不同濃度二甲雙胍對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠的保護(hù)作用

朱岱陽(yáng) 田文武 胡煌

【摘要】目的研究不同濃度二甲雙胍對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶的影響。方法成年健康小鼠50只，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為低濃度二甲雙胍脂肪乳劑組，中濃度二甲雙胍脂肪乳劑組，高濃度二甲雙胍脂肪乳劑組，脂肪乳劑組（LE），正常對(duì)照組（NC）。喂養(yǎng)4W周后取材固定，血清進(jìn)行谷丙轉(zhuǎn)氨酶谷草轉(zhuǎn)氨酶生化檢測(cè)。結(jié)果高濃度二甲雙胍組小鼠ALT、AST明顯低于對(duì)照組和脂肪乳劑組，二甲雙胍組的肝臟脂肪變程度輕于高脂組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。提示高劑量的二甲雙胍對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠肝損傷有明顯的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】二甲雙胍；非酒精性脂肪肝；小鼠；肝損傷；保護(hù)作用

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是臨床常見(jiàn)的肝病，是引起肝纖維化和肝硬化的前期病變之一。[1]以往在西方國(guó)家十分常見(jiàn)，目前國(guó)際上NAFLD領(lǐng)域的研究十分活躍，最新進(jìn)展包括對(duì)NAFLD概念的更新。[2]由于NAFLD發(fā)病的隱匿性，其具體的發(fā)病機(jī)制目前仍不清楚，"二次打擊"學(xué)說(shuō)在其中的重要地位已得到一致認(rèn)可。[3]，二次打擊主要為細(xì)胞色素P450酶系活性增強(qiáng)、鐵沉積、促炎細(xì)胞因子水平升高等機(jī)制，產(chǎn)生氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化作用對(duì)肝臟進(jìn)行二次打擊，導(dǎo)致已脂肪變性的肝細(xì)胞進(jìn)一步氣球樣變和壞死。Chudhury等[4]目前已成為臨床治療2型糖尿病伴有代謝綜合癥的一線藥物。二甲雙胍聯(lián)合飲食控制可以明顯降低NAFLD患者的ALT、AST和GGT，WMD值，二甲雙胍可以加快NAFLD患者ALT、AST和GGT生化指標(biāo)的恢復(fù)，并可以明顯改善胰島素抵抗。[5]二甲雙胍可通過(guò)減少肝臟葡萄糖輸出，提高胰島素的敏感性，改善胰島素抵抗等作用降低血糖。[6]本研究使用二甲雙胍對(duì)大小鼠非酒精性脂肪肝進(jìn)行干預(yù)，從而觀察其保護(hù)作用。

一、材料與方法

1.材料：成年健康小鼠50只，雌雄各半，體重質(zhì)量（25±2）g，高脂飼料，蒸餾水，二甲雙胍，谷丙轉(zhuǎn)氨酶試劑盒，谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑盒。

2.儀器：722型分光光度計(jì)，恒溫水浴鍋，離心機(jī)。

3.分組及造模：先將成年健康的清潔級(jí)雄性小鼠50只隨機(jī)分為5組，進(jìn)行分組灌胃給藥：①低濃度二甲雙胍脂肪乳劑組：予基本飼料、脂肪乳劑5ml/kg-1·d-1灌胃，等體積二甲雙胍100mg/kg-1·d-1，4？。（10只）②中濃度二甲雙胍脂肪乳劑組：予基本飼料、脂肪乳劑5ml/kg-1·d-1灌胃，等體積二甲雙胍156mg/kg-1·d-1（由成人劑量1.5g/d換算），4？。（10只）③高濃度二甲雙胍脂肪乳劑組：予基本飼料、脂肪乳劑5ml/kg-1·d-1灌胃，等體積二甲雙胍200mg/kg-1·d-1，4？。（10只）④脂肪乳劑組（LE）：予基本飼料、脂肪乳劑5ml/kg-1·d-1灌胃，4？。（10只）⑤正常對(duì)照組（NC）：予基本飼料、蒸餾水5ml/kg-1·d-1灌胃，4？。（10只）。

4.觀察指標(biāo)及測(cè)定：喂養(yǎng)4W周后取材固定，觀察其模型建立并檢測(cè)小鼠肝臟的血液生化指標(biāo)測(cè)定：眼球取血后即分離血清，測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶。

5.分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。

二、結(jié)果

高濃度二甲雙胍組小鼠ALT、AST明顯低于對(duì)照組和脂肪乳劑組，二甲雙胍組的肝臟脂肪病變程度輕于高脂組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。提示高劑量的二甲雙胍對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠肝損傷有明顯的保護(hù)作用。（見(jiàn)表一）

小鼠血清AST，AUT水平

三、討論

非酒精性脂肪肝是脂質(zhì)在肝臟沉積過(guò)多的病理狀態(tài)，是代謝綜合征在肝臟的局部表現(xiàn)，目前認(rèn)為與胰島素抵抗（IR）有關(guān)，體內(nèi)許多組織均含有谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST），其中ALT主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)，AST主要存在于心肌，其次為肝臟。當(dāng)肝細(xì)胞有損害時(shí)由于肝細(xì)胞壞死，細(xì)胞膜通透性增加，這兩種酶即可大量滲入血液，而使血中酶活性增高。所以血清中這兩種轉(zhuǎn)氨酶活性的增高在一定程度上反映了肝細(xì)胞損害和壞死的程度。本研究研究的是不同濃度二甲雙胍對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠肝損傷的影響，通過(guò)從生化指標(biāo)檢測(cè)的角度可以判斷二甲雙胍在小鼠非酒精性脂肪肝形成的過(guò)程顯示了有效的保護(hù)作用。

【參考文獻(xiàn)】

[2] 沈峰， 范建高； 美國(guó)非酒脂肪性肝病診療（J）， 中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志.2012.15（4）.65-66.

[3]吳昳，田江，徐翠玲；非酒精性脂肪性肝病的危險(xiǎn)因素分析（J），當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2012.18（17）：110-113.

[4]Choudhury J，Sanyal AJ.Insulin resistance and the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease[J].Clin Liver Dis，2004，8（3）：575-94

[5]向毅，羅文杰；探討二甲雙胍治療非酒精性脂肪性肝病的療效（J），當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2012.18（17）：18-19.

通訊作者：鄭建軍