結核感染T細胞檢測在菌陰性肺結核診斷中的應用價值*

羅　槑,徐園紅,吳桂輝,楊　銘,岳　冀

(成都市公共衛生臨床醫療中心，四川成都 610066)

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·論著·

結核感染T細胞檢測在菌陰性肺結核診斷中的應用價值*

羅槑,徐園紅,吳桂輝,楊銘,岳冀△

(成都市公共衛生臨床醫療中心，四川成都 610066)

摘要:目的評估結核感染T細胞檢測在菌陰性肺結核的診斷價值。方法納入包括菌陰性肺結核病患者145例、非結核肺部疾病患者45例共190例。所有研究對象進行結核感染T細胞檢測，計算靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值等指標。結果結核感染T細胞檢測對菌陰性肺結核診斷的靈敏度為85.5%，特異度為84.4%，陽性預測值為94.7%，陰性預測值為64.4%。不同年齡段間比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論結核感染T細胞檢測有較高的陽性預測值，適用于菌陰性肺結核病的臨床輔助診斷。

關鍵詞:結核感染T細胞檢測；菌陰性肺結核；靈敏度；特異度

結核病是引起全球關注的重大共公衛生問題，結核病在我國也被列為重大傳染病之一。雖然目前已有很多技術運用于結核病診斷，但各方法都有一定的局限性如抗酸染色鏡檢靈敏度太低、分枝桿菌培養時間長、PCR容易產生假陽等。最常見的結核菌素皮試試驗(TST)由于其與包括卡介苗在內的其他分枝桿菌有交叉反應，特異性較差[1]。因此，以上這些方法仍不能滿足臨床早期診斷的需要，尤其是菌陰性結核病的診斷。由于缺乏有效的病原學診斷依據和手段，結核桿菌涂片陰性和培養陰性的結核病診斷常常依靠臨床癥狀、影像學表現及對診斷性抗結核治療的反應來進行判斷，可能會造成診斷不明確，導致疾病的發展和傳播[2]。因此，亟需快速、準確的早期診斷方法為臨床提供早期診斷依據。本研究運用了結核感染T細胞試驗來評價該方法對菌陰性肺結核診斷的應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年1月至2014年8月就診于成都市公共衛生臨床醫療中心被診斷為菌陰性肺結核的患者共145例。患者的診斷根據臨床表現、影像學實驗室等檢查，按《結核病診斷標準和分類》進行。所有患者均接受了痰涂片查抗酸桿菌、痰結核分枝桿菌培養、胸片等結核相關檢查。同時，納入了同期本院的非結核肺部疾病患者45例作為對照。

1.2結核感染T細胞檢測檢測試劑盒為結核感染T細胞檢測試劑盒(體外釋放酶聯免疫法)，購自萬泰生物技術有限公司。采集納入研究者全血并用肝素抗凝，于2 h內分別分裝1 mL至“N”“T”“P”3個培養管中。37 ℃培養(22±2)h之后，離心取血漿進行ELISA檢測，得出3個培養管中γ干擾素的水平。根據說明書將結果表示為陽性、陰性和不確定3種。分別計算結核感染T細胞檢測對菌陰性肺結核診斷的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、陽性似然比、陰性似然比、診斷準確度。

1.3統計學處理采用SPSS19.0統計學軟件進行統計學處理。計數資料以頻數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1患者基本資料共納入患者190例，基本信息見表1。其中菌陰性肺結核組共145例，初治結核126例(86.9%)，復治結核19例(13.1%)；非結核肺部疾病組45例，其中肺炎21例、肺癌16例、支氣管擴張4例，慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺吸蟲病各2例。

表1　　納入研究的患者基本信息

2.2結核感染T細胞檢測結果在菌陰性肺結核組中，結核感染T細胞陽性有142例(85.8%)，非結核肺部疾病組陽性有7例(15.6%)，兩組陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.3結核感染T細胞檢測對菌陰性肺結核的診斷價值結核感染T細胞在不同年齡段的陽性率分別為：<18歲87.5%，18～60歲86.8%，>60歲73.5%，陽性率隨年齡增加而下降。結核感染性T細胞對診斷菌陰性肺結核的靈敏度為85.5%，特異度為84.4%，陽性預測值為94.7%，陰性預測值為64.4%，陽性似然比為5.5，陰性似然比為0.17，診斷準確度為85.3%。上述診斷效能指標在不同年齡段人群間進行比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表2　　結核感染T細胞檢測結果[n(%)]

表3　　結核感染T細胞檢測對不同年齡組菌陰性肺結核的診斷價值

-:該項無數據。

3討論

菌陰性結核病因為缺乏理想的診斷和鑒別診斷手段，一直是結核病診斷的難點。雖然菌陰性結核較活動性肺結核傳染性小，但對于密切接觸者來講依然有較大的感染風險。

結核感染T細胞檢測是以檢測結核分枝桿菌特異性T細胞反應為基礎的γ干擾素釋放試驗為原理，作為一種新的檢測方法已在歐洲、美國等地區廣泛應用[3]。結核感染T細胞檢測是基于在體外培養條件下結核特異性抗原結核早期分泌抗原靶分子(ESAT)和培養濾液蛋白10(CFP-10)刺激感染者的全血標本的感染性T淋巴細胞，檢測釋放的γ干擾素。這些抗原不存在于卡介苗及其他致病性非結核分枝桿菌的中，因此具有很高的特異性[4]。由于其較高的靈敏度和特異度，越來越多地成為結核病輔助診斷的常規手段。

本次研究結果顯示結核感染T細胞對菌陰性肺結核總靈敏度為85.5%，Wlodarczyk等[5]報道的靈敏度為55.6%，盧峰岳等[6]報道為86.6%。總特異度為84.4%同Wlodarczyk等[5]報道的87.0%相近。靈敏度隨年齡增長有下降的趨勢，但差異無統計學意義(P>0.05)。Kobashi等[7]報道日本青年和老年結核病患者的靈敏度無明顯差異。該方法的特異度在小于18歲和大于60歲的年齡段中均為100.0%，陽性集中在18～60歲的年齡段，可能與我國屬于結核高發國家之一，患者是未知的感染暴露人群，有待進一步追蹤調查。

本次報道的菌陰性肺結核組有3例HIV陽性，HIV感染合并結核時，由于病情表現的復雜性，因此診斷更有難度。在這3例患者中，2例檢測結果為陽性，分別是年齡31和34歲的成年男性；另1例檢測結果陰性的為4歲男性兒童，由于同時有免疫系統損害和細胞免疫未成熟的表現，1型T細胞介導的細胞免疫反應低下，所以出現假陰性，因此免疫低下人群的對結核感染T細胞檢測反應還需要通過增加樣本量來加強研究。

早期診斷和早期治療是結核防控最重要的策略之一。結核感染T細胞檢測對菌陰性肺結核有較高的靈敏度、特異度和陽性預測值，標本容易獲取，實驗室結果快速、穩定。該方法適合于臨床輔助診斷和鑒別診斷。

參考文獻

[1]Rangaka MX,Wilkinson KA,Glynn JR,et al.Predictive value of interferon-γ release assays for incident active tuberculosis:a systematic review and meta-analysis[J].Lancet Infect Dis,2012,12(1):45-55.

[2]Dorman SE.New diagnostic tests for tuberculosis:bench,bedside,and beyond[J].Clin Infect Dis,2010,50(Suppl 3):S173-177.

[3]Mazurek GH,Jereb J,Lobue P,et al.Guidelines for using the QuantiFERON-TB Gold test for detecting Mycobacterium tuberculosis infection,United States[J].MMWR Recomm Rep,2005,54(RR/15):49-55.

[4]OnurH,HatipogluS,AricaV,etal.Comparison ofquantiferontestwithtuberculinskintestforthedetectionoftuberculosisinfectioninchildren[J].Inflammation,2012,35(4):1518-1524.

[5]Wlodarczyk M,Rudnicka W,Janiszewska-Drobinska B,et al.Interferon-gamma assay in combination with tuberculin skin test are insufficient for the diagnosis of culture-negative pulmonary tuberculosis[J].PLoS One,2014,9(9):e107208.

[6]盧峰岳，黃艷君，劉春平，等．γ-干擾素釋放試驗診斷活動性結核病的臨床評價[J]．實用醫學雜志，2013，29(23)：3827-3829．

[7]Kobashi Y,Mouri K,Yagi S,et al.Clinical utility of the QuantiFERON TB-2G test for elderly patients with active tuberculosis[J].Chest,2008,133(5):1196-1202.

Performance of T cell infected with Mycobacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis*

LuoMei，XuYuanhong，WuGuihui，YangMing，YueJi△

(ChengduPublicHealthClinicalCenter,Chengdu，Sichuan610066,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the application value of T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis.MethodsIn total,145 patients with smear and culture negative pulmonary tuberculosis and 45 patients with non-tuberculosis lung disease were enrolled in the study.All patients received T cell infected with Mybacterium tuberculosis test and sensitivity,specificity,positive predicted value,negative predicted value of testing for the diagnosis of smear and culture-negative TB patients were calculated.ResultsThe sensitivity of specificity T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis was 85.5%,the specificity was 84.4%,positive predicted value was 94.7%,negative predicted value was 64.4%.No statistical significance in age-dependent groups(P>0.05).ConclusionT cell infected with Mybacterium tuberculosis assay has high positive predicted value in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis and is suitable for clinical auxiliary diagnosis.

Key words:T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay;smear and culture negative pulmonary tuberculosis;sensitivity；sensitivity；specificity

(收稿日期：2015-12-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.008

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1035-03

基金項目：成都市科技局資助項目(2014-HM01-00371-SF)；四川省醫學會青年創新課題資助項目(Q14021)。

作者簡介：羅槑，女，主治醫師，主要從事傳染流行病學的相關研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail:yj133881@126.com。