丙泊酚與七氟醚麻醉對圍手術期患者外周血輔助性T淋巴細胞分化的對比研究

阮振華， 陳　誠， 錢　沂， 沙夕林

1.江蘇省如皋市人民醫(yī)院麻醉科，如皋　226500 2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院骨科，如皋　226500 3.江蘇省如皋市人民醫(yī)院感染管理科，如皋　226500 4.江蘇省如皋市人民醫(yī)院胸外科，如皋　226500

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·論著·

丙泊酚與七氟醚麻醉對圍手術期患者外周血輔助性T淋巴細胞分化的對比研究

阮振華1， 陳誠2， 錢沂3， 沙夕林4*

1.江蘇省如皋市人民醫(yī)院麻醉科，如皋226500 2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院骨科，如皋226500 3.江蘇省如皋市人民醫(yī)院感染管理科，如皋226500 4.江蘇省如皋市人民醫(yī)院胸外科，如皋226500

[摘要]目的： 探討丙泊酚與七氟醚麻醉下輔助性T淋巴細胞(helper T lymphocytes，Th)分化的差異性。方法： 選擇2010年10月—2015年1月?lián)衿谛醒甸g盤突出癥手術患者60例，隨機分為丙泊酚全憑靜脈麻醉組(丙泊酚麻醉組)和七氟醚吸入麻醉組(七氟醚麻醉組)，各30例。所有患者行無創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓監(jiān)測。于麻醉前、麻醉后、手術開始前、手術開始后、術后1 d采集外周靜脈血，檢測各組患者T細胞對γ-干擾素、白細胞介素4的表達，測定外周靜脈血中Th1細胞與Th2細胞的百分率，及Th1細胞與Th2細胞的比值。結果： 2組患者無創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓差異均無統(tǒng)計學意義。丙泊酚麻醉組患者術后1 d外周靜脈血Th1細胞百分率明顯高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；2組患者不同時間點外周靜脈血Th2細胞百分率差異均無統(tǒng)計學意義；丙泊酚麻醉組患者術后1 d外周靜脈血Th1細胞與Th2細胞比值高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論： 與七氟醚相比，丙泊酚能夠促進Th細胞向Th1細胞分化，對圍手術期患者具有一定的免疫保護作用。

[關鍵詞]輔助性T淋巴細胞；分化；麻醉；丙泊酚；七氟醚

圍手術期免疫功能的變化對手術患者的預后有著重要的影響。麻醉可以通過降低創(chuàng)傷手術的應激反應，間接影響機體的免疫功能；而麻醉藥物也作為一種異物或抗原直接作用于機體的免疫活性細胞，從而使患者機體免疫功能發(fā)生改變。手術應激增加了輔助性T淋巴細胞2(helper T lymphocyte 2，Th2)的分化，減少了輔助性T淋巴細胞1(helper T lymphocyte 1，Th1)的分化，從而使Th1/Th2的比例下降，細胞免疫功能受到抑制，不利于患者康復。不同的麻醉方法對應激反應的控制不同[1]，因此，對免疫功能的影響也不同。丙泊酚全憑靜脈麻醉是近年來應用較多的麻醉方法。本研究通過觀察丙泊酚全憑靜脈麻醉對輔助性T淋巴細胞(helper T lymphocyte，Th)分化功能的影響，并與七氟醚吸入麻醉比較，以探討丙泊酚全憑靜脈麻醉對圍手術期患者免疫功能的影響。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2010年10月—2015年1月在江蘇省如皋市人民醫(yī)院擇期行腰椎間盤突出癥手術患者60例，美國麻醉醫(yī)師協(xié)會(American Society of Anesthesiologists，ASA)分級Ⅰ級。將患者隨機分為丙泊酚全憑靜脈麻醉組(丙泊酚麻醉組)和七氟醚吸入麻醉組(七氟醚麻醉組)，各30例。丙泊酚麻醉組男性18例，女性12例，年齡25～60歲，中位年齡55歲；七氟醚麻醉組男性18例，女性12例，年齡25～60歲，中位年齡56歲。患者術前均無麻醉前用藥，術前無嚴重的心、肺、肝、腎、腦等系統(tǒng)性疾病，無感染、腫瘤及免疫系統(tǒng)等疾病，近期無輸血史，未接受免疫制劑治療。本研究經(jīng)江蘇省如皋市人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，并與患者簽署知情同意書。

1.2麻醉方法丙泊酚麻醉組采用丙泊酚靶控輸注5 μg/mL，靜脈注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸順式阿曲庫銨(0.2 mg/kg)進行麻醉誘導；麻醉維持采用丙泊酚靶控輸注4 μg/mL及間斷靜脈注射舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫銨。七氟醚麻醉組吸入七氟醚及靜脈注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸順式阿曲庫銨(0.2 mg/kg)進行麻醉誘導，麻醉維持采用吸入七氟醚及間斷靜脈注射舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫銨。2組舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫銨的量按照腦電雙頻指數(shù)(bispectral index，BIS)值進行調整，舒芬太尼每次追加量0.3 μg/kg，苯磺酸順式阿曲庫銨每次追加量0.03 mg/kg， 使BIS值維持在50～60。

1.3患者一般情況監(jiān)測患者手術期間均行無創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓監(jiān)測。

1.4免疫指標測定分別于麻醉前(T1)、麻醉后(T2)、手術開始前(T3)、手術開始后(T4)、術后1 d(T5)5個時間點采集外周靜脈血5 mL，加肝素抗凝，取1 mL經(jīng)無血清RPMI 1640培養(yǎng)液以等體積稀釋后加PMA及鈣離子通道激活劑，于37℃、5%CO2溫箱中孵育4 h后，加入藻紅蛋白(PE)標記的抗人CD3單克隆抗體(北京同立海源生物科技有限公司)及抗人CD8單克隆抗體(北京同立海源生物科技有限公司)，避光室溫孵育30 min，磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline，PBS)清洗2遍后，以1 000 r/min離心5 min，加入紅細胞裂解液作用15 min后，用PBS清洗2次，加入PE標記的抗γ-干擾素(interferon-γ，IFN-γ)抗體(美國Sigma公司)及異硫氰酸熒光素標記的抗白細胞介素-4(interleukin-4，IL-4)抗體(美國Sigma公司)，室溫孵育30 min后，PBS清洗、重懸后上機檢測。以CD3+CD8-IFN-γ+標識Th1細胞，以CD3+CD8-IL-4+標識Th2細胞，計算Th1細胞和Th2細胞所占的百分比，重復檢測5次，并計算Th1細胞與Th2細胞的比值。

2結果

2.12組患者一般情況2組患者圍手術期血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓比較，差異均無統(tǒng)計學意義。

2.2Th1細胞與Th2細胞百分比及其比值的比較丙泊酚麻醉組患者T5時間點外周靜脈血Th1細胞百分比高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；2組患者T1～T5時間點外周靜脈血Th2細胞百分比差異均無統(tǒng)計學意義；丙泊酚麻醉組患者T5時間點外周靜脈血Th1細胞與Th2細胞比值與七氟醚麻醉組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)見表1。

表1　2組患者不同時間點Th1細胞、Th2細胞百分比及Th1細胞與Th2細胞比值的比較 　n=30,

*P<0.05與七氟醚麻醉組比較

3討論

圍手術期免疫功能的變化對外科手術患者的預后有非常重要的影響[2]。外科手術后患者的膿毒血癥以及繼發(fā)的多器官功能障礙綜合征，是外科重癥監(jiān)護病房所面臨的棘手問題，也是術后患者的主要死亡原因之一[3]。另外，麻醉藥物作為一種異物直接作用于患者機體的免疫活性細胞，從而改變了患者的免疫功能。

丙泊酚全憑靜脈麻醉和七氟醚吸入麻醉是臨床常用的2種全身麻醉方式。丙泊酚起效時間快，而維持時間短，持續(xù)輸注也無明顯蓄積，具有蘇醒快而完全，不良反應小等優(yōu)點，目前廣泛應用于臨床。丙泊酚對機體免疫系統(tǒng)的調節(jié)作用十分復雜。需要指出的是，T淋巴細胞是介導特異性免疫的細胞，活化機制已經(jīng)成為免疫學研究的熱點[4]。CD4+T細胞又稱Th細胞，該細胞的表型為CD3+CD4+CD8-，是一種十分受人關注的機體免疫效應細胞。Th細胞在特異性抗原的刺激或在其他細胞因子的作用下會分化成Th1和Th2細胞。Th1、Th2細胞的極化問題是目前研究的熱點。患者麻醉后發(fā)生的Th1/Th2失衡問題也已受到人們的關注。本研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚能增加Th1細胞的百分比，但對于Th2細胞方向分化影響卻不明顯，結果導致Th1細胞/Th2細胞比值的增大，說明丙泊酚影響Th細胞的分化，并且促使其向Th1方向分化，最終誘發(fā)Th2極化效應，機體的這種細胞效應維護了圍手術期的免疫功能平衡。Th細胞被激活的信號轉導機制比較復雜，目前丙泊酚影響Th細胞分化作用的機制尚不清楚。

麻醉藥物能夠作為異物或抗原影響患者機體的免疫功能，所以麻醉藥物的合理選擇對患者免疫功能的維持具有重要的意義。本研究證明，丙泊酚較七氟醚能促進Th細胞向Th1方向分化，對患者的免疫功能具有保護作用。

參考文獻

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[2]畢振華,任波,董剛,等.丙泊酚聯(lián)合瑞芬太尼麻醉肝硬化患者圍手術期免疫功能的觀察[J].臨床麻醉學雜志,2013,29(3):232-234.

[3]Mariappan P,Smith G,Moussa SA,et al.One week of ciprofloxacin before percutaneous nephrolithotomy significantly reduces upper tract infection and urosepsis:a prospective controlled study[J].BJU Int,2006,98(5):1075-1079.

[4]姜曼,許桂蓮,黎萬玲,等.脫脂棉及尼龍棉柱分離純化T淋巴細胞的比較研究 [J] .免疫學雜志,2003,19(4):309-311.

[本文編輯]姬靜芳

Comparsion of propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia on differentiation of peripheral helper T lymphocytes in perioperative patients

RUAN Zhen-hua1, CHEN Cheng2, QIAN Yi3, SHA Xi-lin4*

1.Department of Anesthesiology, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 2.Department of Orthopedics, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 3.Department of Hospital Infection Management, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 4.Department of Thoracic Surgery, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China

[Abstract]Objective： To study the difference regarding differentiation of helper T lymphocytes(Th) between propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia.Methods： A total of 60 patients, who received selective lumbar disc herniation surgery during Oct. 2010 and Jan. 2015, were selected and divided into two groups randomly, the propofol group which received total intravenous anesthesia with propofol and the sevoflurance group which received inhalation anesthesia with sevoflurance, with 30 cases in each. The non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure were monitored in all patients.Peripheral venous blood was sampled before and after anesthesia,before and after surgery,and one-day after surgery,respectively.The T cell expression on interferon-γ and interleukin-4, the percentage of Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood, and the ratio between Th1 cell and Th2 cell were evaluated in each group.Results： There was no significant difference between the two groups regarding the non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure. The percentage of Th1 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery(P<0.05).There was no significant difference regarding the percentage of Th2 cell in peripheral blood between the two groups at different time point. The ratio between Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery (P<0.05).Conclusions： Compared with sevoflurance,propofol can preferably promote Th cell to differentiate into Th1 cell.Propofol may therefore have immunoprotective effect for patients during perioperative period.

[Key Words]helper T iymphocytes; differentiation; anesthesia; propofol; sevoflurance

[中圖分類號]R 614.1

[文獻標志碼]A

[作者簡介]阮振華，主治醫(yī)師.E-mail: jsntrzh@163.com*通信作者(Corresponding author).Tel: 0513-87312708，E-mail: 464246774@qq.com

[收稿日期]2015-10-04[接受日期]2016-02-18