不同來源茶樹組織的茶多酚含量比較*

呂　倩， 涂云華， 李　劍， 劉濤華， 張榮慶， 羅　垚， 康穎倩*

(1.貴州醫科大學 微生物學教研室， 貴州 貴陽　550004； 2.貴州醫科大學附院 皮膚性病科， 貴州 貴陽　550004)

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不同來源茶樹組織的茶多酚含量比較*

呂倩1**， 涂云華2， 李劍1， 劉濤華1， 張榮慶1， 羅垚1， 康穎倩1***

(1.貴州醫科大學 微生物學教研室， 貴州 貴陽550004； 2.貴州醫科大學附院 皮膚性病科， 貴州 貴陽550004)

[摘要]目的： 比較不同茶樹組織中茶多酚的含量，為茶樹修剪枝葉的利用提供參考。方法： 通過生石灰水沉淀法提取綠茶樹的新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝、干燥樹枝的茶多酚粗提取物和純化茶多酚，比較4種茶樹組織的茶多酚粗提取物質量及提取率；采用分光光度計法測定標準茶多酚吸光度(A)值，繪制茶多酚標準曲線，通過4種茶樹組織純化茶多酚的吸光度(A)值在標準曲線上獲得茶多酚含量并計算其純度，比較4種茶樹組織純化茶多酚含量和純度。結果: 茶樹組織茶多酚粗提取物質量及提取率從高到低依次為新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝，茶多酚含量從高到低依次為新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝，純度從高到低依次則為新鮮葉、新鮮樹枝、干燥葉及干燥樹枝。結論: 新鮮茶葉和新鮮茶樹枝的茶多酚含量較高，可為茶葉及茶樹枝綜合開發利用提供參考。

[關鍵詞]茶； 茶多酚； 生石灰水沉淀法； 萃取，茶樹組織； 分光光度法

充分開發茶葉的用途，開展茶葉的綜合利用是一項具有重要意義的研究課題。茶多酚是上世紀初日本科學家發現的一種茶葉提取物，是一種天然抗氧化劑[1-3]，具有抗衰老、抗癌、消除人體過剩的自由基、抗輻射、降低血脂等功效[4-7]。在日常生活中人們通常用炒熟的茶葉來泡制茶水，很少使用新鮮茶葉或茶樹枝。而在茶園中，定期修剪保持茶樹采摘面積是茶葉豐產的重要措施，每年產生大量的廢棄修剪枝葉，造成不必要的浪費[8]。目前，國內關于不同來源茶樹組織所含茶多酚含量研究報道較少，本研究以茶樹組織的新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝為原料，通過生石灰水沉淀法提取茶多酚并測定其含量，為茶葉加工過程中的大量修剪枝葉充分開發利用提供參考依據。

1材料與方法

1.1材料、試劑與儀器

選用貴州省遵義市鳳岡縣經處理后的綠茶樹不同部位(新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝)為供試茶樹組織，茶多酚標準品、722分光光度計、旋轉蒸發器、乙酸乙酯、酒石酸亞鐵溶液。

1.2方法

1.2.1提取茶多酚采用生石灰水沉淀法[9]提取。稱取茶組織190 g，加適量蒸餾水后100 ℃加熱20 min，過濾，收集濾液。向濾液中加入適量石灰水調節濾液 pH 7～8，靜置 24 h。利用循環水式真空泵加速使濾液抽入濾瓶，抽濾完全后小心刮取布氏漏斗中濾紙上的石灰水提取物。用乙酸乙酯溶解石灰水提取物，將溶解液置于已經加入等量鹽酸分液漏斗中，進行萃取，放出下層鹽酸溶液，再放出上層乙酸乙酯溶液。用水浴回流蒸餾裝置回收乙酸乙酯，將回收乙酸乙酯后剩余的物質干燥，得到茶多酚粗提取物。重復乙酸乙酯萃取步驟，得到純化的茶多酚晶體。

1.2.2繪制茶多酚標準曲線[1]稱取茶多酚標準品0.25 g，加水定容至250 mL，混勻，即為1 g/L茶多酚標準溶液。分別吸取茶多酚標準溶液1.0、2.0、3.0及4.0 mL各加水至10 mL(換算后每克茶組織中分別含31.061、61.943、92.962及122.374 mg茶多酚)，分別加酒石酸亞鐵溶液10 mL，加入pH 7.5的磷酸緩沖液至50 mL，在波長540 nm處分別測定吸光度值(A)，以每克茶組織所含茶多酚含量為縱坐標，吸光度值(A)為橫坐標，繪制茶多酚標準曲線[10]。

1.2.3純化茶多酚含量及純度精確稱取200 mg茶多酚置于100 mL的燒杯中，加入30 mL沸水冷卻后轉移至100 mL的容量瓶中，準確量取1 mL置入25 mL的容量瓶中，加入5 mL的酒石酸鐵，用標準緩沖溶液(pH=7.5)稀釋至刻度，于波長 540 nm處測定吸光度值(A)，從茶多酚標準曲線獲得茶多酚的含量。根據獲得的茶多酚含量計算4種茶樹組織提取的茶多酚純度，茶多酚純度(%)=茶多酚質量/提取的茶多酚粗品質量×100[11]。

2結果

2.1茶多酚標準曲線

根據茶多酚標準溶液測定結果繪制茶多酚標準曲線(圖1)。得到線性回歸方y=205.5x+0.221，R2=1，表明曲線具有良好的線性關系?？筛鶕藴是€獲得不同茶樹組織的茶多酚含量。

圖1　茶多酚標準曲線Fig.1　Tea polyphenols standard curve

2.2茶多酚粗提取物質量及提取率

初步回收乙酸乙酯后，所得茶多酚的粗提取物質量及提取率從高到低依次為新鮮葉、干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝，見表1。

2.3純化茶多酚的茶湯顏色、含量及純度

從茶多酚標準曲線獲得的結果顯示，4種茶樹組織中，新鮮葉的茶多酚含量最高，其次為干燥葉、新鮮樹枝及干燥樹枝；純度從高到低依次則為新鮮葉、新鮮樹枝、干燥葉及干燥樹枝；4種茶樹組織茶湯顏色均為黃褐色。見表2。

表1　茶多酚粗提取物質量及提取率

表2　不同來源茶樹組織所提取的純化茶

3討論

茶葉經過加工熱炒后能夠較長時間儲藏，其滋味和香氣更加令人愉悅，其細胞組織使更多的對人體有益的物質能夠容易地通過沖泡而被人們吸收[12]。而在茶園中，定期修剪保持茶樹采摘面積是茶葉豐產的重要措施，每年會產生大量的廢棄修剪枝葉[10]。直接修剪的枝葉容易導致茶園土壤酸化[3]，不僅影響耕地，還會對茶園的生態系統造成影響。茶多酚是茶葉中多羥基酚類化合物的混合物[13]，占茶葉干重的15%～30%[14]。

目前，提取茶多酚的技術和方法已經十分成熟和穩定，從茶葉中提取茶多酚的純度已高達99%。本研究通過生石灰水沉淀法[9]提取不同茶樹組織的茶多酚，結果表明新鮮葉的茶多酚含量最高?？赡苁切迈r茶葉保持了茶葉最原始自然的狀態，儲存的多酚類物質含量最高。說明在不經過加工、干燥的情況下，新鮮茶葉能最大程度保留茶多酚。而干燥茶葉經過長時間儲存，水分蒸發，組織細胞受損，部分化學物質被氧化，因此茶多酚含量低于新鮮茶葉。不論干燥與否，茶葉中茶多酚均含量高于茶樹枝。但新鮮茶樹枝的茶多酚含量僅比干燥茶葉小一點。這為茶園中大量的廢棄枝葉的再利用給予啟發。并且新鮮茶樹枝茶多酚純度高于干燥茶葉，說明利用新鮮茶樹枝提取茶多酚方法可行。綜上，新鮮茶葉和新鮮茶樹枝的茶多酚含量較高，可為茶葉及茶樹枝綜合開發利用提供參考。

4參考文獻

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(2015-11-25收稿，2016-02-09修回)

中文編輯： 吳昌學； 英文編輯： 劉華

Comparative Study on Content of Tea Polyphenols Extracted from Different Tea Plant Tissue

LYU Qian1， TU Yunhua2， LI Jian1， LIU Taohua1， ZHANG Rongqing1， LUO Yao1， KANG Yingqian1

(1.DepartmentofMicrobiology,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,GuizhouChina; 2.DepartmentofDermatologyandVenerealDisease,theAffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To compare the tea polyphenols amount extracted from different tea plant tissure, and to provide the scientific reference for full development and utilization of tea branches and tea leaves. Methods: The tea polyphenols from four different tea plant tissue(fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch) were extracted by limewater precipitation method. The quality of tea polyphenols crude extract and rate of extraction were compared between 4 different tea plant tissue. Spectrophotometry was adopted to determine absorbance of tea polyphenols of standard concentration and the standard curve of tea polyphenols was plotted, by which the tea polyphenols content and purity of 4 different tea plant tissue was calculated and compared. Results: In 4 different tea plant tissue, the quality of tea polyphenols crude extract and rate of extraction from high to low in order were fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch, the tea polyphenols content from high to low in order were fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch, and the tea polyphenols purity from high to low in order were fresh tea leaves, fresh tea branch, dry tea leaves and dry tea branch. Conclusion: The tea polyphenols content in fresh tea leaves and fresh tea branch is relatively high. The study provides the scientific reference for full development and utilization of tea branches and tea leaves.

[Key words]tea; tea polyphenols; lime water precipitation; extraction; tea plant tissue; spectrophotometry

[中圖分類號]Q657.8

[文獻標識碼]A

[文章編號]1000-2707(2016)03-0265-03

*[基金項目]國家自然基金地方項目(31060006，31260029)； 貴州省社會發展科技攻關項目[黔科合SY字(2011)3017號]； 貴州省衛生廳科技項目(gzwkj2010-1-025)； 貴陽市科技局社會發展與民生計劃[筑科合同(2011103)16號]

**貴州醫科大學2013級碩士研究生

***通信作者 E-mail:joycekangtokyo@qq.com

網絡出版時間：2016-03-17網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160317.1024.020.html