細(xì)胞蠟塊在惡性漿膜腔積液中的應(yīng)用*

陜西省腫瘤醫(yī)院病理科(西安710068)

丁彩霞　黃穎楠　張　娟　陸建榮　孫瑞芳△

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細(xì)胞蠟塊在惡性漿膜腔積液中的應(yīng)用*

陜西省腫瘤醫(yī)院病理科(西安710068)

丁彩霞黃穎楠張娟陸建榮孫瑞芳△

摘要目的：探討細(xì)胞蠟塊及免疫組化方法在漿膜腔積液診斷中的作用。方法：收集334例漿膜腔積液標(biāo)本，制作液基細(xì)胞學(xué)及細(xì)胞蠟塊，HE及免疫組化染色。結(jié)果：CR，Vim，CK5/6及D2-40在間皮瘤中有重要價(jià)值，CK7，CK20，Villin，TTF-1，NapsinA，CDX-2，MUC-2，CA125，ER，PR，GCDFP-15及mammaglobin在判斷腫瘤來源有特異性作用。結(jié)論：細(xì)胞蠟塊在惡性漿膜腔積液診斷中有重要價(jià)值，值得推廣。

主題詞@漿膜腔積液 @細(xì)胞蠟塊細(xì)胞診斷學(xué)

漿膜腔積液多見于轉(zhuǎn)移性腫瘤，常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片在鑒別增生的間皮細(xì)胞、間皮瘤、惡性腫瘤及判斷腫瘤來源有時(shí)存在非常大的困難，細(xì)胞蠟塊提供了個(gè)新思路。

資料與方法

1一般資料陜西省腫瘤醫(yī)院病理科2013～2014年間門診及住院病人漿膜腔積液334例，男性159例，女性175例，中位年齡65歲。

2方法

2.1液基細(xì)胞學(xué)制作：標(biāo)本沉淀30min取下部液體50～100ml倒入尖底離心管，離心5min，棄上清，吸出沉淀物。量少可反復(fù)多次離心。血性標(biāo)本提取中間層細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到小離心管，加細(xì)胞保存液，震蕩離心棄上清，上機(jī)。

2.2細(xì)胞塊制備:95%酒精固定，靜置30min，離心棄上清，加中性緩沖福爾馬林，收集細(xì)胞沉淀，常規(guī)取材制片。

2.3HE染色

2.4免疫組化染色:EnVision兩步法，抗體購自福州邁新公司。

結(jié)果

1HE診斷腺癌187例，小細(xì)胞癌15例，鱗狀細(xì)胞癌20例，間皮瘤7例，活檢與細(xì)胞學(xué)符合率99.1%。

2免疫組化結(jié)果

2.1腺癌細(xì)胞主要表達(dá):CK7及低分子量角蛋白(CKL)，CR,Vim，CK5/6有低表達(dá)率，鱗狀細(xì)胞癌主要表達(dá)P63,CK14,小細(xì)胞癌主要表達(dá)Syn,CD56，特異性標(biāo)記物CgA陽性率不高。惡性間皮瘤及間皮細(xì)胞主要表達(dá)CR,Vim,CK5/6,D2-40，但CKpan,CKH,CKL也有低陽性率,見表1。

表1　 惡性腫瘤免疫組化表達(dá)百分比

2. 2腺癌細(xì)胞來源主要來自于肺、胃腸道、卵巢及乳腺:結(jié)果見表2。

表2　不同組織來源各免疫組化表達(dá)百分比

討論

惡性漿膜腔積液中腺癌最多見，其次為小細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、淋巴瘤等。腺癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)上分為小細(xì)胞腺樣型、球形、乳頭狀、梁狀型、透明細(xì)胞型及單個(gè)腫瘤細(xì)胞散在分布等。細(xì)胞核顯著增大，約為間皮細(xì)胞4～5倍，核深染，可見奇異型核，核仁大，核膜清晰，病理性核分裂常見，核漿比倒置，胞質(zhì)內(nèi)常見空泡，細(xì)胞排列成團(tuán)、三維立體結(jié)構(gòu)或桑椹樣結(jié)構(gòu)明顯是腺癌的顯著特征[1]。腺癌細(xì)胞的特征在上皮樣間皮瘤中也可見到，二者鑒別很困難[2]。此時(shí)制作細(xì)胞蠟塊行免疫組化檢測是重要手段[3]。

細(xì)胞蠟塊制作的切片背景清晰，形態(tài)與組織學(xué)相似。免疫組化標(biāo)記時(shí)定位準(zhǔn)確，與液基制片結(jié)果互相對(duì)照，診斷證據(jù)更加充分。

以轉(zhuǎn)移灶漿膜腔積液就診的病人，制作細(xì)胞蠟塊給病人提供了很大的幫助。常見來源于肺、乳腺、卵巢、食管、胃腸道及間皮等[4]。CK7,TTF-1,NapsinA,CR,Vimentin,CK5/6,D2-40是常使用的抗體組。CK7,TTF-1,NapsinA通常會(huì)在肺腺癌中表達(dá)，而間皮細(xì)胞通常表達(dá)CR,Vimentin,CK5/6,D2-40。胃腸道來源腺癌中常使用CK7,CK20,Villin,CDX-2,MUC-2等一組抗體，卵巢原發(fā)粘液性腺癌中CK7,ER,PR等有指導(dǎo)意義，在漿液性腺癌中CA125,ER,PR,P53聯(lián)合應(yīng)用有價(jià)值，乳腺癌中則常選擇CK7,GCDFP-15,ER,PR,Mammaglobin等[5，6]。

細(xì)胞蠟塊HE切片和免疫組化結(jié)果明顯優(yōu)于常規(guī)細(xì)胞涂片[4]，后者細(xì)胞層數(shù)多，面積大，抗體不易勻稱加入，判讀困難。細(xì)胞蠟塊可永久保存，基因檢測及后續(xù)其它檢測均能正常進(jìn)行，病人免于活檢的痛苦，是一項(xiàng)值得推廣的項(xiàng)目。

參考文獻(xiàn)

[1]Huang CC.Cytomorphological features of metastatic squamous cell carcinoma in serous effusions[J]. Cytopathology，2014,25(2):112.

[2]Franceschini MC.Mesothelin in serum and pleural effusion in the diagnosis of malignant pleural mesothelioma with non-positive cytology[J]. Anticancer Res，2014,34(12):7425.

[3]Ugurluoglu C.Importance of the cell block technique in diagnosing patients with non-small cell carcinoma accompanied by pleural effusion[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2015,16(7):3057-60.

[4]K?ksal D.The cell block method increases the diagnostic yield in exudative pleural effusions accompanying lung cancer[J]. Turk Patoloji Derg,2013,29(3):165-70.

[5]Bhanvadia.Analysis of diagnostic value of cytological smear method versus cell block method in body fluid cytology:study of 150 cases[J]. Ethiop J Health Sci,2014,24(2):125.

[6]Ghosh I.Cell block cytology in pleural effusion[J]. J Indian Med Assoc,2012,110(6):390-396.

(收稿：2015-11-20)

Effusion of cell wax block application in malignant serous cavity

Department of Pathology, Shaanxi Provincial Tumor Hospital(Xi’an 710068)

Ding CaixiaHuang YingnanZhang Juan et al

ABSTRACTObjective:To investigate the role in the diagnosis in serous effusion by cell block.Methods:we collected 334 cases samples and made liquid based cytology and cell block,HE staining and immunohistochemical detection was carried out.Results:CR,Vim,CK5/6 and D2-40 have great value in mesothelioma. Combined CK20,Villin,TTF-1,CDX-2,MUC-2,CA125,ER,CK7,NapsinA,ER,PR,GC-DFP-15 and mammaglobin to judge the origin of carcinoma.Conclusion:The cell block is important for the diagnosis of malignant serous cavity effusion.

KEY WORDS@Dropsy of serous cavity@Cell wax blockCytodiagnosis

通訊作者:△西安交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系

【中圖分類號(hào)】R446

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.04.001

·論著·基礎(chǔ)研究·

*中國博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2014M552461)