復發性自然流產患者宮頸分泌物中生殖支原體與解脲脲原體的檢測及臨床意義

謝 婧 焉彩霞 劉志敏 龍千祥

復發性自然流產患者宮頸分泌物中生殖支原體與解脲脲原體的檢測及臨床意義

謝 婧 焉彩霞 劉志敏 龍千祥

目的 觀察復發性自然流產患者宮頸分泌物中生殖支原體（Mg）和解脲脲原體(Uu)的檢出情況，從而分析其在復發性自然流產（RSA）中的作用。方法 回顧性分析48例自然流產患者的宮頸分泌物標本，采用PCR檢測宮頸分泌物中Mg和Uu情況，并納入同期50例自愿人工流產者的臨床標本作為對照。結果 48例RSA患者中Mg和Uu DNA檢出率分別為18.8%（9例）和29.2%（14例），其中Mg合并Uu感染者6例，構成比為12.5%。對照組其Mg檢出率為4%（2例），Uu檢出率為22%（11例），Mg合并Uu感染1例，感染率2%。2組Mg陽性率比較差異有統計學意義（χ2=5.347，P＜0.05），而Uu檢出率差異無統計學意義（χ2=0.6619，P＞0.05）。結論 Mg感染和RSA密切相關，而單純Uu感染可能并不是導致RSA發生的因素。

生殖支原體；解脲脲原體；復發性自然流產

復發性自然流產（recurrent spontaneous abortion，RSA）指連續發生2次或2次以上的自然流產。其病因目前尚未完全明了，生殖系統解剖結構異常、遺傳免疫因素以及微生物感染是RSA發生的重要原因[1-2]。研究表明，生殖系統沙眼衣原體、弓形蟲、支原體感染可能是RSA發生的重要因素[3]，但隨著研究的深入后發現，以往認為能引起人類致病的某些支原體如解脲脲原體、微小脲原體、發酵支原體等可能是人體的正常菌群或機會致病菌，因此其在RSA中的確切作用存在爭議。本研究旨在觀察RSA患者宮頸分泌物中生殖支原體（mycoplasma genitalium，Mg）和解脲支原體（ureaplasma urealyticum，Uu）的檢出情況，從而進一步分析其在RSA中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年10月～2014年7月衡陽市中心醫院產科收集的48例自然流產患者為研究對象?；颊吣挲g19～36歲，平均（24.6±5.5)歲，孕周7～15周。自然流產3～5次。所有納入患者均無生殖器官畸形、惡性腫瘤、遺傳性疾病、代謝與免疫性疾病。同時選取同期前來本院行人工流產的正常孕婦50例作為對照組。這些孕婦既往無自然流產史，年齡22～38歲，平均（25.5±4.5）歲，孕周6～11周。人流1～4次。2組患者一般資料比較差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 方法 采用PCR法檢測宮頸分泌物中Mg和Uu DNA。宮頸標本的獲取選擇在流產前1 W（自然流產）或流產后1個月（人工流產）內進行。外陰采用常規方法消毒后，用無菌棉簽擦拭宮頸口分泌物，隨后用專用拭子插入宮頸口內1～2 cm并停留20～25 s后，旋轉2～3圈后取出，置于含有1.5 mL生理鹽水的無菌試管內，隨后按照大連寶生物有限公司提供的PCR反應試劑盒檢測Mg和Uu DNA。本研究所采用的引物如下。Mg（MgPa）：5’-AGTTGATGAAACCTTA ACCCCTTGG-3’，5’-CCGTTGAGGGGTTTTCCATTTTTGC-3’，產物長度為282bp；U u（尿素酶基因），5’-A C G A C G T C C A T A A GCAACT-3’，5’-CAATCTGCTCGTGAAGTATTAC-3’，產物為429 bp。DNA擴增產物經2%瓊脂糖凝膠電泳后，紫外檢測儀上觀察結果，若在Marker對應的位置出現條帶，則判定為結果陽性。

同時，獲取刮宮后的絨毛及蛻膜組織行病理學檢查，觀察比較2組絨毛膜炎情況。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件分析處理數據，計數資料采用（n）表示，行χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 RSA患者宮頸分泌物中Mg和Uu檢出情況 RSA組患者中共檢測出Mg陽性9例，Uu陽性14例，分別構成比為總數的18.8%和29.2%。對照組中Mg陽性2例，Uu陽性11例，分別構成比為總例數的4%和22%。經統計學分析，2組Mg陽性率有統計學意義（χ2=5.347，P＜0.05），而2組Uu檢出率差異無統計學意義（χ2=0.6619，P＞0.05）。見表1。

表1 宮頸分泌物中Mg和Uu陽性例數（n）

2.2 2組患者絨毛膜炎癥與Uu感染情況比較 RSA組的14例Uu陽性標本中，9例病理學檢查絨毛膜炎陽性，34例標本Uu陰性標本中絨毛膜炎12例，差異無統計學意義（χ2=3.387，P＞0.05）。而對照組11例Uu陽性標本中絨毛膜炎標本3例，29例Uu陰性標本中絨毛膜炎8例，差異無統計學意義（χ2=0.043，P＞0.05），表明Uu與絨毛膜炎無統計學意義。見表2。

表2 2組分泌物中Uu陽性與絨毛膜炎癥關系（n）

3 討論

復發性自然流產是指連續發生2次或2 次以上的自然流產。研究表明，病原微生物感染是導致RSA的重要因素，Uu屬支原體目脲原體屬，微生物是由Shepard于1954年首先從非淋菌性尿道炎患者的尿道分泌物中分離獲得。有研究表明，Uu為性傳播疾病的主要病原體之一，在男女泌尿生殖道有很高的攜帶率（60%～70%），主要通過性接觸和母嬰傳播?？梢餘GU、前列腺炎、附睪炎、女性陰道炎、盆腔炎、宮頸炎、男女不孕、不育等泌尿生殖道感染。女性生殖道Uu感染可引起自發性流產、早產、死胎等不良妊娠，同時可導致新生兒敗血癥、支氣管肺炎及腦膜炎等中樞神經系統致死性的感染[4]。尤其是妊娠期孕婦由于體內內分泌改變，機體固有免疫功能有所降低，因此大大增加了Uu等菌群的感染幾率。但目前有關Uu與RSA的觀點仍存在爭議。支持Uu導致RSA的觀點認為，Uu上行感染后，可誘導子宮內膜分泌一系列細胞因子與介質，導致局部炎癥反應的發生，從而影響胚胎植入以及母體耐受，從而導致自然流產的發生[4-5]。而相反的證據則表明，有研究顯示,Uu感染與RSA并非因果關系，且并不增加自然流產的發生率。在本研究當中，我們發現RSA患者宮頸分泌物標本中Mg的檢出率明顯高于對照人群，與文獻報道一致，表明Mg是引起RSA的重要因素[3]。而Uu在2組人群中的檢出率并無統計學意義，這表明Uu感染可能并不是導致RSA發生的原因。本文同時也證實，RSA患者與正常人群中Uu感染與絨毛膜炎也無統計學意義。因此，Uu的確切致病作用需要重新評估。這表明Uu可能是下生殖道的條件致病菌，孕婦在孕期抵抗力較低，寄生于生殖道的Uu可由正常攜帶狀態變為感染狀態[6]。但單純的Uu可能并不足以導致RSA等不良妊娠的發生。有研究發現，Uu感染的同時可能伴有其他細菌感染，因此造成了Uu是導致RSA的假象[7]。此外，Uu的不同學清型、感染濃度和感染后機體的免疫狀態等也是直接影響了妊娠的結局。因此，對于無臨床癥狀的Uu感染，并不一定需要抗生素治療[8]。而對于有癥狀患者，建議給予大環內酯類抗生素口服，以免造成RSA。

[1] 張華坤,劉慶芝,謝建生,等.封閉抗體缺失與不同類型復發性自然流產關系分析[J].實用婦產科雜志,2015,31(10):787-789.

[2] 鐘小燁,崔艷萍.復發性自然流產 150例病因分析[J].當代醫學,2012,18(23):86-87.

[3] Nigro G,Mazzocco M,Mattia E,et al.Role of the infections in recurrent spontaneous abortion[J].J Matern Fetal Neonatal Med,2011,24(8):983-989.

[4] Naessens A,Foulon W,Cammu H,et al.Epidemiology and pathogenesis of ureaplasma urealyticum in spontaneous abortion and early preterm labor[J].Acta Obstet Gynecol Scand,1987,66(6):513-516.

[5] Donders GG,Van Bulck B,Caudron J,et al.Relationship of bacterial vaginosis and mycoplasmas to the risk of spontaneous abortion[J].Am J Obstet Gynecol,2000,183(2):431-437.

[6] Brion L,Alexander S,Clercx A,et al.Fatal ureaplasma infection in second twin born 60 days after delivery of the first in a patient with recurrent spontaneous abortion--a case report[J].J Perinat Med,1986,14(3):201-204.

[7] Ahmadi A,Khodabandehloo M,Ramazanzadeh R,et al.Association between Ureaplasma urealyticum endocervical infection and spontaneous abortion[J]. Iran J Microbiol,2014,6(6):392-397.

[8] Nigro G,Mazzocco M,Mattia E,et al.Role of the infections in recurrent spontaneous abortion[J].J Matern Fetal Neonatal Med,2011,24(8):983-989.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.10.032

湖南 421001 衡陽市中心醫院產科（謝婧 焉彩霞） 衡陽市中心醫院檢驗科 （劉志敏 龍千祥）