探尋“抑菌能手”

向昌亮

近年來，隨著各大媒體對食品中違法使用添加劑、防腐劑現象的曝光，人們對食品和生活用品的安全感持續(xù)降低，食品和日化行業(yè)的原料也從化工合成逐漸向天然提取發(fā)展，且需求量與日俱增。

柑橘類果皮中含黃酮類物質，具有抗菌消炎、抗過敏、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗氧化、抗癌作用，既可用來制藥又可作為食品添加劑。湘西盛產橙子、橘子和柚子，它們都屬于柑橘類，它們的果皮萃取液是否可以作為抗菌劑？

大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和芽孢桿菌等常見細菌易對日常生活造成困擾，所以我想通過實驗研究不同柑橘類果皮萃取液的抗菌、滅菌效果。

一、材料與方法

（一）儀器與試劑

手套、燒杯、量筒、酒精燈、竹簽、培養(yǎng)皿、超凈工作臺、高壓滅菌鍋、 紫外分光光度計、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋等。去離子水、滅菌雙蒸水、75%的乙醇、細菌基本培養(yǎng)基（LB）等。

（二）實驗樣品

1.橘皮。取自湘西本地產的橘子。

2.酸柚皮。取自湘西本地產的酸柚。

3.橙子皮。取自超市購買的普通食用臍橙。

稱取橘皮、酸柚皮、橙子皮各200g。

（三）實驗步驟

1.將橘子、酸柚、橙子的果皮分別搗碎，用200ml無菌水浸泡獲得1g/ml果皮汁液。

2.把不同種類、濃度的果皮汁液添加到液體培養(yǎng)基中，以不加果皮汁的全培養(yǎng)基為對照組。

3.將添加不同果皮汁液和無菌水的培養(yǎng)基分成小份，分別接種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和芽孢桿菌，并置于37℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，每隔6h取微量菌液，適當稀釋，用紫外分光光度計測定其活菌濃度。

4.以時間為橫坐標、菌體濃度為縱軸繪制生長曲線，根據觀察比較不同柑橘類果皮汁液的抗菌效能。

二、結果與分析

比較分析三種柑橘類果皮萃取液不同濃度下不同接種菌株菌液中菌體的濃度，結果如下。

1.對金黃色葡萄球菌的抗菌情況

在無添加果皮汁的對照組中，每個時期菌液濃度都明顯高于同一時期已添加果皮汁的菌液濃度。添加果皮汁后的該細菌生長速度明顯延遲，至12h才達到對照組6h時的菌液濃度，且穩(wěn)定期的菌液濃度始終處于對照組菌液最高值的一半左右，36h后進入衰亡期。

因此，三種果皮汁對金黃色葡萄球菌的生長具有明顯的抑制作用，且相差不大，酸柚皮汁原液和按1∶5進行混合時的抑菌效果最好。

2.對大腸桿菌的抗菌情況

柑橘類果皮萃取液對大腸桿菌的抗菌效果明顯。在無添加果皮汁的對照組中，每個時期菌液濃度明顯高于同一時期已添加果皮汁的菌液濃度。添加果皮汁后的該細菌生長速度明顯延遲，至12h大部分加了果皮汁的培養(yǎng)基中菌液濃度都明顯低于對照組6h時的菌液濃度，且穩(wěn)定期的菌液濃度明顯低于對照組菌液最高值的一半左右。

因此，三種果皮汁對大腸桿菌的生長具有明顯的抑制作用且相差不大，其中最低值均出現在酸柚皮汁原液和按1∶5進行混合的培養(yǎng)基中。

3.對芽孢桿菌的抗菌情況

在無添加果皮汁的對照組中，每個時期菌液濃度都明顯高于同一時期已添加果皮汁的菌液濃度。添加果皮汁后的該細菌生長速度明顯延遲，且每種果皮汁不同濃度的抑菌效果區(qū)別也較明顯，菌液最低值出現在酸柚皮汁原液的培養(yǎng)基中。

因此，三種果皮汁對芽孢桿菌的生長具有明顯的抑制作用，并且酸柚皮汁原液的抑菌效果最好，與酸柚皮汁和液體培養(yǎng)基按1∶5進行混合時相差不大，橘皮汁原液次之，橙皮汁原液效果不明顯。

三、結論

各生長時期菌液中菌體的數量均明顯低于對照組，因此，三種柑橘類果皮萃取液的抗菌效果明顯，且生長曲線的趨勢與對照組基本一致，這與生長過程中抗菌物質的消耗有關。

抑菌效果與果皮萃取液的濃度呈正比，濃度越高抑菌效果越強。同時，不同柑橘果皮萃取液的抗菌效果存在差異，且對不同細菌的抑菌效果差異明顯。

本實驗只是初步探討了三種柑橘類果皮萃取液的抗菌效果，驗證了柑橘類果皮萃取液具有抗菌的作用，由于技術和設備受限未能對果皮萃取液進行標準化，即統(tǒng)一標定，因此無法比較各種柑橘果皮萃取液的抗菌差異，也無法準確給出柑橘果皮萃取液的抗菌效能。

萃取液中物質成分復雜，可能存在多種物質都具有抗菌作用的情況。因此，在進一步的探索中可將果皮萃取液進行標準化，從而比較各種柑橘果皮萃取液的抗菌差異和抗菌效能，進一步測定各種柑橘果皮萃取液中的化合物組成，確定其中的抗菌物質。（指導老師：楊生巖 康麗華 杜 盈）