血清CD40、CD40L和基質金屬蛋白酶-9水平與頸動脈內膜中層厚度的相關性

馬清峰　李建軍　熊　亮　張　靜

(華中科技大學同濟醫學院附屬梨園醫院檢驗科，湖北　武漢　430076)

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血清CD40、CD40L和基質金屬蛋白酶-9水平與頸動脈內膜中層厚度的相關性

馬清峰李建軍熊亮張靜

(華中科技大學同濟醫學院附屬梨園醫院檢驗科，湖北武漢430076)

〔摘要〕目的觀察頸動脈粥樣硬化(CAS)患者頸動脈內膜中層厚度(IMT)、白細胞分化抗原40及其配體(CD40/CD40L)和基質金屬蛋白酶9(MMP-9)變化，探討上述指標之間的關系。方法選擇CAS患者94例，其中IMT增厚的有34例，頸動脈斑塊形成的有60例；健康體檢者20例(IMT正常組)。采用頸動脈超聲檢測實驗組和對照組IMT，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測兩組血清CD40、CD40L和MMP-9水平。結果隨著IMT的增厚，血清CD40、CD40L、MMP-9水平明顯升高(P<0.05)；有不穩定斑塊的CAS患者IMT及血清CD40、CD40L、MMP-9水平較穩定斑塊患者明顯升高，不穩定斑塊CAS患者腦梗死(CI)發病率高于斑塊穩定組(P均<0.05)。結論血清CD40、CD40L、MMP-9能促進CAS的形成和增厚，MMP-9能增加斑塊的不穩定性，導致CI的發生，監測血清CD40、CD40L、MMP-9水平，能用來預測CAS患者的IMT、斑塊的穩定性和疾病的預后。

〔關鍵詞〕頸動脈粥樣硬化；頸動脈內膜中層厚度；白細胞分化抗原40及其配體；基質金屬蛋白酶9

頸動脈內膜中層厚度(IMT)是目前公認的判定頸動脈粥樣硬化(CAS)的指標〔1〕，在臨床中，CAS是發生腦梗死(CI)的重要病因之一。在CAS發生、發展的過程中，有許多生物學指標參與其中，本試驗通過檢測血清白細胞分化抗原40及其配體(CD40/CD40L)、基質金屬蛋白酶9(MMP-9)水平的變化，探討CD40/CD40L、MMP-9與頸動脈斑塊的關系。

1資料與方法

1.1研究對象隨機抽取2012年4～12月在我院神經內科住院的老年CAS患者94例，年齡55～70歲；患者CI的診斷均符合2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南的診斷標準〔2〕。同時隨機選取20例健康體檢者作為對照組。

1.2儀器與方法IMT的測量：采用日本東芝Aplio XG(SSA-790A)全數字化彩色多普勒超聲診斷儀進行檢測，入選病例和健康體檢者均由經驗豐富的超聲醫師進行頸動脈超聲測量。測量部位：取頸總動脈遠端2.0 cm處、頸總動脈分叉處、頸內動脈及頸外動脈近端1.0 cm處等部位，多次測量IMT厚度，取均值。CAS的診斷標準：以2003年歐洲高血壓治療指南中IMT>0.9 mm確定為頸動脈粥樣硬化的診斷指標。兩組均采集空腹無抗凝血標本，離心分離血清后-20℃冰凍保存，以待同一批次待測。血清CD40、CD40L、MMP-9濃度的檢測采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法，試劑購自武漢博士德公司。

1.3分組方案根據IMT將94例CAS患者分成兩組，其中IMT增厚組(0.9 mm

1.4 統計學方法應用SPSS16.0行方差分析及χ2檢驗。

2結果

2.1不同IMT的患者血清CD40、CD40L、MMP-9水平比較隨著患者IMT的增厚，血清CD40、CD40L、MMP-9水平逐漸升高，IMT增厚組明顯高于對照組，斑塊形成組顯著高于IMT增厚組，各組間均有顯著性差異(P<0.05)，見表1。

2.2頸動脈斑塊的穩定性與血清CD40、CD40L、MMP-9水平的關系 頸動脈斑塊穩定組與無斑塊組相比，血清CD40、CD40L、MMP-9水平明顯增高(P<0.01)；頸動脈斑塊不穩定組與穩定組相比，血清CD40、CD40L、MMP-9的水平顯著增高(P<0.01)，見表2。

2.3頸動脈斑塊與CI相關性頸動脈無斑塊組CI發生率(3/34)遠低于頸動脈斑塊組(21/60，P<0.01)；頸動脈斑塊不穩定組CI發生率(11/21)高于頸動脈斑塊穩定組的發生率(10/39，P<0.05)。

表1不同IMT患者血清CD40、CD40L、MMP-9水平比較(x±s)

組別nCD40(pg/ml)CD40L(pg/ml)MMP-9(ng/ml)對照組2065.9±13.757.1±9.24.83±0.65IMT增厚組3497.0±15.91)83.0±14.71)5.55±0.821)斑塊形成組60208.4±21.82)172.3±16.32)10.15±1.742)

與對照組比較：1)P<0.05；與IMT增厚組比較：2)P<0.05

表2不同頸動脈斑塊組血清CD40、CD40L、MMP-9水平比較(x±s)

組別nIMT(mm)CD40(pg/ml)CD40L(pg/ml)MMP-9(ng/ml)頸動脈無斑塊組540.7±0.2179.2±19.168.2±17.15.09±0.73頸動脈斑塊穩定組391.54±0.291)163.8±20.11)131.5±16.51)7.48±0.591)頸動脈斑塊不穩定組212.59±0.472)279.9±34.92)227.9±19.12)12.83±0.792)

與頸動脈無斑塊組比較：1)P<0.05；與頸動脈斑塊穩定組比較：2)P<0.05

3討論

IMT是CAS進程中形態學上的最早證據，而且IMT與CAS嚴重程度密切相關，已成為公認的衡量頸動脈粥樣硬化的指標，可以用來預測發生心腦血管疾病的危險性和嚴重程度〔3〕，但IMT的測量受人為因素的影響較大。CD40屬于腫瘤壞死因了受體超家族成員〔4〕，正常動脈內皮細胞僅表達少量CD40，但當動脈內膜增厚時，內膜中的內皮細胞、平滑肌細胞和單核巨噬細胞表面表達CD40和CD40L的量明顯增高，CD40L能與這些細胞表面的CD40結合，結合后的CD40-CD40L系統能激活內皮細胞、血管平滑肌細胞及單核巨噬細胞，誘導內皮細胞和巨噬細胞表達黏附分子、釋放趨化因子及促進MMP-9的表達〔3,5〕等，產生有利于凝血及血栓形成的局部微環境。本文結果顯示，隨著IMT的增厚，血清CD40、CD40L、MMP-9水平不斷增高，增高的水平與IMT的厚度成正相關；由此可見，檢測血清CD40、CD40L、MMP-9水平可以用來衡量病患頸動脈內膜增厚的程度，再結合超聲檢查的結果，為IMT的判斷增加可信度，為醫生預測CAS患者疾病的嚴重程度提供可靠依據。

CAS的發生和發展，是多因素參與的、血管受損后的慢性炎性反應過程，許多炎性細胞及其分泌的細胞因子均參與了CAS的產生和進展〔6〕。CD40-CD40L系統是免疫和炎癥反應中重要的信號傳導系統，能夠刺激斑塊中內皮細胞MMP-9的表達，在CAS發病中起重要作用〔5,7〕；同時，伴隨斑塊形成的是細胞外基質的重構，在細胞外基質重構的過程中發生一系列炎癥反應，炎癥反應又進一步增加MMP-9的表達〔8〕。MMP-9屬于鋅離子依賴性蛋白酶超家族的一員，是一種能夠降解細胞外基質的蛋白水解酶，它通過消化粥樣斑塊纖維帽成分破壞斑塊結構，造成斑塊不穩定性增加，加速斑塊破裂，達到降解細胞外基質的作用；動脈斑塊MMP-9蛋白的表達上調，導致維持斑塊內MMP-9活性降低的金屬蛋白酶組織抑制劑的平衡被打破，動脈粥樣硬化斑塊趨向不穩定〔9〕。由本文結果可知，有斑塊病變者血清CD40、CD40L、MMP-9水平明顯高于無斑塊的健康對照者，隨著斑塊的不穩定性的增加，血清CD40、CD40L、MMP-9的水平進一步升高，說明血清CD40、CD40L、MMP-9水平在作為判斷斑塊厚度指標的同時，MMP-9還可作為反映斑塊穩定性的分子生物學指標。

不穩定斑塊指易于形成血栓的斑塊，不穩定斑塊由表面覆蓋薄薄的纖維帽的脂質構成，有大量包含單核巨噬細胞在內的炎癥細胞浸潤，平滑肌細胞少〔10〕；頸動脈粥樣斑塊的破裂、脫落是導致CI的主要病因，不穩定斑塊的存在大大增加了不測事件發生的概率〔11〕。由本文結果可知，在有不穩定斑塊的CAS患者中，CI的發病率遠高于CAS斑塊穩定的患者，MMP-9在預測斑塊穩定性的同時，同樣可以用來預測CI的發生概率。

綜上，血清CD40、CD40L、MMP-9水平可以作為判斷IMT的敏感生物學指標，CD40-CD40L系統和頸動脈斑塊發生發展過程中的炎癥反應可以上調MMP-9水平，導致CAS患者斑塊不穩定性的增加，斑塊不穩定性的增加導致更易發生CI；由此可見，血清CD40、CD40L、MMP-9水平還可作為判斷斑塊穩定性、預測CAS患者繼發CI概率的指標之一。

4參考文獻

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〔2013-12-09修回〕

(編輯安冉冉/曹夢園)

〔中圖分類號〕R446.62

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)08-1947-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.08.074

通訊作者：李建軍(1962-)，女，副主任護師，主要從事心腦血管疾病相關研究。

基金項目：湖北省自然科學基金資助項目(2011CDB369)

第一作者：馬清峰(1978-)，男，碩士，主管技師，主要從事心腦血管疾病相關研究。