星狀神經節阻滯對多器官功能障礙綜合征家兔血漿SP和CGRP的影響*＊?

吳德丹，毛冬梅，張忠杰，姚　旌＊＊

(1.貴州醫科大學研究生院，貴州貴陽　550004; 2.貴州醫科大學附院疼痛科，貴州貴陽　550004)

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星狀神經節阻滯對多器官功能障礙綜合征家兔血漿SP和CGRP的影響*＊?

吳德丹1，毛冬梅1，張忠杰2，姚旌2＊＊

(1.貴州醫科大學研究生院，貴州貴陽550004; 2.貴州醫科大學附院疼痛科，貴州貴陽550004)

［摘要］目的:觀察星狀神經節阻滯(SGB)對多器官功能障礙綜合征(MODS)家兔血漿P物質(SP)和降鈣素基因相關肽(CGRP)水平的影響。方法:成年健康家兔30只，分為MODS組、SGB組和對照組，每組10只; 3組家兔麻醉后分離右側星狀神經節，術后第8天MODS組和SGB組采用“二次打擊”和腹腔注射內毒素制作家兔MODS模型，SGB組家兔注射內毒素1 h后立即行右側SGB，對照組家兔僅腹腔注射等劑量生理鹽水;分別于失血性休克前(T0)、注射LPS后12 h時(T1)、24 h時(T2)、36 h時(T3)及48 h時(T4)用放射免疫法檢測血漿SP、CGRP含量。結果: MODS組和SGB組各時間點血漿SP含量較對照組增加(P＜0.05)，且MODS組較SGB組升高更明顯(P＜0.05) ; MODS組和SGB組各時間點血漿CGRP含量較對照組增加(P＜0.05)，且MODS組較SGB組升高更明顯(P＜0.05)。結論: MODS家兔血漿中SP、CGRP增加，SGB能調節SP、CGRP表達，提示SGB 對MODS有一定的積極意義。

［關鍵詞］星狀神經節;神經傳導阻滯;多器官功能障礙; P物質;降鈣素基因相關肽

＊＊通信作者E-mail: gyfyyaoj@163.com

網絡出版時間: 2016－02－23網絡出版地址: http: / /www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160223.2007.030.html

多器官功能障礙綜合征(MODS)是外科ICU的首位死因，其發病機制可能是抗炎和促炎反應失調，炎性介質P物質(SP)及降鈣素基因相關肽(CGRP)是MODS重要和敏感的標志指標。星狀神經節阻滯(SGB)能使植物神經系統、內分泌系統、免疫系統等保持穩定功能。本實驗通過觀察SGB對MODS家兔血漿SP及CGRP含量的影響，探討SGB治療MODS的可能機制。

1　材料與方法

1.1動物準備及分組

30只健康6月齡大耳白家兔由貴州醫科大學實驗動物中心提供，雌雄不限，體重(2.5±0.2) kg。所有家兔耳緣靜脈注射3%戊巴比妥(1 mL/kg)麻醉后，仰臥固定，暴露右側星狀神經節，硬膜外導管剪去頭端側孔置于星狀神經節處，另一端自頸前向后引出并固定。術中及術后應用抗生素預防感染。于術后第8天隨機將30只家兔分為MODS組、SGB組和對照組，每組10只。MODS組根據“二次打擊”學說［1－2］復制家兔失血性休克并內毒素誘發MODS模型: 3%戊巴比妥(1 mL/kg)耳緣靜脈注射麻醉，分離右側股動脈并插管，監測血壓正常后，在15 min內快速抽血(肝素化后室溫保存)至使家兔平均動脈壓降至40 mmHg左右，維持60 min，隨后回輸全部血液(回輸時間＞30 min) ;監測家兔血壓正常平穩后，腹腔注射內毒素(LPS) (10 μg/kg)，誘發全身炎癥反應綜合征(SIRS)。SGB組10只家兔先按上述方法建立MODS模型，注射LPS后1 h時行右側SGB，于留置導管推入0.25%布比卡因注射液0.5 mL，出現Horner綜合征(SGB側瞳孔縮小、結膜充血、眼球下陷、眼瞼下垂等)為阻滯成功。對照組家兔僅腹腔注射生理鹽水20 mL，1 h后自留置導管推入生理鹽水0.5 mL。所有家兔處理完后均放回籠中自由飲水和進食。

1.2觀察指標

觀察3組家兔精神、飲食、活動、呼吸、心率、肛溫等一般情況。MODS組和SGB組分別于失血性休克前(T0)、注射LPS后12 h(T1)、24 h(T2)、36 h (T3)及48 h(T4)時間點留取血漿，采用酶聯免疫法檢測血漿SP、CGRP含量;對照組于腹腔注射生理鹽水之前(T0)、注射生理鹽水后12 h(T1)、24 h (T2)、36 h(T3)及48 h(T4)時間點留取血漿，用酶聯免疫法檢測血漿SP、CGRP含量。標本留取完畢后，取3組家兔肝臟左葉、肺左下葉以及小腸組織作細胞形態檢查。

1.3統計學方法

應用SPSS 22.0軟件包進行數據處理，計量指標用均數±標準差(±s)表示，組間比較用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1一般情況

MODS組和SGB組家兔在注射LPS后24～48 h均有不同程度的精神萎靡、進食量減少、活動減少、呼吸淺快、心率增快、肛溫升高或降低，少尿甚至無尿，MODS組較SGB組更明顯，對照組家兔實驗過程中一般情況較好。

2.2血漿SP

與T0比較，MODS組和SGB組在T1時點SP水平顯著升高(P＜0.01)，T2～T4時點持續升高，對照組各時點SP水平變化無統計學意義(P＞0.05) ;與對照組比較，MODS組和SGB組在T1時點SP水平顯著升高(P＜0.01)，MODS組較SGB組升高更明顯(P＜0.05)。見表1。

2.3血漿CGRP

與T0比較，MODS組和SGB組在T1時點CGRP水平顯著升高(P＜0.01)，T2～T4時點持續升高，對照組各時點CGRP水平變化無統計學意義(P＞0.05) ;與對照組比較，MODS組和SGB組在T1時點CGRP水平顯著升高(P＜0.01)，MODS組較SGB組升高更明顯(P＜0.05)。見表2。

2.4病理學檢查

肉眼觀察: MODS組和SGB組家兔肺組織均有不同程度體積變大，表面瘀斑、出血，肺切面實變;肝體積增大，表面有出血點;腸黏膜可見瘀斑、出血、潰瘍形成等;其中肺組織病變較為嚴重。MODS組和SGB組比較，MODS組變化更明顯。組織學切片: MODS組肺組織肺泡壁破壞嚴重，肺間質及肺泡腔有滲出和出血，大量粒細胞浸潤，肺泡腔內透明膜形成;肝細胞明顯水腫，肝血竇擴張，匯管區可見大量中性粒細胞及枯否氏細胞，部分肝細胞壞死。小腸黏膜上皮細胞變性、壞死、脫落，黏膜腺體萎縮，固有膜有中性粒細胞浸潤。SGB組肺、肝、腸均有不同程度的以上病理變化，但較MODS組變化輕微，對照組肺、肝、腸為正常組織。

表1　3組家兔血漿SP水平(±s)Tab.1　Changes of plasma SP content of three groups

表1　3組家兔血漿SP水平(±s)Tab.1　Changes of plasma SP content of three groups

(1)與T0比，P＜0.01;(2)與對照組比，P＜0.01;(3)與SGB組比，P＜0.05

組別各時點血漿SP(ng/L) T0　T1　T2　T3　T4MODS組　181.49±6.43　 245.58±34.70(1) (2) (3)268.32±43.42(1) (2) (3)280.16±36.31(1) (2) (3)293.50±36.28(1) (2) (3)180.36±5.07　180.84±5.19 SGB組　184.33±4.12　 236.88±19.36(1) (2)　249.88±24.44(1) (2)　261.14±30.98(1) (2)　264.22±37.22(1) (2)對照組　179.76±6.69　 180.05±4.10　180.22±4.90

表2　3組家兔血漿CGRP水平(±s)Tab.2 Changes of plasma CGRP content of three groups

表2　3組家兔血漿CGRP水平(±s)Tab.2 Changes of plasma CGRP content of three groups

(1)與T0比，P＜0.01;(2)與對照組比，P＜0.01;(3)與SGB組比，P＜0.05

組別　　各時點血漿CGRP(ng/L) T0　T1　T2　T3　T4MODS組　29.95±2.11　 86.67±38.96(1) (2) (3)98.80±33.73(1) (2) (3)124.95±36.77(1) (2) (3)　113.10±38.94(1) (2) (3)1.76±2.10　32.31±2.12 SGB組　31.76±2.54　 70.14±19.55(1) (2)　81.76±19.34(1) (2)　82.35±17.10(1) (2)　82.96±18.76(1) (2)對照組　31.66±2.76　 32.10±2.31　31.47±2.26　3

3　討論

星狀神經節由頸下神經節和胸1神經節融合而成，屬于全身交感神經系統的一部分。將局麻藥注射至星狀神經節周圍的結締組織，即為SGB。臨床工作中，常應用SGB治療頭、面、頸及上肢的疼痛。本研究旨在探討通過SGB對全身各系統的調節作用而達到治療MODS的目的。首先，本實驗觀察SGB對MODS家兔一般情況的影響，結果顯示SGB組較MODS組SIRS的癥狀較輕，一般情況較好，而對照組一般情況接近正常家兔，排除SGB置管及腹腔注射等操作對實驗結果的干擾。從直觀上表明SGB可以改善MODS的癥狀，對MODS起到一定的保護作用。再次，本實驗還觀察了各組家兔重要臟器的病理改變，結果顯示MODS組重要臟器的病理變化符合MODS的診斷標準，且組織病理改變出現時間較早，程度較重，符合臨床MODS的變化規律，說明本實驗造模成功。而SGB組重要臟器的雖然也呈現不同程度變性壞死的病理改變，但總體變化程度較MODS組輕，故從病理層面說明SGB對MODS臟器起到保護作用。

MODS的發病機制極為復雜，目前普遍認可的觀點是抗炎和促炎反應失調。嚴重創傷觸發最初的炎性反應，機體產生大量的炎癥介質、細胞因子形成“瀑布效應”，一旦這種全身炎癥得不到控制，將推進MODS的進一步發展，導致死亡。SP及CGRP作為重要的致炎因子參與MODS的形成和發展。研究表明，SP可作為炎性因子參與急性胰腺炎引起的肺損傷［3］及肝損傷［4］，SP在腸道內毒素移位中有一定的促進作用［5］，并參與內毒素引起的發熱［6］，參與急腹癥、腦源性引起的MODS形成過程［7－8］，Dahiya P等［9］報道，在燒傷導致的多器官衰竭的疾病發展中，SP和其他炎性介質如TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-2一起介導了器官功能進一步損傷。CGRP是目前已知最強的內源性血管舒張物質之一，CGRP與炎癥細胞、免疫細胞、炎癥介質等相互作用。實驗表明，CGRP能夠使IL-1β、IL-6、TNF-α釋放增加，且呈時間－劑量依懶性，同時，這些炎癥介質又可以促進CGRP的釋放［10］。王憲等［11－12］關于CGRP的一系列研究表明，內毒素休克動物模型和敗血癥病人導致的MODS中，患者血漿中CGRP顯著升高。本實驗表明，多器官功能衰竭早期即有SP、CGRP釋放增加，明顯高于對照組(P＜0.01)，SGB組血漿SP、CGRP含量低于MODS組，提示SGB能夠通過調節SP、CGRP的含量，抑制MODS的炎癥反應及其可能導致的多器官功能進一步損害。SGB可抑制交感神經系統活性增高，恢復交感－迷走神經間的平衡，減輕應激反應，減少SP、CGRP的釋放。SGB可通過增加免疫細胞活性、調節炎癥因子含量等達到調節全身免疫系統的作用。SGB還可穩定細胞膜，對抗SP、CGRP引起的炎癥反應。

綜上，SGB能夠調節血漿中SP、CGRP的含量，可能逆轉MODS的炎性反應，為臨床治療MODS提供新的思路。

4　參考文獻

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(2015－08－25收稿，2015－12－30修回)

中文編輯:戚璐;英文編輯:趙毅

Effects of Stellate Ganglion Block on the Plasma Contents of Substance P and Calcitonion Gene-Related Peptide in Rabit Model of Multiple Organ Dysfunction Syndrome

WU Dedan1，MAO Dongmei1，ZHANG Zhongjie2，YAO Jing2
(1.Graduate College，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，Chian; 2.Department of Pain Management，Affiliated Hospital of Guizhou Medical University，Guiyang 550004，China)

［Abstract］Objective: To investigate the effects of stellate ganglion block (SGB) on plasma contents of substance P (SP) and calcitonion gene-related peptide (CGRP) in rabbits with multiple organ dysfunction syndrome (MODS).Methods: Thirty rabbits were divided into three groups: MODS model group，SGB treatment group and control group with 10 in each; the right stellate ganglion of three groups rabbits were separated after anesthesia，Second-Strike were adopted on MODS group and SGB group on 8D after operation，and endotoxin intraperitoneal injection was applied to produce rabbits MODS model; rabbits of SGB group were performed with right SGB right after 1 h of endotoxin injection，RIA was adopted to test plasma SP and CGRP content before hemorrhagic shock (TO)，12 h after LPS injection (T1)，24 h (T2)，36 h (T3) and 48 h (T4).Results: Plasma SP content increased at each time point in MODS and SGB groups compared with control group (P＜0.05)，the contents of plasma SP in MODS group increased significantly than SGB group(P＜0.05) ; plasma CGRP content increased at each time point in MODS and SGB groups compared with control group (P＜0.05).Conclusion: The content of SP and CGRP increased in rabbits plasma with MODS，the SGB could regulatebook=183,ebook=64expression of SP and CGRP，it is suggested that SGB may play an active role in treatment of MODS.［Key words］stellate ganglion block; nerve block; multiple organ dysfunction; P matters; calcitonion gene-related peptide

*［基金項目］貴州省科技支撐計劃項目(S2011SP00203679449)

［中圖分類號］R458

［文獻標識碼］A

［文章編號］1000-2707(2016) 02-0182-03