健康人群網織紅細胞參數及與成熟紅細胞參數的比較研究

張時民,宋雪冬

(1.中國醫學科學院北京協和醫學院北京協和醫院檢驗科，北京 100730;2.霸州市醫院檢驗科,河北霸州 065700)

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·論著·

健康人群網織紅細胞參數及與成熟紅細胞參數的比較研究

張時民1,宋雪冬2

(1.中國醫學科學院北京協和醫學院北京協和醫院檢驗科，北京 100730;2.霸州市醫院檢驗科,河北霸州 065700)

摘要:目的探討網織紅細胞的某些參數與成熟紅細胞相應參數間的關系。方法應用西門子Advia 2120血細胞分析儀對112例男性和110例女性健康體檢者進行多項網織紅細胞參數測定，確認參考范圍，并與成熟紅細胞5項相應的參數進行比對分析。結果納入研究者中，女性的網織紅細胞百分比(Retic%)、網織紅細胞絕對值(Retic#)、網織紅細胞平均血紅蛋白含量(CHr)、網織紅細胞平均體積(MCVr)的參考范圍分別為0.45%～1.76%、(22～86)×109/L、30.1～36.4 pg、99.5～113.7 fL；男性的這4項參數的參考范圍分別為0.54%～1.93%、(29～104)×109/L、32.6～36.6 pg、97.6～112.7 fL。網織紅細胞計數男性高于女性，差異有統計學意義(P<0.05)。MCVr明顯大于成熟紅細胞平均體積，且女性略高于男性；CHr明顯高于成熟紅細胞的平均血紅蛋白量，而體積較大的網織紅細胞內的平均血紅蛋白濃度則低于成熟紅細胞的平均血紅蛋白濃度；網織紅細胞體積分布寬度低于成熟紅細胞體積分布寬度；成熟紅細胞內血紅蛋白含量的均一性則比網織紅細胞內血紅蛋白含量均一性好。結論建立了網織紅細胞一些應用較少的參數的參考范圍并與紅細胞的相應參數進行了分析。

關鍵詞:網織紅細胞；血紅蛋白；紅細胞平均體積；紅細胞體積分布寬度

網織紅細胞是未成熟的紅細胞，雖然已經有文獻報道了不同類型血細胞分析儀測定網織紅細胞的參考范圍，但是仍有許多參數不被了解，如網織紅細胞平均體積(MCVr)，網織紅細胞平均血紅蛋白含量(CHr)，網織紅細胞平均血紅蛋白濃度(CHCMr)，網織紅細胞體積分布寬度(RDWr)和網織紅細胞血紅蛋白含量分布寬度(HDWr)等，特別是這些網織紅細胞的參數與成熟紅細胞之間的關系未見有報道。

網織紅細胞是有核的晚幼紅細胞脫核后到完全成熟之間的過渡型細胞。其胞質內仍然殘存有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質，可用煌焦油藍或新亞甲藍染液進行活體染色后，顯現其網狀結構后，在顯微鏡下觀察和計數。而傳統的Wright染色法可觀察呈現為嗜多色性紅細胞。網織紅細胞可根據紅細胞內網狀物質的形態進行初步分類，一般可分為4型。網織紅細胞自動化檢測技術是在近20余年中發展而來，特別是伴隨自動化血細胞分析儀的發展而來，其檢測技術和原理、試劑雖不相同，但其在檢測速度、精密度、多參數化等方面是一致的[1]。

其實在具有網織紅細胞分析功能的專用儀器和帶有網織紅細胞分析功能的血細胞計數儀器進入國內的初期，就已經有臨床應用和評價以及參考范圍的報道[2-3]，但因檢測成本較高，檢測例數相對較少，參數僅涉及網織紅細胞百分比(Retic%)、網織紅細胞絕對值(Retic#)、未成熟網織紅細胞(IRF)、網織紅細胞體積和低、中、高熒光強度網織紅細胞(即所謂的網織紅細胞分群)等參數。西門子Advia120/2120全自動血細胞分析儀是一款能提供白細胞6分類及網織紅細胞分析的高端儀器，其在網織紅細胞分析方面的能力表現卓越。它采用氧氮雜芑750(oxazine 750)染料對網織紅細胞染色，采用低角度散射光檢測網織紅細胞體積，高角度散射光信號測定網織紅細胞內血紅蛋白(Hb)濃度，吸收光測定法判斷網織紅細胞內RNA水平，可以顯示網織紅細胞測定參數和計算參數、散點圖和直方圖數十項，其中的Retic和Retic#、CHr、網織紅細胞分群即低中高吸光度的網織紅細胞比率也較為廣泛應用。但仍有許多具有研究價值的參數，例如MCVr、CHCMr、RDWr、HDWr等參數研究較少。本文對以上10項網織紅細胞參數進行測定，推薦建立網織紅細胞10項目參數的參考范圍，并結合相關的紅細胞參數進行比較研究，這對今后深入開展網織紅細胞相關的研究、臨床醫療實踐和應用會有很大幫助。

1資料與方法

1.1一般資料隨機選擇243例來自北京協和醫院體檢中心的健康體檢者，對這些體檢者進行初篩，排除患有貧血及血液系統疾病、腎臟病、消化道疾病等患者，其血常規檢查結果在全國臨床檢驗操作規程推薦的參考范圍內，最終篩選出222例納入研究。其中男112例，女110例；年齡分布：男性為20～65歲，女性為22～65歲。納入研究者血常規檢查中紅細胞相關參數[包括紅細胞計數(RBC)、Hb、平均紅細胞體積(MCV)、紅細胞分布寬度(RDW)、血紅蛋白分布寬度(HDW)]的分布范圍見表1，白細胞和血小板數量正常。

表1　　入組人群血常規結果分布范圍

1.2方法應用全自動血細胞分析儀ADVIA2120測定所有標本，該儀器已經校準，每日測定前完成高、中、低和網織紅細胞共5個質控標本的測定，結果在控。選定標本均采用自動進樣方式測定，最大限度克服實驗誤差，所有測定均在采血后4 h之內完成。本研究對網織紅細胞的10項參數進行測定和統計分析。為便于在文章中應用，筆者列出了這些分析參數的縮寫、中文名稱和測定單位見表2(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。

1.3統計學處理測定結果采用Excel2010軟件記錄并進行統計分析。計量資料的比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。選擇雙側95%百分位數法確認健康人網織紅細胞常規參數并將參數的P2.5～P97.5作為參考范圍。

2結果

2.1不同年齡人群3項參數的分析首先了解不同年齡組人群間Retic%、Retic#、Chr 3個參數是否存在差異，按照年齡分布將被檢者劃分為4個年齡段：20～<31歲、31～<41歲、41～51歲、>51歲。各年齡段人群間3個參數水平兩兩比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

2.2按性別分析10項網織紅細胞相關參數對110例女性和112例男性的測定結果分別進行統計。男女人群間，除高吸光度網織紅細胞百分比(Retic H%)，其他數據[包括中吸光度網織紅細胞百分比(Retic M%)、低吸光度網織紅細胞百分比(Retic L%)]在男、女性間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表3　　不同年齡人群Retic%、Retic#、Chr參數的

2.3不同性別人群的血液紅細胞各項參數分布范圍男性和女性紅細胞各項參數分布范圍，見表5。

2.4網織紅細胞和成熟紅細胞相關參數的對比分析網織紅細胞是未完全成熟的紅細胞群體，其中有許多參數與成熟紅細胞的相應參數有密切關聯。而Advia 2120儀器具有同時測定和分析這兩群細胞的能力，因此可以將其用于這兩群細胞間相應參數的對比分析。222例測定數據的對比分析結果見表6。

表4　　男性與女性10項網織紅細胞相關參數參考范圍的確定

表5　　男性和女性血液紅細胞各項參數的分布范圍

CH：單個細胞血紅蛋白含量均值;CHCM：紅細胞血紅蛋白濃度平均值。

表6　　成熟紅細胞與網織紅細胞相應參數的比較±s)

3討論

3.1網織紅細胞Retic和Retic#是最重要的參數，作者參考了國內近年來的相關報道，選擇比較有代表性的儀器和報道，其成年男女網織紅細胞參考范圍如下，見表7(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。可以看出，不同儀器間在網織紅細胞測定參考范圍上除CD-3700型血液分析儀測得的網織紅細胞各參數顯著高于其他儀器外，其他儀器的結果較為接近，一般來說男性檢測結果略高于女性。但是，在男女性別間的百分數結果上出現了兩種不同的情況，這可能與所采用的檢測系統以及選定的人群有所不同有關。在絕對數上的不同應該源于男女性在紅細胞數量上的明顯差異。

3.2MCV和MCVr網織紅細胞是幼稚的紅細胞，其直徑大多為8.0～9.5 μm，而正常紅細胞直徑多為6.7～7.7 μm[4]，從直徑上看網織紅細胞明顯大于成熟紅細胞。正常平均紅細胞體積一般在89.5 fL(本研究為88.8 fL)，分布范圍為80～100 fL，網織紅細胞體積從本研究結果看，平均值為105.4 fL，分布范圍為97.0～113.8 fL，也明顯大于成熟紅細胞，兩組數據間比較差異有統計學意義(P<0.05)。有關網織紅細胞體積的研究和報道并不多，叢玉隆等[5]在1996年應用TechniconH3血液分析儀進行了相關研究，健康人群的MCVr為(111.8±5.3)fL。而Coulter公司儀器也具有類似的檢測指標，一些作者也建立了成年人的正常參考范圍，見表8(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。本研究結果與這些報道相近，但可能因檢測系統的因素，略低于這些文獻的報道，但也同樣可以證明網織紅細胞是直徑和體積均大于成熟紅細胞的細胞群體。

3.3CH和CHrCH是通過高角度散射光直接測定的單個紅細胞內CHr，與通過Hb和RBC測定后計算獲得的MCH有相似的含義，但不受Hb和RBC測定誤差和計算因素的影響。從檢測結果上看CHr要明顯高于成熟CH。網織紅細胞是有核紅細胞脫掉細胞核并進入外周血液內的新生紅細胞，具有較大的體積和含有豐富的Hb，CHr平均為34.3 pg，明顯高于成熟紅細胞的CH(29.5 pg)，差異有統計學意義(P<0.05)。

在目前的血細胞分析系統中，Sysmex公司的XE-2100型血液分析儀在進行網織紅細胞分析時也有CHr這一參數，其名稱為“Ret-He”。該參數是目前較為廣泛地用于缺鐵性貧血診斷和治療檢測的新的指標。

3.4CHCM和CHCMrCHCM是儀器高角度散射光直接測定的Hb濃度均值，他與通過Hb和HCT測定后計算獲得的MCHC有相似的含義，但不受Hb和HCT測定誤差和計算因素的影響。從測定結果看CHCMr略低于CHCM，其均值分別為326.3 g/L和335.2 g/L，分布范圍分別是300.9～351.7 g/L和317.2～353.2 g/L。兩組數據間比較差異有統計學意義(P<0.05)。CHCM表達為Hb在成熟紅細胞中的濃度，而CHCMr表達為Hb在網織紅細胞內的濃度，雖然在單個網織紅細胞內有較高的Hb含量，但因為網織紅細胞的體積大于成熟紅細胞，因此在體積相對較大的網織紅細胞內的Hb濃度仍然低于成熟紅細胞。因此CHr高于CH的主要是由于其體積大和所含血紅蛋白較多。

3.5RDW和RDWr這兩項參數分別反映了成熟紅細胞和網織紅細胞體積分布的均一性，其平均值分別為13.7%和9.3%，分布范圍分別為12.5%～14.9%和7.5%～11.1%。判斷一組細胞大小或所含物質均一性的參數即為這組數據的變異系數(CV%)，其數值小表明其變異較小，一致性較高，如果變異較大則代表該組數據的一致性較差。由此數據可以了解到雖然網織紅細胞體積明顯大于成熟紅細胞，但其體積大小的均一性好于成熟紅細胞。

3.6HDW和HDWr這兩項參數是Advia2120儀器特有的參數，分別反映成熟紅細胞和網織紅細胞內所含Hb的均一性。其測定結果平均值分別為24.5%和27.8%，分布范圍分別為19.9%～29.1%和22.2%～33.4%，兩組數據間比較差異有統計學意義(P<0.05)。本研究顯示，成熟紅細胞內所含Hb的均一性比較好。而網織紅細胞可能因成熟程度不同，在外周血涂片上可以見到Ⅳ型或Ⅲ型的網織紅細胞，儀器測定則可以見到含高、中、低不同水平Hb的網織紅細胞，說明外周血中網織紅細胞成熟度是不同的，所含Hb量也會存在差異，因此導致其所含Hb分布的均一性比成熟紅細胞變異更大。

根據儀器性能的不同，網織紅細胞的測定和計算參數有多種，目前本研究所采用的Advia2120血細胞分析儀是最多的。本研究所涉及的網織紅細胞體積、RDWr、CHr、CHCMr、HDWr等許多參數到目前為止很少有文獻報道，而這些參數也是Advia2120儀器所特有的參數。這些參數在對各種貧血患者的篩查、診斷、鑒別診斷，特別是在治療監控和預后觀察等方面有臨床應用價值，期望能夠進行更多的臨床應用研究，發現和發揮這些獨特參數的臨床應用價值。

參考文獻

[1]張時民，李曉京．網織紅細胞檢測技術的進展和臨床應用[J]．中國醫療器械信息，2007，13(6)：15-23．

[2]衛生部臨床檢驗中心臨檢室，解放軍總醫院臨檢科.R-3000網織紅細胞分析儀臨床試驗[J]．中華醫學檢驗雜志，1996，19(6)：379-380．

[3]叢玉隆，樂家新，丁穎．網織紅細胞各項參數正常值調查[J]．上海醫學檢驗雜志，1996，11(1)：7．

[4]熊立凡，劉成玉．臨床檢驗基礎[M]．4版．北京：人民衛生出版社，2007．

[5]叢玉隆，樂家新，袁家穎．實用血細胞分析技術與臨床[M]．北京：人民軍醫出版社，2011．

Reticulocyte parameters of normal human and its relationship with mature erythrocyte parameters

ZhangShimin1,SongXuedong2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUnionMedicalCollegehospital,ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege，Beijing100730,China;2.theHospitalofBazhouCity,Bazhou,Hebei065700)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship between the parameters of the red blood cells and the corresponding parameters of mature red blood cells.MethodsBlood samples of 112 healthy males and 110 healthy females were tested for these reticulocyte parameters by using Siemens Advia2120 hematology analyzer.Reference intervals were established.Comparisons between these reticulocyte parameters and the corresponding parameters of mature erythrocytes were drawn.ResultsReference intervals for the healthy group recruited in this study were determined as follows.Females,percentage of reticulocyte (Retic%):0.45%～1.76%,absolute reticulocyte number(Retic#):(22～86)×109/L,mean corpuscular hemoglobin content of reticulocyte(CHr):30.1～36.4 pg,mean corpuscular volume of reticulocyte(MCVr):99.5～113.7 fL.Male,Retic%:0.54%～1.93%,Retic#:(29～104)×109/L,CHr:32.6～36.6 pg,MCVr:97.6～112.7 fL.The absolute reticulocyte of male is significantly higher than that of female;MCVr was significantly larger than mean corpuscular volume of mature erythrocytes,which was also slightly larger in male than that in female;CHr was significantly higher than mean corpuscular hemoglobin of mature erythrocytes while mean corpuscular hemoglobin concentration of large reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;red blood cell volume distribution width of reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;the hemoglobin content distribution width of mature erythrocytes has a higher uniformity compared with reticulocytes.ConclusionThe reference ranges of not commonly used parameters of reticulocytes were established,and were compared with the corresponding parameters of red blood cells.

Key words:reticulocyte;hemoglobin；mean corpuscular volume；red blood cell volume distribution width

(收稿日期：2015-12-15)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.014

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1049-04

作者簡介：張時民，男，副主任技師，主要從事臨床檢驗基礎血液、體液檢驗及形態學檢驗等方面的研究。