寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)相關(guān)Wnt10b基因多態(tài)性研究

摘 要：為探討寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)相關(guān)Wnt10b基因的遺傳變異情況，本研究以寧鄉(xiāng)豬為研究對象，并與外來品種大白豬進(jìn)行了比較，并用PCR-RFLP方法檢測了該基因一個(gè)A→G類型的 SNP。結(jié)果表明，PCR-RFLP-Sal I多態(tài)性在寧鄉(xiāng)豬品種中A基因?yàn)閮?yōu)勢等位基因，其基因頻率為0.686 6；大白豬中A基因?yàn)閮?yōu)勢等位基因，基因頻率為0.667 7。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，符合孟德爾定律。本研究為寧鄉(xiāng)豬的保種選育積累了有益的資料。

關(guān)鍵詞：豬；Wnt10b基因；PCR-RFLP

寧鄉(xiāng)豬原產(chǎn)于湖南省寧鄉(xiāng)縣的流沙河及草沖一帶，原名為流沙河豬或草沖豬。寧鄉(xiāng)豬形成歷史悠久，其體型特征是“絲頸葫蘆肚，耳薄嘴筒齊，稀毛現(xiàn)薄皮，魚尾后腳直，奶子一斬齊，四腳要撒蹄”，“烏云蓋雪銀頸圈”。體型中等，體質(zhì)疏松細(xì)致，體軀呈圓筒狀，毛色為黑白花，基本色調(diào)是四肢、肋腹及頸下的下部為白色，頭和臀部呈黑色。Wnt10b基因是經(jīng)典Wnt通路上的重要成員，該通路與豬肉質(zhì)性狀有密切關(guān)系。本研究旨在篩選寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)性狀遺傳標(biāo)記，旨在為該標(biāo)記應(yīng)用于寧鄉(xiāng)豬的保種選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

取小塊豬耳組織提取DNA，寧鄉(xiāng)豬67頭，大白豬325頭，共計(jì)402頭，采豬耳組織樣品-20 ℃保存。

1.2 基因組DNA提取及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）擴(kuò)增

基因組DNA提取按常規(guī)酚-氯仿進(jìn)行。Wnt10b基因SNP位點(diǎn)PCR-RFLP-Sal I的PCR擴(kuò)增條件為95 ℃ 2 min（預(yù)變性），95 ℃ 30 s（變性），59 ℃ 30 s（退火），72 ℃ 30 s（延伸），40個(gè)循環(huán)。

2 結(jié)果與分析

對Wnt10b基因A/G位點(diǎn)的基因頻率、基因型頻率見圖1。PCR-RFLP-Sal I多態(tài)性的分布情況如表1所示。

由表2可知，這2個(gè)豬種的遺傳純合度都在0.5以上，且比較接近。寧鄉(xiāng)豬的有效等位基因數(shù)低于大白豬。從多態(tài)信息含量上看，兩個(gè)品種豬的PIC在0.25～0.5之間，屬于中度多態(tài)。

3 討論與結(jié)論

在寧鄉(xiāng)豬品種中，A基因?yàn)閮?yōu)勢等位基因，其基因頻率為0.686 6。在外來品種大白豬中，A基因?yàn)閮?yōu)勢等位基因，基因頻率為0.667 7；經(jīng)適合性卡方檢驗(yàn)，可知符合孟德爾遺傳分離定律基因型頻率比1∶2∶1。大白豬和寧鄉(xiāng)豬在該基因位點(diǎn)具有遺傳多態(tài)性，并且具有較高的遺傳變異。