缺血修飾蛋白與急性腦梗死體積的臨床研究

蘇宏圖　張春榮　石小晶　楊文軍　王帥　李霜梅

066000 河北省秦皇島市海港醫院神經內科[蘇宏圖(通信作者)　張春榮　石小晶　楊文軍　王帥　李霜梅]

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缺血修飾蛋白與急性腦梗死體積的臨床研究

蘇宏圖張春榮石小晶楊文軍王帥李霜梅

066000 河北省秦皇島市海港醫院神經內科[蘇宏圖(通信作者)張春榮石小晶楊文軍王帥李霜梅]

【摘要】目的探討急性腦梗死患者缺血修飾蛋白(IMA)水平與腦梗死體積的關系。方法選擇發病24h急性腦梗死患者116例，按照腦梗死體積分為4組，分別為0～5 cm3組(35例)；5～10 cm3組(32例)；10～15 cm3組(28例)；(15 cm3組(21例)；選取同期來本院體檢的20例健康者為對照組。運用ACB 比色法來測定血清 IMA水平。結果0～5 cm3組、5～10 cm3組、10～15 cm3組、(15 cm3組缺血修飾蛋白水平存在顯著差異(P<0.01)，急性腦梗死組血清IMA水平(除(15 cm3組)與腦梗死體積呈線性正相關(<0.01)。結論急性性腦梗死患者血清IMA水平均高于對照組，IMA可以作為腦組織缺血敏感的非特異性生化指標，并且急性腦梗死患者血清IMA水平隨腦梗死體積增加而增高。可能作為輔助手段預測病情進展。

【關鍵詞】缺血修飾蛋白腦梗死體積腦梗死相關性

【DOI】10.3969/j.issn.1007-0478.2016.02.017

缺血修飾蛋白(ischemia modified albumin，IMA)是美國學者Bar 于上世紀90年代發現的一種被降解修飾的人血清白蛋白(Human Serum Albumin，HAS)，IMA是在發生缺血/再灌注時由于自由基等破壞了血清白蛋白的氨基酸序列，使白蛋白與過渡金屬的結合能力發生改變，即因缺血而產生與過渡金屬如鈷、銅和鎳等結合能力發生改變的白蛋白[1]。其可以在急性缺血性事件的早期診斷中作為新的生化指標，美國食品和藥物管理局(U.S. Food and Drug Administration ，FDA )將IMA批準為第一個心肌缺血診斷生化標志物[2-3]。目前，國內外對IMA在缺血性腦血管病領域的研究相對較少，但國外研究已表明血清IMA水平與急性腦梗死患者的腦梗死體積之間存在相關性，目前這方面研究較少，本研究將運用白蛋白結合鈷試驗(Albumin Cobalt Binding test，ACB 試驗)并以比色法測定血清IMA 水平，以探討發病24 h的急性腦梗死患者血清IMA水平與腦梗死體積的相關性，以判斷血清IMA水平是否可以作為評價腦梗死病情程度的生化指標。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2011年1月～2015年1月收治的發病24 h急性腦梗死患者116例，按照腦梗死體積分為3組，分別為0～5 cm3組(35例)，5～10 cm3組(32例)，10～15 cm3組(28例)，(15 cm3組(21例)。選同期來本院體檢的20例健康者為對照組，所有入選者近2周內未服用任何藥物。各組一般情況的構成(表1)。1.2入選標準：所有患者均符合1955年全國第四屆全國腦血管會議修訂的診斷標準，根據臨床癥狀、體征及頭顱CT、MRI 檢查選入病例入組。各組患者在發病前均無特殊用藥史。發病時間的計算：從患者最后尚正常的時間算起，出現腦卒中癥狀或體征的時間。腦梗死體積是按照頭顱MRI的DWI像，按照長×寬×層面數/2(cm3)。

1.3排除標準：(1)嚴重肝腎功能衰竭者；(2)近期(半年內)有冠狀動脈血栓性疾病者；(3)發病之前1個月有重大手術或創傷史者；(4)慢性感染性疾病者；(5)妊娠者。

1.4IMA水平檢測

采用ACB比色法測定，取待測血清試樣200 μL，加入0.1%氯化鈷水溶液50 μ，混合后靜置10 min；然后加入1.5 g/L 二巰蘇糖醇水溶液50 μL，2 min后再加入0. 9%氯化鈉溶液1.0 mL；利用分光光度計在470 nm處測定吸光度值，空白管除不加二巰蘇糖醇外，其余步驟想通過，即可得出IMA水平且以吸光度為單位(U/mL)，IMA與反應顯色強度呈正相關。即血清中白蛋白與鈷離子結合后剩余的游離鈷離子與有機顯色物反應生成紅褐色產物，在470 nm的波長下比色，其吸光度與鈷離子水平呈正比。也就是說，ACB值越小，與鈷離子結合能力越低，IMA水平越高。單位(U/ml)定義：每mL血清中的白蛋白在470 nm波長下吸附1ug的鈷離子為1個單位。

表1　急性腦梗死組與對照組一般資料比較

1.5統計學處理

2結果

各組IMA水平比較(表2)。

表2　各組IMA水平比較

注：與對照組比較，▲P<0.01；與0～5 cm3組比較，▼P<0.01；與5～10 cm3組比較，△P<0.01；與 10～15 cm3組比較，*P<0.01。

急性腦梗死組血清IMA水平與腦梗死體積的相關分析(見表3)。

表3　發病24 h腦梗死血清IMA水平(U/mL)

0～5 cm3組、5～10 cm3組、10～15 cm3組，血清IMA水平與腦梗死體積呈正相關(P<0.01)；但>15 cm3組，血清IMA水平與腦梗死體積無明顯相關(P>0.01)。

3討論

1992年Bar-Or等[2]建立的ACB試驗檢測IMA水平[4]，且以吸光度為單位[2,5]，腦缺血患者血清中含有較多的修飾白蛋白(IMA)，加入同樣水平的氯化鈷溶液后由于IMA與Co2+結合的能力很低，使溶液中游離Co2+的水平較高；加入二巰蘇糖醇，其可與游離鈷發生顏色反應，用分光光度法測定其吸光度，即可推測IMA水平。IMA與反應顯色強度呈正相關[6]。腦組織的缺血、低氧后造成的能量代謝障礙-興奮性神經介質釋放-鈣離子過量內流-自由基反應-細胞死亡等缺血性連鎖反應，而HAS易受羥基自由基的損害[7]，使N末端序列的2～4個氨基酸發生乙酰化或缺失1～2個氨基酸[8-9]，從而形成IMA。2006年Abboud等[10]首先進行了IMA水平與急性腦血管病的相關研究發現，腦梗死、腦出血患者IMA水平顯著高于短暫性腦缺血發作(Transient Ischemic Attack，TIA)組，且腦梗死組患者24 h內IMA水平逐漸升高。同時，Abboud 還推測血清IMA水平與腦梗死患者病灶大小及神經功能缺損程度呈正相關。2011年國內唐曉斌等[11]也做了急性腦血管病24 h缺血修飾蛋白變化觀察，結果提示急性腦梗死與急性腦出血患者在發病6、12 h的血清IMA水平存在顯著差異，IMA可以作為缺血腦組織敏感的非特異性生化指標。2010年陳家強等[12]研究發現，所有急性腦梗死患者的梗死體積與IMA和IL-6水平有密切關系，IMA和IL-6水平能反映腦梗死體積，對臨床評估缺血性腦卒中腦組織的損害程度有一定意義。本研究結果顯示發病24 h急性腦梗死患者血清IMA水平與梗死體積呈正相關，IMA可作為一種評價急性腦梗死病情輕重的重要指標，能夠客觀反映患者病情輕重情況，從而為早期診斷、治療提供依據。

有研究報道神經功能缺損程度與多種因素等有關，而且梗死病灶部位的不同，臨床神經功能損害程度相差較多。對于神經纖維密集的部位，小的梗死灶可造成嚴重的神經功能損害，而在神經纖維比較稀疏的部位，大梗死灶可能產生相對比較輕的臨床神經功能缺損。本研究的腦梗死體積的計算包括多發急性腦梗死，體積是每一處梗死體積之和，可能對實驗結果產生影響，導致本研究>15 cm3組中的IMA水平與梗死體積無明顯相關的可能。因此，關于IMA水平與腦梗死嚴重程度之間的關系比較復雜，還有待進一步的研究。

參考文獻

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[2]Bar-Or D,Lau E,Winkler JV.A novel assay for cobalt-albumin in binding and its potential as a marker for myocardial ischemia a preliminary report[J].Emerg Med，2000,19(4):3112-3150.

[3]Collinson PO,Gaze DC.Biomarkers of cardiovascular damage and dysfunction-an overview[J].Heart Lung Circ,2007,16(Suppl 3):S71-S82.

[4]Bar-Or D,Curt is G，Rao N,et al.Characterization of the Co2+and Ni2+binding amino-acid residues of the N terminus of human albumin.An in sight into the mechanism of a new assay for myocardial is chemia Eur[J]. Biochem,2001,268(1):42-47.

[5]Bhagavan NV,Lai EM,Rios PA,et al.Evaluation of human serum albumin Cobalt binding assay for the assessment of myocardial ischemia and myocardial infarction[J].Clin Chem,2003,49(4):581-585.

[6]易凱,李龍平,張華,等.缺血修飾白蛋白研究進展[J].檢驗醫學教育,2007,14(4):37-40.

[7]Chan B,Dodsworth N,Woodrow J,et al.Site-specific N-terminal auto-degradation of human serum albumin[J].Eur J Biochem,1995,227(1/2):524-528.

[8]Abboud H,LabreucheJ,MeseguerE,Lavallee PC,et al.Ischemia-modified albumin in acute stroke[J].Cerebrovasc Dis,2007,23(2/3):216-220.

[9]唐曉斌,劉慶國,王英俠,等.急性腦血管病24小時內缺血修飾白蛋白變化觀察[J].中國醫藥導報,2011,8(25):159-161.

[10]陳家強,龔道元,李煒煊,等.IMA、IL-6與缺血性腦卒中腦梗死體積的相關研究[J].醫學檢驗與臨床,2010,21(4):43-45.

(2015-10-19收稿)

【中圖分類號】R743

【文獻標識碼】A

【文章編號】1007-0478(2016)02-0132-03