利奈唑胺中對映異構體的測定

周君安　孫　琳孫井龍（江蘇豪森藥業集團有限公司　連云港222000）

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利奈唑胺中對映異構體的測定

周君安孫琳*孫井龍（江蘇豪森藥業集團有限公司連云港222000）

摘要：目的：對利奈唑胺中的對映異構體進行測定。方法：采用高效液相色譜法，CHIRALPAK AD-H（250mm×4.6mm 5μm）；以正己烷-異丙醇-二乙胺（85∶15∶0.2）為流動相；紫外檢測器；流速為1.0mL/min；檢測波長為254nm；柱溫為40℃。結果：利奈唑胺中對映異構體能得到良好的分離，峰面積與濃度在一定的范圍內呈良好的線性關系。結論：該方法作為利奈唑胺中對映異構體的檢測方法準確、可靠。

關鍵詞：利奈唑胺液相色譜對映異構體

利奈唑胺（linezolid）屬噁唑烷酮類抗菌新藥。該藥對葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬等革蘭陽性菌具有良好的抗菌作用，包括多重耐藥菌，如MRSA、多重耐藥肺炎鏈球菌、萬古霉素耐藥腸球菌[1，2，3]。該藥于2000年獲得美國FDA批準，2007年進入中國市場。根據ICH指導原則及《中國藥典》四部通則指導原則要求[4]，本實驗建立了利奈唑胺中對映異構體的檢測方法。

1　儀器與試劑

儀器：電子分析天平，梅特勒XS105；Agilent 1200液相色譜儀，安捷倫色譜工作站；色譜柱：CHIRALPAK AD-H（250mm× 4.6mm 5μm）。試劑：正己烷-異丙醇-二乙胺均為色譜純，來自MERCK公司；利奈唑胺及利奈唑胺對映異構體均為本公司自制。

2　試驗過程與結論

2.1色譜條件：照液相色譜測定法（《中國藥典》2015年版通則0512），以正己烷-異丙醇-二乙胺（85∶15∶0.2）為流動相；紫外檢測器；流速為1.0mL/min；等度洗脫；檢測波長為254nm；柱溫為40℃；進樣體積10μL。

2.2試驗溶液配制：取利奈唑胺適量，精密稱定，加適量甲醇溶解，并用流動相稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，加流動相稀釋制成每1mL中含5μg的溶液，作為對照溶液；取利奈唑胺及利奈唑胺對映異構體對照品適量，加適量甲醇溶解，用流動相稀釋制成每1mL中約含0.25mg的溶液，作為系統適用性溶液。

2.3系統適用性試驗：量取系統適用性溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄液相圖譜。從實驗圖譜看出，利奈唑胺與對映異構體分離度良好，分離度為5.0，表明該分析方法專屬性良好。

2.4定量限和檢測限試驗：將對照溶液逐步稀釋，分別進樣至信噪比（峰高/基線噪聲）為3±1為檢測限，至信噪比為10±2為定量限。結果見下表。

檢測限　　定量限檢測濃度比值（%）對映異構體　1.2　 120　 0.025　 2.5　 250　 0.05利奈唑胺　1.2　 120　 0.025　 2.5　 250　 0.05名稱　濃度（ng）檢測量（ng/mL）檢測濃度比值（%）濃度（ng）　檢測量（ng/mL）

2.5線性關系試驗：按照標準限度配制線性關系試驗溶液，利奈唑胺對映異構體在0.25～500μg/mL的范圍內，線性相關系數皆大于0.9990，說明線性良好。

名稱　　回歸方程　　相關系數利奈唑胺對映異構體　A=29.627×C-0.173　r=0.9998

2.6系統精密度：考察供試品溶液及對照溶液連續六針進樣試驗結果見下表。

項目對映異構體（%）對映異構體平均值（%）　　未檢出SD對映異構體（%）　/ 第1次　第2次　第3次　第4次　第5次　第6次未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出

由結果可見，利奈唑胺對映異構體平行測定六次，均未檢出，說明本方法系統的精密度符合實驗要求。

2.7溶液穩定性:考察供試品溶液及對照溶液在選定稀釋液中的穩定性，試驗結果下表。

放置時間對映異構體（%）0h　 2h　 4h　 8h　 12h　 24h　　結論未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　無降解

由結果可以看出，利奈唑胺樣品在流動相中24h內穩定，無對映異構體降解產生。

2.8回收率：稱取利奈唑胺約50mg，置50mL量瓶中，作為回收率基質樣品；另精密稱取利奈唑胺對映異構體對照品約5mg，置250mL量瓶中，加適量乙腈溶解后，用稀釋液稀釋定容至刻度，作為儲備溶液。以對映異構體限度為基準100%，分別精密量取儲備溶液制成含雜質40%、100%和120%的溶液各三份，作為供試品溶液。定量測定的利奈唑胺對映異構體的平均回收率介于95%～104%之間，RSD為5.43%，說明本分析方法對利奈唑胺對映異構體的測定是準確的。

3　討論

用高效液相色譜法測定利奈唑胺中對映異構體專屬性良好；對檢測限、定量限進行測定，說明本方法檢測靈敏度高，能保證對低限度溶劑的良好檢測；另外對線性關系、系統精密度、溶液穩定性、回收率進行測定，發現本方法均能滿足上述實驗的要求，對利奈唑胺中對映異構體進行準確定量，能滿足對利奈唑胺中對映異構體的含量控制。

參考文獻

[1]李娉，李慶林，劉麗萍，等.利奈唑胺和萬古霉素對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染療效的Meta分析[J].安徽醫藥，2015，19（5）：969-973.

[2]毛銳.利奈唑胺治療醫院獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌肺炎的療效觀察[J].北方藥學，2015，12（5）：60-61.

[3]劉麗.利奈唑胺治療老年人革蘭陽性菌感染的療效[J].吉林醫學，2015，36（15）：3289-3290.

[4]國家藥典委員會.中國藥典四部通則[S].中國醫藥科技出版社，2015：59，374.

Determination of enantiomers in linezolid

Zhou Junan Sun Lin*Sun Jinglong（Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Co.，Ltd. Lianyungang 222000 China）

Abstract：Objective: To establish a method for detection of enantiomers in linezolid Methods The enantiomers in linezolid was determined by HPLC with CHIRALPAK AD -H（250mm×4.6mm 5μm）column; the mobile phase was in the phase of hexane -isopropanol -diethylamine-（85∶15∶0.2）and with UV detector; The flow rate was 1.0mL/min; detection wavelength was 254nm; column temperature was 40℃; Results The enantiomers could be completely separated，and the calibration curves hand good liner relationship within a certain range Conclusion this method is proved accurate and reliable，it can be used for the determination of enantiomers in linezolid

Key words：Linezolid HPLC Enantiomers

*通訊作者

中圖分類號：R917

文獻標識碼：A

文章編號：1672-8351（2016）04-0001-02