四川不同產地厚樸總生物堿的含量分析

董佳悅，劉美琳，任波，張梅

·品種品質·

四川不同產地厚樸總生物堿的含量分析

董佳悅，劉美琳，任波，張梅

目的：測定四川不同產地厚樸中總生物堿的含量，為四川產區優質種質資源篩選及質量標準研究提供參考。方法：采用非水滴定法分別測定16批四川不同產地二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸中總生物堿的含量，并對測定結果進行分析比較。結果：16批四川不同產地川厚樸中總生物堿含量為3.3978 mg·g-1～6.9111 mg·g-1，其中峨眉山市的茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村四個產地厚樸的總生物堿含量較其他產地高，分別為6.0625±0.1715 mg·g-1、6.2058±0.1850 mg·g-1、6.9111±0.0662 mg·g-1、6.0490±0.0809 mg·g-1，都江堰龍池鎮虹口景區觀風溝和丫口產區川厚樸總生物堿含量則低于其他產區，分別為3.3978±0.0519mg·g-1、3.4380±0.0670mg·g-1。結論：四川境內厚樸中總生物堿的含量存在明顯差異，其中尤以峨眉山市生物堿的含量較高。

厚樸;生物堿;含量測定；種質資源

厚樸又名川樸、油樸、紫油厚樸等。《中華人民共和國藥典》（2015年版）收載中藥厚樸為木蘭科植物厚樸Magnolia offcinalis Rehd.et Wils或凹葉厚樸Magnolia offcinalis Rehd.et Wils. var. bilobaRehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。其氣香，味辛辣、 微苦，具有燥濕消痰、下氣除滿的功效，用于濕滯傷中、脘痞吐瀉、痰飲喘咳等癥[1]。厚樸作為大宗常用中藥，其資源分布較廣。《本草經集注》曾記載: 厚樸“今出建平、宜都。今四川東部、湖北西部等地[2]。隨著近年來厚樸資源調查發現，現代厚樸資源主要分布在四川西南部、湖北西部、陜南及甘南等地[3]。化學研究方面發現厚樸藥材中主要包含三類化學物質，分別為木脂素類、揮發油類及生物堿類成分，其中木脂素類成分中主要以厚樸酚、和厚樸酚兩種成分為主；其次揮發油中主要以桉葉醇含量最高；而生物堿類成分較其兩類成分含量較少，主要包括異啉類（木蘭箭毒堿、木蘭花堿）和有機胺類（柳葉木蘭堿）兩大類生物堿，其中異喹啉類生物堿廣泛存在于木蘭科植物中，具有較高藥用價值[4～6]。生物堿作為厚樸中主要化學成分之一，現代藥理藥效研究表明，生物堿有鎮痛、抗菌、降壓、松弛肌肉和抑制中樞等作用，其中一些生物堿有抑制氣管收縮作用，從而對哮喘有一定的治療作用[7]。但同時生物堿也是厚樸的主要毒性成分[8]。

四川自古至今作為厚樸的主要產區之一，因其出產的厚樸品質優良，療效佳，因此也是厚樸的道地產區之一。而四川境內地域遼闊，厚樸種質資源遍布了都江堰市、樂山市（沐川、馬邊等）、阿壩州（松潘、汶川、茂縣等)、峨眉山市等多個地區。據相關文獻報道不同品種、不同產地間化學成分組成及含量差異顯著[9～10]。因此我們采集了四川省內16個不同產地的二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸，對其中總生物堿成分的含量進行了研究與比較，現將分析結果報告如下。

1 材料

1.1 藥材

厚樸藥材樣品分別從四川都江堰、峨眉山、樂山、眉山、阿壩州五個地區，16個厚樸產地集，由成都中醫藥大學中藥資源與鑒定系裴瑾教授鑒定。均為木蘭科植物厚樸Magnolia offcinalis Rehd.Et Wils.的干燥干皮。厚樸來源見表1。

表1 厚樸藥材來源

1.2 儀器

BT 125D型電子天平（北京賽多利斯科學儀器有限公司），RE-5203旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）、2 mL半微量滴定管（天長市金橋分析儀器廠）。

1.3 試劑

試劑：甲醇、冰醋酸、醋酐、高氯酸、結晶紫均為分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

2 方法與結果

2.1 測定方法

2.1.1 供試品溶液的制備 取待測樣品粉末(通過四號篩)約1.5 g，精密稱定,置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，稱定重量,搖勻。室溫放置過夜(16小時以上)，再稱定重量。補足損失的溶劑量，振搖后放置,過濾得樣品溶液。

2.1.2 總生物堿含量測定 參考相關文獻[11～12]和《中華人民共和國藥典》（2015年版）四部“通則0702”非水溶液滴定法項下“第一法”測定[13]。精密量取供試品溶液10 mL，旋轉蒸干，殘渣加無水冰醋酸15 mL使溶解，加結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.02mol·L-1)滴定至藍色，讀取體積，計算各樣品中總生物堿總含量。樣品含生物堿以木蘭箭毒堿(C19H24NO3)計算。

2.2 結果

16批不同產地川產厚樸的總生物堿含量比較結果見表2所示。

表2 各樣品中總生物堿含量測定結果（X±SD，n=3）

從表2可以看出，16批四川不同產地川厚樸中總生物堿含量為3.3978 mg·g-1～ 6.9111mg·g-1，其中峨眉山市茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村四個產地厚樸的總生物堿含量較其他產地高，分別為6.0625±0.1715mg·g-1，6.2058±0.1850 mg·g-1，6.9111±0.0662 mg·g-1，6.0490±0.0809 mg·g-1，而都江堰龍池鎮虹口景區觀風溝和丫口兩個地點厚樸總生物堿含量相對較低，分別為3.3978±0.0519 mg· g-1，3.4380±0.0670 mg·g-1。綜合分析16批四川不同產地川厚樸大致劃分為峨眉山、眉山、樂山、都江堰及阿壩州五個區域，發現厚樸中總生物堿含量從高到低分別為峨眉山＞樂山＞阿壩州＞眉山＞都江堰，以峨眉山區域的厚樸中總生物堿的含量較高，都江堰產區厚樸中生物堿含量較低。

3 討論

厚樸作為我國珍貴中藥材，有著廣泛的藥效作用和經濟價值。由于種質資源的過度消耗，野生資源日益枯竭，大多數野生厚樸藥材質量難以達到“安全、有效、可控、穩定”的品質要求。又因其栽培地區廣，采收年限差異大，且藥材來自不同部位，從而造成厚樸藥材品質參差不齊。四川是厚樸的主要產區之一，也是資源高消耗地區，四川各地產厚樸藥材的品質也存在一定的差異。已有的厚樸質量控制指標主要以其中所含木脂素類成分厚樸酚、和厚樸酚的含量作為標準，而未考慮其他兩類化學成分生物堿和揮發油。生物堿作為厚樸的主要成分之一，雖然其含量較木脂素類成分低，近年來研究發現其具有抑菌、抗腫瘤、抗炎、肌肉松弛、促進胃腸蠕等作用[14]，同樣印證了厚樸對脘痞吐瀉、痰飲喘咳等癥治療作用。因此，有必要將生物堿作為厚樸質量的評價標準之一。本試驗通過對四川省內16個產區二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸中總生物堿的含量進行了測定與分析，結果發現，大部分產區厚樸中總生物堿的含量相近，但個別地區（眉山市的茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村）所產厚樸中生物堿含量較高，與其他產地差異顯著，約為其他產地的1.5～2倍。因此，如將其作為評價指標完善厚樸藥材質量控制方法時，需進一步開展其含量高低與藥效相關性研究。本文研究結果為完善厚樸質量控制方法，篩選川產厚樸優良種源及種源地，提供了一定的科學依據。

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[5] 張淑潔,鐘凌云.厚樸化學成分及其現代藥理研究進展[J].中藥材,2013, 5:838.

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（責任編輯：李蕓霞）

The analysis of total alkaloids content of Houpo from different habitats

/DONG Jia-yue, LIU Mei-lin, REN Bo, ZHANGMei //(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective: To analyze and evaluate the total alkaloid content of Houpo from different producing areas in Sichuan Province to provide a reference for selecting high-quality germplasm resources and study on quality standard. Method: 16 batches Houpo total alkaloid contents from different origins were determined using non-water titration and the results were compared. Result: The total alkaloid content of 16 batches Houpo were in the range of 3.3978 mg·g-1to 6.9111 mg·g-1. The total alkaloid contents of Houpo from Chadi village, Fengshou village, Heye village and Heishui village in Emeishan City were 6.0625±0.1715 mg·g-1, 6.2058±0.1850 mg·g-1, 6.9111±0.0662 mg·g-1, 6.0490±0.0809 mg·g-1, respectively, which were higher than that from other origins. But the contents of total alkaloids in the Guanfenggou and Yakou producing areas in Dujiangyan Longchi Hongkou Scenic spot were 3.3978±0.0519 mg·g-1and 3.4380±0.0670 mg·g-1, which were lower than that from other origins. Conclusion: There are obvious differences in the contents of Houpo total alkaloids, and Houpo from Emeishan City has the highest contents.

Houpo; alkaloids; content detection; germplasm Resources

R 284.2

A

1674-926X(2016)06-003-03

四川省科技計劃項目“中藥種質資源庫建設關鍵技術研究及示范”，項目編號2014SZ0156

成都中醫藥大學藥學院 中藥材標準化教育部重點實驗室 中藥資源系統研究與開發利用省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137

董佳悅（1991-），女，碩士在讀，研究方向為中藥有效成分分析研究. Tel:18280270918 Email:1070994058@qq.com

任波（1979-），男，副教授，從事中藥及復方物質基礎研究 Tel:(028)61800231 Email:bobofuly@163.com張梅（1963-），女，教授，博士生導師，從事中藥及其復方物質基礎及質量標準化研究工作

Tel:(028)61800231 Email:zhangmei63@126.com

2016-03-08