黃色或棕褐色顆粒(圖2)。

GPC-3蛋白在前列腺癌組織中的高表達率高于前列腺增生組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；GPC-3蛋白在Gleason評分≥7分前列腺癌組織中的高表達率高于Gleason評分<7分者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1， 2。

圖1 GPC-3蛋白在前列腺增生組織中的表達(免疫組織化學(xué) ×400)

Figure 1 Expression of GPC-3 in benign prostatic hyperplasia tissue(immunohistochemistry ×400)

圖2 GPC-3蛋白在前列腺癌組織中的表達(免疫組織化學(xué) ×400)

Figure 2 Expression of GPC-3 in prostate cancer tissue(immunohistochemistry ×400)

表1 GPC-3蛋白在前列腺增生和前列腺癌組織中的表達

表2 不同Gleason評分前列腺癌組織中

3 討 論

目前，前列腺癌的早期診斷和治療仍是泌尿外科學(xué)者們研究的熱點。本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測GPC-3蛋白在前列腺癌和前列腺增生組織中的表達情況，探索GPC-3蛋白成為前列腺癌腫瘤標(biāo)志物的可能性。

文獻報道，GPC-3蛋白在肝癌等腫瘤組織中高表達，與肝癌等腫瘤的關(guān)系密切[8]。Toretsky等[9]認(rèn)為GPC-3可以作為輔助診斷肝癌的腫瘤標(biāo)志物。Song等[10]研究認(rèn)為在肝癌細胞中GPC-3蛋白通過自分泌和旁分泌的方式激活經(jīng)典或非經(jīng)典Wnt信號通路，刺激Wnt基因表達。Wnt基因產(chǎn)物具有促進組織細胞增殖及惡變的作用[11]。本研究結(jié)果顯示，GPC-3蛋白在前列腺癌組織中的陽性表達率明顯高于前列腺增生組織。說明 GPC-3蛋白在前列腺組織中高表達時，組織癌變可能性較大，GPC-3蛋白與前列腺癌的發(fā)生有關(guān)。

Takahashi等[12]認(rèn)為Wnt信號通路的異常激活可誘導(dǎo)前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展。Peng 等[13]用免疫組織化學(xué)和計算機圖像分析檢測肝細胞癌組織標(biāo)本中GPC-3基因表達情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肝細胞癌組織中GPC-3基因表達水平隨著腫瘤分化程度的降低而升高。Capurro 等[14]發(fā)現(xiàn)Wnt基因產(chǎn)物可促進Wnt信號通路與其特異受體結(jié)合形成復(fù)合物，從而刺激腫瘤組織增殖和導(dǎo)致腫瘤細胞惡性程度升高并持續(xù)增殖。而且Wnt基因產(chǎn)物可以刺激核轉(zhuǎn)錄因子κB途徑，能夠與有些基因上的啟動子結(jié)合，從而啟動基因轉(zhuǎn)錄[15-16]。本研究結(jié)果顯示，GPC-3蛋白在不同分化程度的前列腺癌組織中陽性表達率不同，前列腺癌細胞分化程度越差,陽性表達率越高。說明GPC-3蛋白高表達可能與前列腺癌的分化、惡性程度有關(guān)[17]。

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Expression and significance of Glypican-3 in prostate cancer

LI Yong, ZHAO Xin-hong, MENG Xiao-dong, CHEN Tao, Liu Jian, QIU Jian-hong*

(Department of Urology, Bethune International Peace Hospital, Shijiazhuang 050082, China)

Objective To investigate the expression and significance of glypican-3(GPC-3) in prostate cancer. Methods A total of 30 cases of prostate cancer tissues and 30 cases of benign prostatic hyperplasia tissues were included in the study with the immunohistochemical S-P method to detect the expression of GPC-3 in prostate cancer and benign prostatic hyperplasia. Results The positive rates of GPC-3 expression in prostate cancer tissues was significantly higher than that in benign prostatic hyperplasia tissues(P<0.05). The positive rates of GPC-3 expression in prostate cancer tissues with gleason score equal to or more than 7 was significantly higher than that with gleason score less than 7(P<0.05). Conclusion High expression of GPC-3 in prostate cancer may play an important role in development of prostate cancer.

prostatic neoplasms； prostatic hyperplasia； glypicans

2015-03-06；

2016-02-03

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點課題(20150370)

李勇(1985-)，男，黑龍江綏化人，黑龍江省綏化市第一醫(yī)院醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事泌尿外科疾病診治研究。

*通訊作者。E-mail：hpyyqiujh@163.com

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.04.007

R737.25

A

1007-3205(2016)04-0397-03

趙麗潔)