中華獼猴桃根乙酸乙酯部分化學(xué)成分研究

摘要：對(duì)中華獼猴桃（Actinidia chinensis Planch.）根乙酸乙酯部分的化學(xué)成分進(jìn)行研究，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取中華獼猴桃根的醇提取物，應(yīng)用多種色譜技術(shù)對(duì)乙酸乙酯部分進(jìn)行分離和純化，通過波譜數(shù)據(jù)分析（MS，1H-NMR，13C-NMR）進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明，從乙酸乙酯萃取部分分離得到6個(gè)化合物，經(jīng)鑒定為2α，24-二羥基烏蘇酸、Jacoumaric acid、2α，3α，23-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸、2α，3α，23-三羥基-12，20（30）-二烯-28-烏蘇酸、3β，6α-二羥基豆甾烷、SitoindosideⅠ。其中化合物1、2、5、6首次從該植物中分離鑒定。

關(guān)鍵詞：中華獼猴桃（Actinidia chinensis Planch.）；三萜；甾體

中圖分類號(hào)：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）20-5359-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.20.048

Abstract： To study the chemical constituents from the root of Actinidia chinensis. The root of Actinidia chinensis was extracted with 95% EtOH. The EtOH extract was suspended in H2O and extracted with petroleum ether，EtOAc and BuOH successively. The compounds were isolated with column chromatography from the EtOAc fraction，and elucidated on the basis of spectral analyses（MS，1H-NMR，13C-NMR）. The results showed that six compounds were isolated from the root of Actinidia chinensis，and the structures were identified as 2α，24-dihydroxyursolic acid，Jacoumaric acid，2α，3α，23-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid，2α，3α，23-trihydroxyurs-12，20（30）-dien-28-oic acid， Stigmastane-3β，6α-diol，SitoindosideⅠ. Compounds 1、2、5 and 6 were obtained from the root of Actinidia chinensis for the first time.

Key words：Actinidia chinensis； triterpenoids； sterides

中華獼猴桃（Actinidia chinensis Planch.）為獼猴桃科獼猴桃屬漿果類藤本果樹[1]，主要分布在中國東部。其根部入藥，具有解熱解毒、生津潤燥、活血消腫、祛風(fēng)利濕、散熱止血等功效，主治黃疸、消化不良、風(fēng)濕、跌打損傷、胃癌、乳腺癌等[2，3]。本研究在前人研究的基礎(chǔ)上，對(duì)乙酸乙酯萃取部分進(jìn)行分離，得到4個(gè)三萜類化合物，2個(gè)甾體類化合物。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 材料 中華獼猴桃根采自貴州省凱里市，由中國科學(xué)院昆明植物研究所的雷立公博士鑒定為中華獼猴桃（Actinidia chinensis Planch.）的干燥根。

1.1.2 試劑與儀器 EI-MS用70 Ev電子轟擊源；MS用VG Auto Spec 3000型質(zhì)譜儀測(cè)定；1H-NMR和13C-NMR（DEPT）采用DRX 500及Bruker AM 400核磁共振光譜儀（TMS作為內(nèi)標(biāo)）；柱色譜硅膠（200～300目）、薄層色譜硅膠GF254為青島海洋化工廠生產(chǎn)；Rp-C8、Rp-C18薄層板、柱色譜材料為Merck公司生產(chǎn)。

1.2 提取與分離

中華獼猴桃干燥根10 kg，粉碎后用95%乙醇回流提取3次，每次2 h，減壓濃縮得浸膏。浸膏加適量水懸浮后，依次用石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取并減壓濃縮，取乙酸乙酯部分用氯仿-甲醇溶解后，與硅膠（200～300目）按照質(zhì)量比1∶1拌樣，待溶劑揮干后，進(jìn)行硅膠（400 g，200～300目）柱層析，依次用不同體積比的氯仿/甲醇溶液（100∶0、98∶2、95∶5、90∶10、80∶20）洗脫，薄層色譜法檢測(cè)并合并相似流分，得到F1～F6共6個(gè)組分。F3組分經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚/丙酮（70∶30、65∶35、60∶40）洗脫得到組分1～5。第5組分經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿/丙酮（95∶5、90∶10、85∶15、82∶20）洗脫，再反復(fù)經(jīng)反相RP-18柱層析，甲醇/水（75∶25）洗脫，分離得到化合物1（28 mg）、化合物2（41 mg）、化合物3（78 mg）、化合物4（50 mg）；第4組分經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿/丙酮（90∶10、85∶15）洗脫，再進(jìn)行反相RP-C18柱層析，用甲醇/水（80∶20、90∶10、100∶0）洗脫，分離得到化合物5（212 mg）、化合物6（4 mg）。

1.3 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

對(duì)分離得到的6個(gè)化合物根據(jù)波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并結(jié)合其理化性質(zhì)進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果與分析

化合物1為白色無定型粉末（甲醇），1H-NMR （500 MHz，C5D5N）δ：0.93（3H，d，J=5.8 Hz），0.96（3H，d，J=5.7 Hz），0.95， 0.99， 1.18， 1.58（3H， s， 4×CH3），2.60（1H，d，J=11.3 Hz，H-18），3.56（1H，d，J=9.4 Hz，H-24a），3.70（1H，d，J=10.8 Hz，H-3），4.28（1H，m，H-2），4.44（1H，d，J=10.9 Hz，H-24b），5.44（1H，brs，H-12）；13C-NMR（125 MHz，C5D5N）δ： 47.9（C-1），68.7（C-2）， 5.7 （C-3）， 44.0 （C-4）， 56.4 （C-5）， 19.3 （C-6）， 33.8 （C-7）， 40.0 （C-8）， 48.0 （C-9）， 38.2 （C-10）， 24.2 （C-11）， 125.5 （C-12）， 139.3 （C-13）， 42.5 （C-14）， 28.6 （C-15）， 24.9 （C-16）， 48.1 （C-17）， 53.5 （C-18）， 39.5 （C-19）， 39.5 （C-20）， 31.1 （C-21）， 37.4 （C-22）， 24.2 （C-23）， 65.7 （C-24）， 17.5 （C-25）， 17.4 （C-26）， 23.9 （C-27）， 179.9 （C-28）， 17.3 （C-29）， 21.4 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4，5]對(duì)照，鑒定該化合物為2α， 24-二羥基烏蘇酸（2α，24-dihydroxyursolic acid）。

化合物2為白色無定型粉末（甲醇），1H-NMR （400 MHz， C5D5N） δ： 8.00 （1H， d， J = 15.7 Hz， H-3′）， 7.56 （2H， m， H-5′， 3′）， 7.15 （2H， m， H-6′， 8′）， 6.67 （1H， d， J = 14.0 Hz）， 5.46 （1H， br s， H-12）， 5.26 （1H， d， J = 9.8 Hz， H-3）， 4.29 （1H， td， J = 3.4， 14.6 Hz， H-2）， 2.63（1H， d， J = 11.3 Hz， H-18）， 1.12 （3H， s）， 1.04 （3H， d， J = 8.7 Hz， H-30）， 1.03 （3H， s）， 0.98（3H， s）， 0.96（3H， s）， 0.96 （3H， s）， 0.95 （3H， d， J = 4.8 Hz， H-29）； 13C-NMR （100 MHz，C5D5N） δ： 48.6 （C-1）， 66.4 （C-2）， 85.6 （C-3）， 39.4 （C-4）， 55.5 （C-5）， 18.7 （C-6）， 33.3 （C-7）， 40.0 （C-8）， 48.0 （C-9）， 38.3 （C-10）， 24.2 （C-11）， 125.4 （C-12）， 139.4（C-13）， 42.5（C-14）， 28.7（C-15），23.7（C-16），48.0（C-17），53.5（C-18）， 39.5（C-19），39.4（C-20），29.0（C-21），37.5（C-22），29.0（C-23），17.5（C-24），16.9（C-25），17.4（C-26）， 24.0（C-27），179.9（C-28），18.3（C-29），21.4（C-30）， 167.9 （C-1′）， 116.1 （C-2′）， 144.8 （C-3′）， 126.3 （C-4′）， 130.6（C-5′）， 116.8 （C-6′）， 161.4 （C-7′）， 116.8（C-8′），130.6（C-9′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]對(duì)照，鑒定該化合物為Jacoumaric acid。

化合物3為無色針狀結(jié)晶（甲醇），1H-NMR （400 MHz， C5D5N）δ： 0.95（3H，d，J=6.4 Hz，H-30）， 0.98（3H， d， J = 6.1 Hz， H-29）， 0.87， 1.01， 1.07， 1.14 （各3H， s， 3H×4）， 2.62 （1H， d， J = 11.3 Hz， H-18）， 3.77（1H， d， J = 10.7 Hz， H-23b）， 3.93 （1H， d， J=10.7 Hz，H-23a），4.16（1H， d， J=2.2 Hz， H-3）， 4.29 （1H， m， H-2）， 5.46 （1H， brs， H-12）； 13C-NMR（100 MHz， C5D5N） δ： 42.6（C-1）， 66.3 （C-2）， 78.9 （C-3）， 40.1 （C-4）， 43.5 （C-5）， 18.3 （C-6）， 33.2 （C-7）， 41.9 （C-8）， 48.0 （C-9）， 38.4 （C-10）， 23.7 （C-11）， 125.6（C-12）， 139.4（C-13）， 42.8 （C-14）， 28.6 （C-15）， 24.9 （C-16）， 48.0 （C-17）， 53.6 （C-18）， 39.4 （C-19）， 39.4 （C-20）， 31.1 （C-21）， 37.4 （C-22）， 71.3 （C-23）， 17.2 （C-24）， 17.5 （C-25）， 17.6 （C-26）， 23.9 （C-27）， 180.0 （C-28）， 17.8 （C-29）， 21.4 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照，鑒定該化合物為2α， 3α， 23-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸（2α， 3α， 23-trihydroxyurs-12-en-oic acid）。

化合物4為無色針狀結(jié)晶（甲醇），1H-NMR （400 MHz，C5D5N） δ： 0.85， 0.97， 1.00， 1.13（各3H， s， 3H×4）， 1.06（3H， d， J = 6.1 Hz， H-29）， 2.72（1H， d， J = 11.7， H-18）， 3.74（1H， J=10.7 Hz， H-23a）， 3.92（1H， J=10.7 Hz， H-23b）， 4.15（1H， brs， H-3）， 4.28（1H， m， H-2）， 4.73（1H， br s， H-30b）， 4.78 （1H， brs， H-30a）， 5.41 （1H， br s， H-12）； 13C-NMR（100 MHz， C5D5N） δ： 42.0（C-1）， 66.4 （C-2）， 78.8 （C-3）， 40.1 （C-4）， 42.8 （C-5）， 18.4 （C-6）， 32.9 （C-7）， 40.1 （C-8）， 48.0 （C-9）， 38.5 （C-10）， 23.8 （C-11）， 125.8 （C-12）， 139.2 （C-13）， 42.0 （C-14）， 28.7 （C-15）， 25.0 （C-16）， 48.5 （C-17）， 55.8 （C-18）， 37.8 （C-19）， 154.1 （C-20）， 33.2 （C-21）， 39.9 （C-22）， 71.2 （C-23）， 16.7 （C-24）， 17.2（C-25）， 17.7 （C-26）， 23.8 （C-27）， 179.3 （C-28）， 17.9 （C-29）， 105.0 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]對(duì)照，鑒定該化合物為2α， 3α， 23-三羥基-12，20（30）-二烯-28-烏蘇酸（2α， 3α， 23-trihydroxyurs-12， 20（30）-dien-28-oic acid）。

化合物5為白色無定型粉末（氯仿-甲醇），EI-MS m/z（%）： 432 （M+， 9）， 414 （30）， 232 （41）， 231 （64）， 213 （35）， 95 （100）； 1H-NMR （C5D5N， 500 MHz） δ： 0.65 （3H， s， H-18）， 0.84 （3H， d， J = 6.9 Hz， H-27）， 0.86（3H， t， J = 6.9 Hz， H-29）， 0.88 （3H， d， J = 8.1 Hz， H-26）， 0.89（3H， s， H-19）， 0.98（3H， d， J=6.4 Hz， H-21）， 3.70 （1H， m， H-6）， 3.94（1H， m， H-3）； 13C-NMR（C5D5N5， 500 MHz） δ： 38.1 （C-1）， 33.8 （C-2）， 71.1 （C-3）， 32.4 （C-4）， 52.8 （C-5）， 68.6 （C-6）， 42.8 （C-7）， 34.8 （C-8）， 54.4 （C-9）， 36.5 （C-10）， 21.6 （C-11）， 40.3 （C-12）， 42.8 （C-13）， 56.4 （C-14）， 24.5 （C-15）， 28.6 （C-16）， 56.4 （C-17）， 12.2 （C-18）， 13.8 （C-19）， 36.5 （C-20）， 19.0 （C-21）， 34.3 （C-22）， 26.5 （C-23）， 46.1 （C-24）， 29.5 （C-25）， 19.3 （C-26）， 20.0 （C-27）， 23.4 （C-28）， 12.3 （C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]對(duì)照，鑒定該化合物為3β， 6α -二羥基豆甾烷（Stigmastane-3β， 6α-diol）。

化合物6為白色無定形粉末（氯仿），EI-MS m/z （%）： 415（4）， 398 （70）， 397 （100）， 381 （12）， 329 （4）， 275 （15）， 255 （22）， 215 （8）， 147 （39）， 145 （40）， 133 （24）， 121 （26）， 109 （35）， 95 （42）， 85 （47）， 69 （58）， 57 （67）。1H NMR （400 MHz， CDCl3） δ： 5.33 （1H， m， H-6）， 4.36 （1H， d， J = 7.6 Hz， H-1′）， 2.29 （2H， t， J = 7.4 Hz， H-2′）， 1.24 （26H， br s， 脂肪長鏈CH2）， 0.97（3H， s， H-19）， 0.92 （3H， d， J = 5.6 Hz， H-21）， 0.88（3H， d， J = 6.4 Hz， H-26）， 0.84（3H， d， J = 7.0 Hz， H-29）， 0.81（3H， d， J =7.0 Hz， H-27）， 0.67（3H， s，H-18）； 13C NMR（CDCl3， 100 MHz） δ： 37.3（C-1）， 29.6 （C-2）， 79.9 （C-3）， 38.9 （C-4）， 140.4 （C-5）， 121.9 （C-6）， 31.9 （C-7）， 31.8 （C-8）， 50.1 （C-9）， 36.2（C-10）， 21.1 （C-11）， 39.8 （C-12）， 42.3 （C-13）， 56.7 （C-14）， 24.3 （C-15）， 28.2 （C-16）， 56.2 （C-17）， 11.8 （C-18）， 19.4 （C-19）， 36.6 （C-20）， 19.0 （C-21）， 33.9 （C-22）， 29.4 （C-23）， 45.7 （C-24）， 26.2 （C-25）， 18.7 （C-26）， 19.8 （C-27）， 23.0 （C-28）， 11.9 （C-29）， 101.3 （C-1'）， 73.5 （C-2′）， 76.2 （C-3′）， 70.5 （C-4′）， 73.1 （C-5′）， 63.2 （C-6′）， 173.9 （C-1″）， 34.3 （C-2″）， 25.0 （C-3″）， 22.7 （C-4″）， 29.9 （脂肪長鏈）， 14.1（CH3（CH2）14COO）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]對(duì)照，鑒定該化合物為SitoindosideⅠ。

3 小結(jié)

本研究從中華獼猴桃根乙酸乙酯部分中分離得到6個(gè)化合物，化合物1～4為三萜類化合物，化合物5、6為甾體類化合物，其中化合物1、2、5、6首次從該植物中分離得到。中華獼猴桃在中國分布廣泛，具有多種藥理功效，可用于治療肝炎、提高免疫力等，在抗腫瘤方面效果尤為突出。現(xiàn)代藥理研究表明中華獼猴桃根三萜類成分的抗腫瘤效果顯著，因此對(duì)中華獼猴桃根化學(xué)成分的深入分析為其開展藥理活性方面的研究提供了基礎(chǔ)，也為該植物的開發(fā)利用提供了依據(jù)。

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