蒙藥地格達屬的指紋圖譜比較研究

道日娜

(內蒙古自治區阿拉善盟蒙醫醫院,內蒙古 阿拉善 450306)

蒙藥地格達屬的指紋圖譜比較研究

道日娜

(內蒙古自治區阿拉善盟蒙醫醫院,內蒙古 阿拉善 450306)

目的：建立地格達屬藥材的HPLC指紋圖譜，為其藥材質量評價提供依據。方法：以龍膽苦苷為參照物，采用高效液相色譜法，對4種地格達進行了指紋圖譜分析。采用CenturySILC18-EPS5μm250×4.6mm的色譜柱，流動相：甲醇：乙腈：水(0.1%磷酸)進行梯度洗脫，流速：0.8mL,檢測波長：270nm，柱溫：30℃，進樣量：10μL。結果：該方法精密度高，重現性好，共分離了12個指紋峰。結論：不同地格達藥材的內在質量存在差異，該方法可用于地格達屬藥材的質量控制。

蒙藥地格達屬藥材;指紋圖譜;高效液相;質量控制

蒙藥材扁蕾(哈日-特木日-地格達)為龍膽科植物扁蕾Gentianopsis barbata (Froel.)Ma的干燥全草。扁蕾分布于我國東北、華北、西部地區。春、夏季采收,除去雜質陰干。味苦，性寒、鈍、糙、輕、燥。具有平息“協日”,清熱,愈傷之功效。蒙醫多用于治療 “協日”引起的頭痛,“協日”熱,中暑,黃疸,肝熱,傷熱等癥。

蒙藥花錨(希依日一地格達)為龍膽科植物花錨Halenia corniculata(L.)Cornaz.的干燥全草。花錨分布于我國東北、華北及陜西等地。夏、秋季采收，晾干。味苦，性寒。具有平息協日、清熱、愈傷的功能。用于目黃，口苦，高燒，頭痛，尿黃，協日熱，傷熱，脈熱等癥[3]。

蒙藥肋柱花(哈畢日干·地格達)為龍膽科植物肋柱花Lo-matogonium rotatum( L. ) Fries ex Nym的全草。肋柱花分布于我國東北、華北、西北至西南等地。夏、秋季采收，曬干。味苦,性寒。具有平息“協日”,清熱,健胃,愈傷等功能。用于瘟疫,流感,傷寒,中暑頭痛,肝膽熱,黃疸,胃“協日”,傷熱等[4]。

蒙藥濕生扁蕾(那木格音-哈日-特木日-地格達)為龍膽科植物濕生扁蕾Gentianopsis paludosa(Hook.f.)Ma的全草。濕生扁蕾分布于我國華北、西北及四川、云南、西藏等地。夏季采收，洗凈，晾干。味苦，性寒。具有平息“協日”,清熱清瘟熱，利膽，止瀉等功效。用于黃疸型肝，肝膽病引起的發熱，感冒，小兒腹瀉等。

4個品種的地格達類蒙藥材在臨床上廣泛代替應用,其質量的好壞直接關系著人們的健康,但是目前市場上對地格達屬的質量控制還缺少科學的依據,難以鑒別真偽。由于蒙藥的藥效不是來自任何單一活性成分，而是多種活性成分的協同綜合作用。因此，僅采用單一化學成分的定性定量來評價蒙藥質量已不能滿足對蒙藥質量控制的要求。由于指紋圖譜能夠從宏觀和整體上表征蒙藥材的特征，目前已成為國際上公認的控制天然藥物質量的有效手段。為了臨床療效的穩定及其藥品質量,采用了高效液相色譜法對蒙藥地格達屬藥材的指紋圖譜進行了研究，為地格達屬藥材的鑒別和質量控制提供實驗依據。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(出廠編號：C20974335270CS型號規格：LC-10AT/SPD-10A中國、生產廠家：島津—蘇州)，SHZ-Ⅲ型循環水真空泵(鞏義市予華儀器有限責任公司)，電子天平(上海天平儀器廠)，KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

甲醇、乙腈、磷酸(分析純和色譜純)，純凈水，龍膽苦苷對照品。樣品共收集了10個批次樣品。

表1 地格達屬藥材收集情況

2 方法與結果

2．1 色譜條件色譜條件： 采用CenturySILC18-EPS5um250×4.6mm的色譜柱，流動相為甲醇：乙腈：水(0.1%磷酸)進行梯度洗脫，流速為0.8mL,檢測波長為270nm，柱溫為30℃，進樣量為10μL。

表2 流動相梯度洗脫程序

2.2 對照品溶液的制備：精密稱取對照品龍膽苦苷2mg置10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，配制成對照品儲備液，使用時稀釋成所需濃度。

2.3 供試品溶液的制備：精密稱取扁蕾，花錨，濕生扁蕾，肋柱花各2g，用40mL甲醇回流提取4h，提取水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解并定容至10mL，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。

3 方法學與考察

3.1 精密度試驗：取扁蕾供試品溶液，連續進樣6次，檢測指紋圖譜。結果表明各色譜峰的相對保留時間的RSD為0.33%～1.03%，符合指紋圖譜的要求。

3.2 重現性試驗：取扁蕾按供試品溶液的制備方法分別制備6分供試品溶液，檢測指紋圖譜。結果各色譜峰的相對保留時間的RSD為0.36%～2.1%，符合指紋圖譜的要求。

3.3 穩定性試驗：取扁蕾供試品溶液，分別于0，3，6，9，12，15h進行檢測，結果表明各色譜峰的RSD為0.37%～0.83%，供試品溶液在24h內穩定，符合指紋圖譜的要求。

4 指紋圖譜的建立及分析

4.1 指紋圖譜的建立：確定12個特征峰構成扁蕾的指紋圖譜。其中保留時間為27.890min的色譜峰為龍膽苦苷的峰。見圖。

4.2 不同地格達藥材的色譜指紋圖譜測定：共收集了不同批次和地格達的藥材10批，其中扁蕾1批，濕生扁蕾3批，花錨3批，肋柱花3批。按照上述確定的供試品制備方法及色譜條件，測定了所有10批樣品的色譜圖。結果(見圖)

4.3 直觀比較： 對10批不同采集時間和列別的地格達藥材的HPLD色譜圖的分析，發現不同列別的地格達藥材之間的HPLC色譜圖相差很大，而且與采集時間也不存在必然的聯系。

4.4 相似度評價： 計算10批藥材中各色譜峰的相對保留時間,共確定了12個共有指紋峰,各指紋峰的相對保留時間RSD值均小于2.1%,其中5號峰為龍膽苦苷峰.通過對已檢測的10批藥材指紋圖譜分析,選擇共有峰面積較大的圖譜作為對照圖譜,并用相關系數的計算與夾角余弦計算法計算10批藥材的指紋圖譜的相似度

表3 相似度評價結果

5 結論

從本實驗看出10批地格達藥材HPLC指紋圖譜存在一定差異,從相似度評價結果表明，不同地格達的相似度計算結果均在0.89以上，采集時間的差異不明顯。但從測定的10批地格達藥材共有峰的峰面積比值來看，不同地格達所含成分的含量差異較大，在地格達藥材質量控制方面需進一步深入研究，使之更能有效地反映藥材的品質，為蒙藥采的質量控制提供有效的信息。

2016年8月17日收稿

Study on chromatography fingerprint comparison of Mongolian medicine of Digeda

Dorina

Purpose：Establishing the chromatography fingerprint of medicinal materials of Digeda to provide a basis for evaluation of its quality. Method: With Gentiopicroside as reference, using high performance liquid chromatography, to ground up to be the fingerprint analysis.Chromatographic conditions as follows: CenturySILC18-EPS5um250x4.6mm chromatography columns,: CH3OH:C2H3N:H2O as elution solvents;go on gradient,a flow rate of 0.8ml/min, an ultraviolet detector at 270nm, temperature of 30℃ , Enter sample quantity of 10ul.Results：The method of high precision, reproducibility, and separation of a total of 12 fingerprint peaks. Conclusion： Inherent quality differences of different herbs, the method can be used to reach an herbal medicine quality control. Key words: Mongolian medicine of herbal medicine; chromatographic fingerprint; high performance liquid chromatography; quality control.

R291.2

B

1006-6810(2016)12-0056-03