5種中藥制劑殺滅幽門螺桿菌的實驗研究

楊春賓

摘要：目的 研究5種中藥制劑殺滅幽門螺桿菌的效果。方法 選擇2014年5月～2015年5月我院保存的新鮮活檢胃黏膜標本作為實驗材料，培養(yǎng)幽門螺桿菌群，制作細菌懸液，制備40、50、55mg/ml的黃連、黃芪健中湯、逍遙湯、枳實、紫草中藥制劑，記錄菌群存活情況和中藥的滅菌率。結果 一定濃度的黃連、黃芪健中湯和枳實可有效滅殺幽門螺桿菌，可將幽門螺桿菌的菌落數(shù)從107CFU/ml降至106CFU/ml，黃連該濃度在在40～50mg/ml之間，黃芪健中湯和枳實的該濃度在50～55mg/ml之間，逍遙湯和紫草的滅菌效果隨著中藥制劑的濃度增大而增強；黃連的殺菌作用最理想，50～55mg/ml黃連滅殺幽門螺桿菌的殺菌率達99.00%，而枳實、黃芪健中湯的殺菌功效次之。結論 黃連的殺菌作用最強，其次為枳實、黃芪健中湯、紫草、逍遙湯。

關鍵詞：中藥；幽門螺桿菌；實驗

幽門螺桿菌感染的引發(fā)多種胃腸道疾病的重要原因[1]。目前，臨床上通常應用多種抗生素的方法治療幽門螺桿菌感染，但是這種聯(lián)合方式增強了藥物的副作用，且耐藥菌株的發(fā)生率逐漸增大[2]。本次選擇2014年5月～2015年5月我院保存的新鮮活檢胃黏膜標本作為實驗材料，取得了一定的成果，其詳情如下。

1 試驗材料

1.1中藥材料 選擇本院中藥制劑黃連、黃芪健中湯、逍遙湯、枳實、紫草進行試驗，妥善保存中藥。

1.2布氏肉湯血瓊脂培養(yǎng)基 15g瓊脂、0.1g重亞硫酸鈉、5g氯化鈉、2g酵母粉、10g葡萄糖、10g胰蛋白胨、1000ml蒸餾水、8%～10%羊血液、1%抗生素混合液混合，控制培養(yǎng)基pH值為7.2。

1.3西紅柿汁培養(yǎng)基 取新鮮西紅柿，剝皮搗碎，用紗布擠壓西紅柿得濾汁。取1g葡萄糖、10g蛋白胨、5g氯化鈉、3g牛肉膏、400ml西紅柿汁、1000ml蒸餾水混合，攪拌均勻，加入瓊脂18.0/L，攪勻，在121℃的條件下滅菌，持續(xù)20min。冷卻至50℃后，加入15μg頭孢菌素、250單位多粘菌素B、10μg萬古霉素、5μgTMP、1～2滴乳酸混合。

1.4菌株 在西紅柿培養(yǎng)基雙碟上涂抹胃黏膜組織，放于微需氧環(huán)境下，控制環(huán)境保持37℃溫度、5%～8%O2、5%～8%CO2、33.6%H2，培養(yǎng)2d后，對菌群、菌體的形態(tài)、生化反應進行觀察，采用快速尿素酶試驗方法對菌體進行試驗，確認其為幽門螺桿菌。取該幽門螺桿菌置入布氏肉湯中，保持微需氧環(huán)境，培養(yǎng)2d后取出。

1.5方法 布氏肉湯血瓊脂培養(yǎng)基去除瓊脂即為液體培養(yǎng)基，將5種中藥制劑放入到液體培養(yǎng)基中，將中藥濃度調至40、50、55mg/ml。取細菌置于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)12～18h，制成細菌懸液，保證懸液濃度為1×108CFU/ml。將1ml細菌懸液分別加入不同濃度不同中藥制劑液中，并設置無中藥的對照管，均培養(yǎng)1d，培養(yǎng)環(huán)境為36℃微需氧環(huán)境。之后，在布氏肉湯血瓊脂培養(yǎng)基平板上涂抹試管中的待檢物，繼續(xù)培養(yǎng)3d，對存活菌落數(shù)進行計量。對照管菌落數(shù)位起始菌落數(shù)，殺菌率=100%×（起始均數(shù)-存活菌數(shù)）/起始菌數(shù)。

2 結果

一定濃度的黃連、黃芪健中湯和枳實可有效滅殺幽門螺桿菌，可將幽門螺桿菌的菌落數(shù)從107CFU/ml降至106CFU/ml，黃連該濃度在在40～50mg/ml之間，黃芪健中湯和枳實的該濃度在50～55mg/ml之間，逍遙湯和紫草的滅菌效果隨著中藥制劑的濃度增大而增強，見表1。黃連的殺菌作用最理想，50～55mg/ml黃連滅殺幽門螺桿菌的殺菌率達99.00%，而枳實、黃芪健中湯的殺菌功效次之，見表2。

3 討論

胃癌、消化道潰瘍、慢性胃炎等均與幽門螺桿菌有密切關系[3]。目前，專家已經(jīng)從分子、基因水平來開展幽門螺桿菌的致病機制[4]。臨床上經(jīng)歷了單一抗菌藥、2種抗菌藥、三重治療的幽門螺桿菌的治療過程，其中，三重治療的效果最顯著，其根除率可達90.00%[5]。但是，化學合成藥物的毒副作用限制了藥物的治療效果，且治療費用較高，推廣應用難度較大。因此，關于中藥制劑滅殺幽門螺桿菌的研究也逐漸受到關注。

本次研究中，一定濃度的黃連、黃芪健中湯和枳實可有效滅殺幽門螺桿菌，可將幽門螺桿菌的菌落數(shù)從107CFU/ml降至106CFU/ml，逍遙湯和紫草的滅菌效果隨著中藥制劑的濃度增大而增強。可見，這5種中藥制劑均具有一定的滅殺幽門螺桿菌的功效。本次研究中，黃連的殺菌作用最理想，50～55mg/ml黃連滅殺幽門螺桿菌的殺菌率達99.00%，而枳實、黃芪健中湯的殺菌功效次之。小檗堿是黃連發(fā)揮抑菌功效的主要成分，純小檗堿與黃連粗提取物的抑菌效果基本相同，但是其具體抑菌機制仍有待進一步研究。通常認為小檗堿可以對細菌的增殖和呼吸產(chǎn)生抑制作用，使細菌體內的糖代謝過程受到干擾，影響其脫氧反應的正常進行，從而達到滅菌的目的。總上所述，黃連的殺菌作用最強，其次為枳實、黃芪健中湯。

參考文獻：

[1]曹鵬飛.英連金化濁解毒方治療慢性萎縮性胃炎的臨床與實驗研究[D].河北醫(yī)科大學，2011.

[2]王彥.Hp相關性慢性胃炎證素研究及中醫(yī)藥治療的療效評價研究[D].北京中醫(yī)藥大學，2013.

[3]張麗穎.中藥聯(lián)合標準三聯(lián)療法提高幽門螺桿菌根除率的臨床療效評價研究[D].中國中醫(yī)科學院，2013.

[4]黃衍強，黃干榮，李曉華，等.中藥提取物對耐藥幽門螺桿菌生物膜形成的影響[J].醫(yī)藥導報，2013，12（11）：1407-1409.

[5]榮茜，胡德兵，李英倫.中藥抑制幽門螺桿菌及其作用機制的研究進展[J].中成藥，2015，20（08）：1795-1799. 編輯/哈濤