摘要:我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品,農(nóng)藥殘留超標(biāo)問(wèn)題普遍存在,并受到群眾及政府各相關(guān)部門(mén)的高度重視,它直接影響著人們的身體健康和農(nóng)產(chǎn)品的國(guó)際貿(mào)易,因此關(guān)于農(nóng)藥殘留的相關(guān)檢測(cè)技術(shù)已成為保證農(nóng)產(chǎn)品安全性和貿(mào)易正常化的關(guān)鍵。目前,我國(guó)一般采用酶抑制法對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè),本文對(duì)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的原理及影響檢測(cè)正確性的主要原因和相關(guān)應(yīng)對(duì)方法做以介紹。
關(guān)鍵詞:農(nóng)產(chǎn)品;農(nóng)藥殘留;準(zhǔn)確性;快速檢測(cè);影響
中圖分類(lèi)號(hào):S481.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:ADOI編號(hào):10.14025/j.cnki.jlny.2016.05.001
采用酶抑制法對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)具有快速高效、成本低、操作方便等優(yōu)點(diǎn),因此被廣泛的應(yīng)用在農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)領(lǐng)域,并收到了良好的檢測(cè)成效及社會(huì)效益。但是在實(shí)際操作過(guò)程中會(huì)發(fā)現(xiàn),酶抑制法容易受到不同因素的影響,致使檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性受到一定程度的影響。為了提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,只有對(duì)影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的相關(guān)原因進(jìn)行分析,并采取相對(duì)有效的技術(shù)措施進(jìn)行解決。
1農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法原理
酶抑制法的應(yīng)用原理是根據(jù)有機(jī)磷以及氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥通過(guò)對(duì)昆蟲(chóng)中樞及其他神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性抑制作用,降低神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿酯酶的活性,致使神經(jīng)正常傳導(dǎo)受到影響,直到昆蟲(chóng)因中毒而亡。酶抑制法正是利用昆蟲(chóng)毒理學(xué)這一原理,并將其運(yùn)用在了對(duì)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中。酶抑制法僅限于對(duì)蔬菜水果的有機(jī)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè),從農(nóng)產(chǎn)品中提取有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的液體中不存在或殘留量較小,不能抑制酶的活性,加入的基質(zhì)被水解后的產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)后產(chǎn)生顏色;反之,提取液中含有的殘留量較多,酶的活性被抑制,就可以通過(guò)變化后的顯色劑用分光光度計(jì)測(cè)定出吸光值,并隨時(shí)間的變化計(jì)算抑制率,從而對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留情況作出準(zhǔn)確的判斷。
2影響農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的相關(guān)因素
農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法因?yàn)槿菀妆桓鞣矫嬉蛩厮绊懀档土藱z測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。這種情況下要進(jìn)一步地分析影響因素,并采取相應(yīng)的技術(shù)手段進(jìn)行處理,從而保證農(nóng)產(chǎn)品快速檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2.1檢測(cè)試劑的影響
目前對(duì)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)主要使用的試劑有:緩沖液、酶、底物、顯色劑。以配置緩沖液為例,為了確保酶的活性,要用蒸餾水或是去離子水,絕不能用有雜質(zhì)的水,否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果有所偏差。
乙酰膽酯酶影響檢測(cè)結(jié)果,在高溫或低溫情況下,會(huì)降低酶的活性,從而影響到快速檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,在檢測(cè)過(guò)程中,要合理的控制好檢測(cè)室內(nèi)的溫度,保證檢測(cè)酶的活性。
2.2樣品前處理的影響
在對(duì)農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理過(guò)程中,必須要對(duì)樣品的碎片大小作出嚴(yán)格的要求,避免在對(duì)樣品的處理因樣品碎片較小,而發(fā)生檢測(cè)結(jié)果存在一定誤差的情況。同時(shí)由于酶抑制法只對(duì)蔬菜水果有效,所以在選取樣品的時(shí)候,要根據(jù)蔬菜水果的具體特性,合理的對(duì)樣品進(jìn)行處理。
2.3檢測(cè)儀器的影響
檢測(cè)儀器調(diào)試的影響:要時(shí)常校正分光度計(jì),在多個(gè)批次持續(xù)過(guò)后,在不同的環(huán)境溫度等條件下,要重新進(jìn)行調(diào)100%和做對(duì)照;另外也可以每個(gè)批次都做一次調(diào)試,更好地保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
比色皿的影響:具有較好透光度的比色皿可以降低檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)偏差,所以,要用乙醇對(duì)比色皿進(jìn)行定期清洗,在檢測(cè)樣品前對(duì)比色皿的兩個(gè)透光面,要用擦鏡紙擦拭。在使用時(shí),平行的兩個(gè)透光面垂直地放置在比色皿架上,以確保透光面被入射光垂直射到,防止損失反射光。在使用后,用水沖冼干凈后不能馬上使用,要在濾紙上倒置晾干后使用。
微量移液器的影響:一定要貼簽專(zhuān)用,防止交互使用形成污染,使用過(guò)的試劑也不要再放回試劑瓶中,以免污染。
2.4檢測(cè)員操作的影響
加入緩沖液的樣品,要緩慢的震蕩搖勻1~2分鐘,以免樣品被搖爛,蔬菜色素變多,分光光度計(jì)的測(cè)量被影響。檢測(cè)員用移液器時(shí)要注意,吸取時(shí)要輕按至第一停點(diǎn),吸頭伸入試劑液面下2~3毫米,輕緩松開(kāi)按鈕回原點(diǎn),提出吸頭要慢,在容器壁停留一會(huì)把多余試劑去除,輕按按鈕至第一停點(diǎn)把液體排出,過(guò)一會(huì)按至第二停點(diǎn)把吸頭排空。加入試劑時(shí)要注意垂直使用移液器,當(dāng)試劑在吸頭時(shí),不能把移液器平放或倒置,防止污染移液器、樣品等。等樣品加入底物后,要立即搖勻,放入儀器檢測(cè),避免檢測(cè)結(jié)果受影響。另外,要注意同一組樣品的放入和對(duì)照放入的時(shí)間要一樣。
2.5試驗(yàn)參數(shù)準(zhǔn)確性的影響
空白對(duì)照吸光度變化△A0值:通過(guò)抑制率可以反應(yīng)樣品的檢測(cè)結(jié)果,而△A0值的準(zhǔn)確度與其有直接關(guān)系。△A0值通常是由試劑廠商、環(huán)境溫度、測(cè)試儀器等條件的不同而發(fā)生變化的,△A0在0.3~0.9是正常的。如果△A0<0.3,表明酶的活性不足或是溫度過(guò)低,于是酶液和顯色劑加入后,相對(duì)的延長(zhǎng)放置反應(yīng)的時(shí)間,或早些在室溫下或培養(yǎng)箱中對(duì)試劑盒進(jìn)行培養(yǎng),提升酶的活性。如果△A0>0.9,表明乙酰膽堿酯酶對(duì)底物的水解反應(yīng)太快,需要縮短2~3分鐘的測(cè)試時(shí)間,保證對(duì)照的△A0的準(zhǔn)確性。
綜上所述,在實(shí)際檢測(cè)中有很多的因素可以影響到農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)結(jié)果,需要我們逐步的去了解,并積極地找出應(yīng)對(duì)方法,從而提高農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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作者簡(jiǎn)介:孫沫,本科學(xué)歷,公主嶺市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站,農(nóng)藝師,研究方向:土壤檢測(cè),農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)。