熱毒寧注射液對巨細胞病毒性心肌炎小鼠SOD活性及MDA含量的影響

范群雄 李崢嶸

湖北 十堰 442000）

摘要：目的 觀察熱毒寧注射液對病毒性心肌炎（VMC）小鼠血漿SOD活性及MDA含量的影響，探討熱毒寧注射液對病毒性心肌炎小鼠的抗炎保護作用。方法 40只雄性BALB/c小鼠隨機分為四組：空白組（A組）、模型組（B組）、更昔洛韋注射液組（C組）、熱毒寧注射液組（D組），每組10只。A組腹腔注射0.5 ml生理鹽水，連續注射10 d；B、C、D各組首先腹腔注射巨細胞病毒（CMV）懸液0.1 ml，0.5 min后分別注射生理鹽水、更昔洛韋注射液、熱毒寧注射液各0.4 ml，連續治療10 d；10 d后采集血液，采用采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法檢測血清SOD活性及MDA含量。結果 與B組相比，C、D組小鼠的SOD活性顯著升高，MDA含量明顯降低（P<0.05），但C、D組相比無明顯差別。結論 熱毒寧注射液具有抗炎作用，對治療病毒性心肌炎小鼠具有一定的療效。

關鍵詞：病毒性心肌炎；熱毒寧注射液；SOD；MDA；小鼠

心肌炎主要是由病毒感染、化學物質損傷或自身免疫引起的心肌局灶性或彌漫性炎性病變。心內膜穿刺的病理檢查結果表明，大約60%心肌炎患者的心肌細胞病毒檢測為陽性[1]，這種因病毒感染心肌細胞而引起的心肌炎稱為病毒性心肌炎。大約有20%病毒性心肌炎患者逐漸演變為擴張型心肌病，其致殘致死率高[2]。能引發心肌炎的病毒較多，其中以柯薩奇病毒感染最為常見，CMV也是侵犯心肌的重要病毒之一。近年來，病毒性心肌炎患者發病率逐年上升，但具有明確療效的治療藥物卻為數不多。本課題研究了熱毒寧注射液對巨細胞病毒性心肌炎小鼠的抗炎保護作用。

1 資料與方法

1.1實驗病毒、動物 CMV由徐州醫學院附屬醫院急診實驗室贈予，40只6～8w齡雄性BALB/c健康小鼠，體重25 g左右，購自湖北醫藥學院實驗動物中心。

1.2實驗試劑、藥物SOD及MDA測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，更昔洛韋注射液購自湖北科益藥業有限公司，熱毒寧注射液由連云港康緣藥業有限公司生產。

1.3動物分組、取材 將40只6w齡雄性BALB/c健康小鼠隨機分為四組：空白組（A組）、模型組（B組）、更昔洛韋注射液組（C組）、熱毒寧注射液組（D組），每組10只。A組腹腔注射0.5 ml生理鹽水，連續注射10 d；B、C、D各組首先腹腔注射10-4LogTCID50CMV懸液0.1 ml[3]，0.5 min后分別注射生理鹽水、更昔洛韋注射液、熱毒寧注射液各0.4 ml，連續治療10d； 10 d后眼球摘除取血法采集血液約1.0 ml，離心后，-20℃冰箱中保存，以檢測SOD活性及MDA含量。

1.4血清SOD及MDA含量檢測 按照SOD及MDA試劑盒說明書步驟進行操作，檢測SOD及MDA含量。

1.5統計學處理 計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用SPSS13.0軟件處理數據。多組定量資料間的比較進行方差齊性檢驗，若方差齊采用單因素方差分析，若方差不齊采用Dunnett's T3（3）檢驗。單因素方差分析中的兩兩比較采用SNK法檢驗，檢驗水準為α=0.05，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

與模型組相比，熱毒寧組、更昔洛韋組SOD活性顯著升高，MDA含量明顯降低（P<0.05），但熱毒寧組與更昔洛韋組相比較無統計學意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

心肌炎是一種彌漫性或局限性的心肌炎性病變，其詳細發病機制尚不清楚，可能與病毒本身對心肌的直接損傷及其引起的免疫反應有關[4]，目前缺乏特效的病毒根治方法。熱毒寧注射液是復方中草藥注射劑，有效成分為青蒿、金銀花、梔子，具有解熱、抗病毒、抗細菌、增加免疫等藥理作用。現代藥理學研究表明，青蒿含倍半萜內酯、黃酮類、青蒿酮，具有抗病毒、解熱、抗炎、抗氧化、鎮痛等作用。

VMC的發生與脂質過氧化反應增強有關，VMC時受損的心肌細胞產生的氧自由基破壞了原來的動態平衡，引發了脂質過氧化反應，而氧自由基的清除依賴抗氧化酶系的作用[5]。SOD是抗氧化酶系中的主要抗氧化酶，其活性高則抗氧化作用強。MDA是脂質過氧化反應的中間產物，其含量多少體現了氧化損傷的程度。

本研究結果顯示，熱毒寧注射液組小鼠SOD活性升高，MDA含量降低，但與更昔洛韋組無明顯差別，表明熱毒寧注射液具有抗氧化作用，其可使VMC小鼠的SOD活性升高，清除過表達的氧自由基，改善動態失衡，減少脂質過氧化反應，從而減少中間產物MDA含量抑制炎癥反應。為臨床熱毒寧注射液治療病毒性心肌炎提供了實驗依據，但熱毒寧注射液治療病毒性心肌炎的具體作用靶點尚有待于進一步研究。

參考文獻：

[1]Luo H ， Wong J ， Wong B .Protein degradation systems in viral myocarditis leading to dilated cardiomyopathy[J].Cardiovascular Research， 2010， 85（2）： 347-356.

[2]Olimulder MA， Van Es J， Galjee MA.The importance of cardiac MRI as a diagnostic tool in viral myocarditis induced cardiomyopathy[J]. Netherlands Heart Journal， 2009， 17（12）： 481-486.

[3]WangYX， Da Cunba V， MartinMcNuhy B. Inhibition of Rho-kinase by fasudil attenuated Angiotensin II induced cardiac hypertrophy in apolipoprotein E deficient mice[J].Eur J Pharmacol， 2005， 512（223）：215-222.

[4]Shauer A， Gotsman I， Keren A， Zwas DR， Hellman Y， Durst R， Admon D. Acute viral myocarditis： current concepts in diagnosis and treatment[J].Isr Med Assoc J， 2013， 15（3）： 180-185.

[5]周曉春，顔勇，王寶忠，等.生黃合劑對病毒性心肌炎小鼠血清SOD活性和MDA含量的影響[J].承德醫學院學報，2008，1（25）：10-12

編輯/金昊天