化療栓塞術對中晚期肝癌患者血清TGF-β1、bFGF和VEGF的影響

李新峰, 符亞輝, 吳林波, 王勇強

(解放軍烏魯木齊總醫院 腫瘤科, 新疆 烏魯木齊, 830000)

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化療栓塞術對中晚期肝癌患者血清TGF-β1、bFGF和VEGF的影響

李新峰, 符亞輝, 吳林波, 王勇強

(解放軍烏魯木齊總醫院 腫瘤科, 新疆 烏魯木齊, 830000)

摘要:目的探討中晚期肝癌化療栓塞術(TACE)前后血清轉化生長因子-β1(TGF-β1)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和血管內皮細胞生長因子(VEGF)水平變化及其臨床意義。方法采用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)檢測肝癌患者TACE前后血清TGF-β1、bFGF和VEGF濃度的改變，并與健康人群比較。結果 肝癌患者TACE術后TGF-β1、bFGF和VEGF水平較術前均有升高，且高于健康人群，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)；治療前后血清TGF-β1水平與VEGF水平均呈顯著正相關(r=0.592，P<0.01；r=0.579，P<0.01)。結論肝癌患者TACE術后TGF-β1、bFGF和VEGF 3種促血管生長因子濃度的升高，對腫瘤血管和側支循環的形成具有重要作用，影響TACE的治療效果。

關鍵詞:肝癌; 肝動脈化療栓塞; 腫瘤生長; 促血管生長因子

肝癌是中國常見的惡性腫瘤之一，因其惡性度高、病情進展快，患者早期可無癥狀，一旦出現明顯癥狀，往往已屬中晚期，治療難度大、療效差，一般發病后生存時間僅為6個月[1]。肝動脈栓塞化療(TACE)是目前應用最廣泛、較為有效的治療方法，尤其針對手術不能切除的晚期肝癌[2-3]。盡管如此，由于TACE后腫瘤側支循環形成，TACE無法完全殺滅所有腫瘤細胞，短期內復發比較嚴重[4]。本研究通過觀察晚期肝癌化療栓塞術后血清轉化生長因子-β1(TGF-β1)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和血管內皮細胞生長因子(VEGF)水平變化，探討腫瘤血管形成在腫瘤TACE術中及術后的影響。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年1月—2015年10月解放軍烏魯木齊總醫院收治的87例中晚期肝癌患者設為觀察組，均符合第8屆全國肝癌學術會議上正式通過的“肝癌的臨床診斷與分期標準”[5]。其中男52例，女35例；年齡38～79歲，中位年齡54歲；預期生存時間>3個月；無嚴重肝、腎及骨髓功能障礙；無門靜脈及下腔靜脈侵犯；無嚴重肝細胞性黃疸、大量腹水、全身廣泛轉移、門靜脈主干完全栓塞。另選健康體檢者84例作為對照組，其中男53例，女31例；年齡35～74歲，中位年齡55歲。2組性別、年齡等一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1TACE：采用Seldinger技術經皮穿刺股動脈插管至肝動脈或分支，通過肝動脈造影了解腫瘤的部位、大小、供血情況以及有無動靜脈瘺等，再行灌注化療和栓塞術。選用化療藥物：絲裂霉素8 mg, 5-氟尿嘧啶1 000～1 500 mg, 順鉑60～80 mg; 并選用40%碘化油和絲裂霉素(MMC)10～20 mg配成混懸液作為栓塞劑，術后包扎壓迫止血。

1.2.2檢測方法：對照組于體檢時采集肘靜脈血5 mL, 觀察組分別于TACE前3 d和術后2周空腹取肘靜脈血5 mL, 促凝后離心分離血清，-20℃保存待測。血清TGF-β1、bFGF和VEGF濃度測定均采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，嚴格按照試劑盒說明書操作。TGF-β1和VEGF試劑盒均購自上海斯坦福生物科技發展有限公司，bFGF試劑盒購自上海恒遠生物科技有限公司。

1.3觀察指標

比較對照組及觀察組治療前后血清TGF-β1、bFGF和VEGF水平的變化，分析觀察組治療前后血清TGF-β1、bFGF水平與VEGF的相關性。

1.4統計學處理

2結果

2.12組血清TGF-β1、bFGF和VEGF水平比較

觀察組治療前后血清TGF-β1、bFGF和VEGF水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.01或P<0.01)；組內比較，觀察組治療后，VEGF和bFGF水平顯著高于治療前(P<0.05)。見表1。

表1　2組血清TGF-β1、bFGF和VEGF水平比較

與對照組比較, *P<0.05, **P<0.01; 與治療前比較, #P<0.05。

2.2觀察組治療前后血清TGF-β1、bFGF水平與VEGF的相關性

治療前血清TGF-β1水平與VEGF水平呈顯著正相關(r=0.592，P<0.01)，血清bFGF水平與VEGF水平無明顯相關性(r=0.097，P>0.05)；治療后血清TGF-β1水平與VEGF水平呈顯著正相關(r=0.579，P<0.01)，血清bFGF水平與VEGF水平無明顯相關性(r=-0.069，P>0.05)。

3討論

VEGF能促進新生血管的形成，在肝癌中高表達，對癌細胞生長和轉移具有極其重要的意義[6]。本研究亦證實，肝癌患者血清VEGF濃度顯著高于健康人群。目前醫學界認為，VEGF是最有效的促血管生長因子，主要作用于血管內皮細胞，促進大量腫瘤新生血管的形成，而且VEGF表達水平與其微血管密度及惡性程度成正相關，瘤體組織中表達水平明顯高于非腫瘤組織[7-8]。VEGF受體有多種，其中受體VEGFR-1是為造血干細胞的招募以及單核細胞、巨噬細胞的遷移工作需要，受體VEGFR-2調節血管內皮功能，VEGFR-3的調節淋巴管內皮細胞的功能[9]。VEGF高表達可導致腫瘤細胞增殖、遷移、生存和通透性增加[10]。VEGF與特定受體結合后，能促進內皮細胞有絲分裂，介導內皮細胞整聯蛋白的表達，導致大量血管腔形成。因此，TACE治療前血清高濃度的VEGF將預示患者對TACE不是很敏感，預后比較差。

bFGF是一種重要的促血管生成因子，其生物學作用極其廣泛，在血管形成、促進創傷愈合與組織修復、促進組織再生和神經組織生長發育過程中起著十分重要的作用[11]。bFGF在腫瘤相關血管內皮細胞生長調節方面也起關鍵性作用，能促進多種腫瘤細胞分裂和增殖[12-14]。本研究發現，TACE微創術后血清bFGF濃度偏高，可能的原因有: ① bFGF協同VEGF促進血管生長，由于VEGF和bFGF在腫瘤組織中表達上調，栓塞后肝癌組織細胞中缺血缺氧; ② TACE術后，可使局部腫瘤細胞大量壞死，導致外周bFGF釋放入血量增加。

TGF-β1是一種具有多種功能的蛋白多肽，屬于TGF-β超家族的一員。它在細胞生長、分化、免疫調節、炎癥和損傷修復等方面發揮著重要作用[15]。TGF-β1在早期可以促進腫瘤細胞凋亡，抑制腫瘤的增殖，但當腫瘤轉為中晚期時，它卻能促進腫瘤細胞的生長和大量繁殖。本研究結果也顯示，肝癌患者血清TGF-β1顯著高于健康人群，可能與TGF-β1 mRNA在原發性肝癌細胞中過度表達，大量的TGF-β1抑制機體的免疫反應，肝細胞膜受體的缺陷及smad4蛋白表達下調，導致TGF-β1無法抑制腫瘤細胞增殖有關。另外，本研究還發現，TACE術后TGF-β1較術前明顯升高，推斷可能的原因是TACE術后腫瘤細胞壞死，使TGF-β1釋放入血，從而導致血清中TGFβ1短期內顯著增加。

總之，肝癌患者TACE術后TGF-β1、bFGF和VEGF對腫瘤血管和側支循環的形成具有重要作用，該項目的檢測對TACE預后觀察具有一定的臨床實用價值。

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Influence of transcatheter arterial chemoembolization on serum TGF-β1, bFGF and VEGF levels of patients with advanced liver cancer

LI Xinfeng, FU Yahui, WU Linbo, WANG Yongqiang

(DepartmentofOncology,UrumqiGeneralHospitalofPeople'sLiberationArmy,Urumqi,Xinjiang, 830000)

ABSTRACT:ObjectiveTo investigate the changes of serum transforming growth factor-β1 (TGF-β1), basic fibroblast growth factor (bFGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) levels in patients with advanced liver cancer before and after transcatheter arterial chemoembolization (TACE) and evaluate their significance. MethodsThe levels of serum TGF-β1, bFGF and VEGF were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and compared with those in healthy controls. ResultsAfter TACE, the levels of serum TGF-β1, bFGF and VEGF were higher in patients with advanced liver cancer than before TACE, and compared with those in healthy controls, there were significant differences (P<0.05 or P<0.01). Serum TGF-β1 level was positively correlated with VEGF level before and after treatment (r=0.592, P<0.01；r=0.579, P<0.01). ConclusionThe increase of serum TGF-β1, bFGF and VEGF levels in patients with advanced liver cancer can promote the formation of tumor vessels and collateral circulation after TACE, which may affect the therapeutic effect of TACE.

KEYWORDS:liver cancer; transcatheter arterial chemoembolization; tumor growth; angiogenic growth factors

中圖分類號:R 735.7

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2016)09-054-03

DOI:10.7619/jcmp.201609015

通信作者:王勇強, E-mail: wyqandsy@163. com

基金項目:中國高校醫學期刊臨床專項資金(11525731)

收稿日期:2015-12-26