CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達及其意義

韓鴻雁　李曉兵　許春偉　張鳳霞　喬西平　陳　寧　韓　雙

225300 泰州市第二人民醫院(韓鴻雁);100071 解放軍307醫院(李曉兵,許春偉,張鳳霞,喬西平,陳　寧,韓　雙)

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CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達及其意義

韓鴻雁李曉兵許春偉張鳳霞喬西平陳寧韓雙

225300 泰州市第二人民醫院(韓鴻雁);100071 解放軍307醫院(李曉兵,許春偉,張鳳霞,喬西平,陳寧,韓雙)

【摘要】目的探討CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達及其意義。方法收集經病理診斷的Castleman病10例，反應性淋巴組織增生13例，濾泡性淋巴瘤13例，其中包括手術切除標本和活檢穿刺標本，均應用免疫組織化學染色技術檢測各組的CD10和Bcl-6的表達情況。結果CD10免疫組化染色結果顯示，Castleman病與反應性淋巴組織增生差異有統計學意義(P=0.003)；Castleman病與濾泡性淋巴瘤差異有統計學意義(P<0.0001)。Bcl-6免疫組化染色結果顯示，Castleman病與反應性淋巴組織增生及濾泡性淋巴瘤差異均有統計學意義(P<0.0001)。結論CD10和Bcl-6可作為Castleman病的診斷及其與反應性淋巴組織增生和濾泡性淋巴瘤鑒別診斷的免疫學標志物。Castleman病的發病過程可能與Bcl-6基因異常有關；Bcl-6基因異常可能是Castleman病形態學改變的基礎。

【關鍵詞】Castleman病；CD10；Bcl-6；病因與發病機制；診斷及鑒別診斷

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:377～379)

Castleman病(castleman's disease,CD)在1954年由Castleman等[1]描述為類似胸腺瘤的縱膈腫塊。CD的臨床表現具有異質性，單一淋巴結或者全身淋巴結均可被累及，常發生于縱膈、腋窩和腹部，也可發生在咽部、胸膜、腎臟、胰腺和神經系統[2-5]。單中心型CD是最常見的類型，在所有CD中大約占70%的比例，多中心型CD臨床較少見，它的臨床表現與但中型相比，更加復雜多變，多數病例呈現系統性癥狀，且預后較差。有報道稱UCD也具有潛在的惡變可能[6]。目前沒有特異性的免疫組化指標可用于CD的診斷以及與其他疾病的鑒別診斷，所以探索可能的免疫組化指標是非常有必要的。本實驗采用免疫組織化學染色檢測CD10和BCL-6在Castleman病、反應性淋巴組織增生(reactive lymphoid hyperplasia，RLH)及濾泡性淋巴瘤(follicular lymphoma，FL)三者中的表達情況，探討CD10和BCL-6在Castleman病中的作用及其意義。

1材料與方法

1.1材料

收集解放軍307醫院病理科2000年-2014年經病理診斷的Castleman病10例(患者男女比為6∶4，年齡12～63歲，中位年齡42.5歲)，反應性淋巴組織增生13例(其中12例為濾泡型，1例為漿細胞型，男女比為7∶6，年齡4～70歲，中位年齡58歲)，濾泡性淋巴瘤13例(男女比為10∶3，年齡43～77歲，中位年齡56歲)，包括手術切除標本和活檢穿刺標本。

1.2方法

標本均經10%中性福爾馬林固定，常規脫水，石蠟包埋，4 μm厚切片，常規HE染色，光鏡觀察。免疫組化染色采用Envision兩步法。兔抗人CD10單克隆抗體，鼠抗人BCL-6單克隆抗體，Envision兩步法檢測試劑盒均購自于北京中杉金橋公司。操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行。

1.3結果判定

Bcl-6陽性區域為胞核，CD10陽性區域是細胞膜/質。陽性細胞計數10個高倍視野，取平均值。按陽性細胞數占生發中心細胞比例分：<5%為(-)，5%～25%為(﹢)，26%～50%(﹢﹢)，>50%為(﹢﹢﹢)。

1.4統計學處理

統計學分析使用Fisher確切概率法，檢驗水準α=0.05(SPSS 16.0軟件)。

2結果

2.1CD10

CD患者中CD10表達均為生發中心陰性，RLH中CD10陽性率為61.54%(8/13)，FL中CD10陽性率為92.31%(12/13)。經統計學分析顯示：CD10在CD與RLH中的表達差異有統計學意義(P=0.003)；CD10在CD與FL中的表達差異有統計學意義(P<0.0001)，見表1。

2.2Bcl-6

CD患者中Bcl-6表達均為生發中心陰性，RLH中Bcl-6陽性率為84.62%(11/13)，FL中Bcl-6陽性率為76.92%(10/13)。經統計學分析顯示：Bcl-6在CD與RLH中表達差異有統計學意義(P<0.0001)；Bcl-6在CD與FL中表達差異有統計學意義(P<0.0001)，見表1。

表1　CD10和Bcl-6在CD、RLH和

3討論

3.1CD10、Bcl-6在CD診斷與鑒別診斷中的作用及意義

目前仍未發現Castleman病特異性的診斷指標。在病理和臨床的診斷工作中，常因為CD的形態變異程度比較寬泛，然而鑒別診斷方法有限，特別是當CD與惡性淋巴瘤或者其他類型的淋巴組織增生性疾病鑒別時，更容易產生組織病理學上診斷的分歧。該病難以早期診斷，并且極易誤診。①反應性淋巴組織增生：淋巴結結構保存，在淋巴結的皮質區濾泡較顯著，濾泡大小、形狀差異顯著，并伴有長形、成腳型和啞鈴型的形狀，反應性生發中心境界清楚，無或僅有中毒的包膜和包膜周圍脂肪炎細胞浸潤，有輕微或無網織纖維支架的變化，濾泡反應中心由淋巴細胞、組織細胞核王莊細胞組成，有少量或沒有不規則細胞或異形的胞核，反應中心吞噬現象活躍，其中可見中度至明顯的分裂活性；反應中心外分裂像不可見或者罕見，無非典型分裂像。②濾泡性淋巴瘤：正常結構完全破壞，皮、髓質均布滿濾泡，濾泡大小和形態有輕到中度的差異，濾泡呈衰減狀，包膜和包膜周圍脂肪大量浸潤，可有或無包膜外腫瘤性濾泡形成，濾泡周圍可有致密的網織纖維出現。濾泡由多型性和不規則細胞核的瘤細胞組成，無吞噬現象，分裂像比較缺乏，濾泡外其數量差異無顯著性；可出現非典型的分裂像，濾泡內外的細胞類型相似。免疫組化染色及基因重排分析有助于CD的鑒別診斷[7]。CD的診斷和鑒別診斷一定要結合各方面檢查結果做出綜合性的考慮分析。

CD10是1種分子量在100kD左右的鋅依賴金屬蛋白酶，也被稱為急性淋巴母細胞性白血病共同抗原，它主要是在細胞膜上發揮其生物學功能，可滅活生物活性肽。CD10除了表達于在前B細胞和GCB細胞外，還表達與某些上皮的細胞，往往將CD10作為GC細胞的標記物來使用[8]。此外，還可以作為1種分子標記物來劃分急性白血病的分型，并對惡性淋巴瘤的次級分類起到重要作用。本研究中CD10在10例CD患者均為生發中心陰性，在RLH中表達為61.54%(8/13)，在FL中表達為為92.31%(12/13)。經統計學分析顯示：CD10在CD與RLH之間差異有統計學意義(P=0.003)；在CD與FL之間差異有統計學意義(P<0.0001)，結果提示CD10免疫組織化學染色在CD的診斷以及與RLH和FL鑒別診斷時可作為輔助指標和依據。

Bcl-6表達于淋巴濾泡生發中心B細胞，也可表達于來源于GCB細胞的一些淋巴瘤中，Bcl-6在GC外的細胞中不表達。本研究中Bcl-6在10例CD患者均為生發中心陰性，在RLH中表達為84.62%(11/13)，在FL中表達為76.92%(10/13)。經統計學分析顯示：Bcl-6在CD與RLH之間差異有統計學意義(P<0.0001)；BCL-6在CD與FL之間差異有統計學意義(P<0.000)。提示Bcl-6免疫組織化學染色在CD的診斷以及與RLH和FL鑒別診斷時可作為輔助的指標和依據。

3.2Bcl-6在CD發病過程中的作用及意義

CD臨床較少見，導致了其臨床研究局限，目前對這種疾病的理解還不全面。其發病機制尚不明確，診治較困難。大量證據傾向免疫調節異常導致了淋巴組織中B細胞和漿細胞的過量增殖。目前的研究大多認為CD可能與病毒感染如HHV-8、細胞因子調節異常，如IL-6表達升高，抗原呈遞細胞功能的異常及血管增生等有關[9]。 Bcl-6是1種轉錄抑制因子，位于3q27染色體，也稱之為LAZ3或BCL25基因，編碼一個鋅指蛋白，具有阻止細胞分化、凋亡，并促進細胞增殖發育的作用。Bcl-6是淋巴系統重要的調節因子。在B細胞的發育過程中，Bcl-6參與調節淋巴細胞的分化、細胞周期發育的調控以及免疫反應等重要功能，這些提示Bcl-6在B細胞的發育、成熟、生發中心的形成和淋巴細胞源性腫瘤的發生發展中起著重要的作用。此外Bcl-6還可以阻斷BCR結合導致的B細胞活化過程及Blimp/PRDM1介導的B細胞向漿細胞轉化過程。Bcl-6蛋白可通過抑制P53蛋白表達來避免生發中心細胞凋亡，保證生發中心形成和維持。目前認為CD的發病與免疫調節異常有關；漿細胞型被認為與感染和炎癥有關；還有人認為CD是腫瘤前期病變。HV型CD有退行性轉化的生發中心，PC型CD病理上呈炎癥樣改變，臨床上有炎癥病變的征象。Bcl-6基因結構的改變可能會影響到癌基因、抑癌基因、免疫系統發育基因以及與炎癥有關的趨化因子基因，這些基因的改變可引發上述一系列病理改變。Dent等[10]研究發現去除Bcl-6基因的小鼠B細胞和T細胞發育正常，但是不能形成生發中心，同時還伴有免疫缺陷和炎癥性疾病。本實驗中Bcl-6在10例CD淋巴結活檢標本生發中心均為陰性，與RLH及FL均有統計學差異。提示CD的發病或許與BCL-6基因異常導致的調控失常有關，同時Bcl-6基因異常可能是CD病理形態學改變的基礎，需要進一步研究去證實。

參考文獻

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[3]Cecka F,Ferko A,Jon B,et al.Pancreatic Castleman disease treated with laparoscopic distal pancreatectomy〔J〕.Hepatobiliary Pancreat Dis Int,2013,12(3):332-334.

[4]隋燕霞,王鴻雁,楊喆,等.Castleman病合并腎臟損害5例臨床病理學分析〔J〕.臨床與實驗病理學雜志,2013,29(8):859-862.

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[10]Dent AL,Shaffer AL,Yu X,et al.Control of inflammation,cytokine expression,and germinal center formation by BCL-6〔J〕.Science,1997,276(5312):589-592.

(編輯：吳小紅)

Expression and Significance of CD10 and BCL-6 in Castleman Disease

HANHongyan,LIXiaobing,XUChunwei,etal.

TaizhouSecondPeopleHospital,Taizhou,100071

【Abstract】ObjectiveTo explore the expression and significance of CD10 and BCL-6 in Castleman disease.Methods10 cases of Castleman disease,13 cases of reactive lymphoid hyperplasia and 13 cases of follicular lymphoma were selected.Which including surgical resection specimens and biopsy specimens.CD10 and BCL-6 expression were detected by immunohistochemical staining.Results Expression of CD10 was detected by immunohistochemical staining,there were statistically significant difference between Castleman's disease and reactive lymphoid hyperplasia (P=0.003);and there were statistically significant difference between Castleman's disease and follicular lymphoma (P<0.0001).Expression of Bcl-6 by immunohistochemical staining showed that there was statistically significant difference between Castleman's disease and reactive lymphoid hyperplasia and follicular lymphoma (P<0.0001).ConclusionCD 10 and Bcl-6 can be used as immunological markers in the diagnosis of Castleman's disease and differential diagnosis with reactive lymphoid hyperplasia and follicular lymphoma;The pathogenesis of Castleman’s disease may be associated with Bcl-6 gene abnormalities；Bcl-6 gene abnormality may be the basis of morphological changes in Castleman's disease.

【Key words】Castleman's disease;CD10;BCL-6;Etiology and pathogenesis;Diagnosis and differential diagnosis

(收稿日期2015-04-20修回日期 2015-10-08)

中圖分類號：R734.5

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2016)03-0377-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.03.009

通訊作者：李曉兵