常規生化檢驗中循環酶法檢測血清同型半胱氨酸的臨床分析

徐連強 曹毅 曾玉瓊 王慧敏

常規生化檢驗中循環酶法檢測血清同型半胱氨酸的臨床分析

徐連強 曹毅 曾玉瓊 王慧敏

目的 探討循環酶法檢測血清同型半胱氨酸（Hcy）的臨床應用價值。方法 選取腦梗死、冠心病、高血壓患者及同期進行健康體檢的正常人各50例作為研究對象，采用常規生化檢驗中的循環酶法對所有入組對象進行血清Hcy檢測，分析各組的檢測結果。結果 循環酶法對血清Hcy檢測結果的批內變異系數為1.33%，批外變異系數為3.07%，平均回收率為99.4%；濃度＞10 mmol/L的VC、血紅蛋白水平＜1.5 g/L、濃度為380 μmol/L的膽紅素對檢測結果干擾較小。腦梗死組、冠心病組、高血壓組患者的血清Hcy水平均顯著高于對照組（P＜0.05），冠心病組的血清Hcy水平最高，顯著高于腦梗死組和高血壓組（P＜0.05）。結論 臨床應用循環酶法檢測血清Hcy，具有較高的精密度與靈敏度，抗干擾性好，檢測準確性較高，是臨床診斷各類心腦血管疾病的有效手段，具有重要的臨床價值。

血清同型半胱氨酸；循環酶法；生化檢驗

血清同型半胱氨酸（Hcy）是人體正常代謝的中間產物，是一種有著高反應活性的氨基酸，由于Hcy與血漿中的蛋白質有強的親合力，所以較少以游離狀態存在[1]。目前，已有研究證實，高Hcy血癥的發生主要與遺傳缺陷有關，是動脈血栓性疾病的一個獨立危險因素。近年來，在生化檢驗技術的不斷進步下，臨床對血清Hcy也有了更為深入的認識。循環酶法是臨床檢測血清Hcy的常用方法，本研究旨在明確循環酶法檢測血清Hcy的臨床應用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取江西省人民醫院2014年3月～2015年3月收治的腦梗死、冠心病、高血壓患者，以及同期進行健康體檢的正常人各50例作為研究對象。其中腦梗死組男27例，女23例，年齡42～83歲，平均（60.4±4.8）歲；冠心病組男26例，女24例，年齡44～79歲，平均（62.5±5.4）歲；高血壓組男29例，女21例，年齡33～80歲，平均（56.8±4.7）歲。對照組男25例，女25例，年齡45～81歲，平均（63.3±4.7）歲。在平均年齡、性別構成比方面，各組間比較差異均無統計學意義，具有可比性。

1.2 方法 4組研究對象均采用循環酶法進行血清Hcy檢測，血清Hcy的正常參考值為4.0～15.4 μmol/L。采集所有研究對象的晨起空腹靜脈血（3 mL），使用離心機以轉速3 000 r/ min離心10 min，分離上層血清待檢。血清Hcy檢測儀器選用HITACHI 7600-120全自動生化分析儀，校準液濃度分別為0.0 μmol/L（試劑1）、28.0 μmol/L（試劑2），質控液濃度分別為7.5、12.0、29.0 μmol/L。檢測參數：選用速率法，溫度37℃，主波與次波的波長分別為340、405 nm。取13.0 μL血清樣本，200 μL試劑1，反應600 s后，加入20 μL試劑2，反應180 s。采用兩點定標法進行校準。

1.3 統計學方法 運用統計學軟件SPSS 19.0處理數據，計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用“n，%”表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 循環酶法檢測的精密度分析 使用低值質控物、中值質控物、高值質控物進行血清Hcy測定，各測定20次，然后每天檢測1次，共測定20 d，得出循環酶法對血清Hcy測定的精密度，結果顯示，批內變異系數為1.33%，批外變異系數為3.07%。

2.2 回收率分析 取15.8 μmol/L血清標本，分別加入濃度為5.1和25.8 μmol/L的標準液中，計算出回收率分別為99.5%、99.3%，平均回收率為99.4%。

2.3 抗干擾性分析 （1）取不同濃度的VC，與同體積血清混合，采用循環酶法進行血清Hcy檢測，結果顯示，濃度＞10 mmol/L的VC對檢測結果無干擾；（2）配制濃度不同的血紅蛋白，與同體積無溶血血清混合，采用循環酶法檢測Hcy，結果顯示，血紅蛋白水平＜1.5 g/L對檢測結果干擾最小；（3）分別取0.1 mL濃度不同的膽紅素與0.9 mL的血清混合，采用循環酶法檢測Hcy，結果顯示，濃度為380 μmol/L的膽紅素對檢測結果干擾較小。

2.4 血清Hcy檢測結果對比 腦梗死組、冠心病組、高血壓組患者的血清Hcy水平均顯著高于對照組（P＜0.05）；冠心病組的血清Hcy水平最高，顯著高于腦梗死組和高血壓組（P＜0.05）；腦梗死組與高血壓組的血清Hcy水平比較，差異無統計學意義。見表1。

表1 4組研究對象的血清Hcy檢測結果比較（x±s）

3 討論

目前，臨床檢測血清Hcy的方法較多，如HPLC法、FPIA法、氨基酸分析儀法、酶學分析法、ELISA等[2]。HPLC是最為常用的一種方法，但其對設備要求較高，FPIA和ELISA法需在特異性的Hcy甲基轉移酶和S腺苷Hcy水解酶催化下將Hcy轉化為S腺苷Hcy，然后再水解為Hcy，反應過程十分復雜[3]。循環酶法是將氧化型Hcy轉化為游離Hcy，然后在CBS催化作用下，與絲氨酸反應生成L-胱硫醚，再在CBL催化下生成Hcy、NH 3和丙酮酸，該反應過程相對簡單[4]。通過進行抗干擾試驗、精密度檢測，發現循環酶法檢測血清Hcy的精密度、回收率均較高，抗干擾性較好，故本次研究就采用了循環酶法進行血清Hcy檢測。

大量臨床研究表明，心血管疾病的發生、發展與血清Hcy水平有著密切聯系，Hcy是心腦血管疾病的一個獨立危險因素[5]。有學者提出[6]，檢測血清Hcy水平，可以為臨床早期診斷、治療高血壓疾病，以及評估高血壓治療效果提供可靠依據。通過本次研究發現，高血壓患者的血清Hcy水平顯著高于正常人（P＜0.05）。這一結果與前述文獻報道結果相符。本次研究結果還顯示，腦梗死、冠心病患者的血清Hcy水平均顯著高于健康人，并且冠心病患者的血清Hcy水平最高，顯著高于腦梗死和高血壓患者的血清Hcy水平（P＜0.05）。這也證實了腦梗死、冠心病的發生與血清Hcy水平有著密切聯系，并且冠心病患者的血清Hcy水平上升最為顯著，臨床應對此引起高度重視[7-8]。

綜上所述，臨床應用循環酶法檢測血清Hcy，具有較高的精密度與靈敏度，且抗干擾性好，檢測準確性高，是臨床診斷各類心腦血管疾病的有效手段，具有重要的臨床價值。

[1] 席金甌,王維鵬.循環酶法檢測血清同型半胱氨酸的性能評價及臨床應用[J].中國婦幼保健,2012,27(10):1574-1575.

[2] 王興寧,雷光星,李慧,等.循環酶法測定同型半胱氨酸試劑盒評價[J].標記免疫分析與臨床,2014,21(3):318-320.

[3] 鐘白云,李臘秀,廖經忠,等.同型半胱氨酸與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的相關性研究[J].中國現代醫學雜志,2010,20(12):1802-1805.

[4] 焦文學,王潔.循環酶法雙試劑測定血清同型半胱氨酸的方法學評價[J].檢驗醫學與臨床,2012(18):2352-2353.

[5] 阮桂芝.同型半胱氨酸在臨床診治中的價值[J].國際檢驗醫學雜志,2010,31(10):1151-1152.

[6] 楊軍,張紅梅,朱元芳,等.自貢地區中老年人群循環酶法同型半胱氨酸水平調查[J].檢驗醫學,2012,27(5):418,423.

[7] 顏敏.同型半胱氨酸循環酶法自動分析儀測定的臨床應用研究[J].現代預防醫學,2012,39(12):3083-3084,3087.

[8] 梁紅梅,黃華,羅奇智,等.兩種方法學同型半胱氨酸水平正常值的臨床驗證及分析[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(22):2747-2748.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.25.031

江西 330006 江西省人民醫院檢驗科（徐連強 曹毅 曾玉瓊 王慧敏）